噬菌蛭弧菌、噬菌体和细菌素(2)
(二)噬菌体的形态与结构噬菌体不能在光学显微镜下观察到,因此,对噬菌体形态、结构的认识,得从电子显微镜开始,这一点与细菌素是相同的。噬菌体个体叫做病毒粒子,它的形状有3种,包括蝌蚪形、微球形和纤丝形。目前已知大部分噬菌体是属于蝌蚪形,它由头和尾两部分组成。噬菌体尾部的结构比较复杂,是感染、吸附、侵入宿主细胞的器官。蛭弧菌、细菌素不具有这种结构上的特殊分化感染器官。按其尾部形态特征可分为两类,一类尾部较长,有伸缩性尾鞘,如T2、T4和T6等;另一类尾部无伸缩性,并呈现不同程度的易变性,如T1、T3、T5、T7和λ噬菌体等。以T2噬菌体为例,头呈六角棱柱体,头长95nm,宽65nm。外壳是蛋白质,由2000个蛋白质亚单位组成。亚单位的分子量为80kD,外壳厚2.5~3nm ,具有弹性、能伸缩,有助于核酸“注射”到宿主菌体内。尾部至少有尾鞘、尾髓、基板、尾丝、尾针等几部分组成。微球形噬菌体较小,约20~60nm,电镜可见到呈二十面......阅读全文
噬菌体中和试验的特点
中文名称噬菌体中和试验英文名称bacteriophage neutralization test;phage neutralization test定 义一种检测低水平抗噬菌体抗体的敏感试验。即将噬菌体与特异性抗体共温育,以抑制该噬菌体感染宿主,通过观察噬菌斑数量变化,可对中和作用进行定量。应用学
噬菌体中和试验的定义和目的
中文名称噬菌体中和试验英文名称bacteriophage neutralization test;phage neutralization test定 义一种检测低水平抗噬菌体抗体的敏感试验。即将噬菌体与特异性抗体共温育,以抑制该噬菌体感染宿主,通过观察噬菌斑数量变化,可对中和作用进行定量。应用学
自噬体和自噬溶酶体有什么区别与联系
自噬溶酶体是因为细胞内发生了自噬现象,具体表现为LC3蛋白从I型转为II型,Atg5蛋白表达升高。自噬溶酶体的出现意味着细胞步入死亡。 溶酶体是一般真核细胞内具有的细胞器
概述弧菌的形态特征
弧菌菌体只有一个弯曲,呈弧状或逗点状。如霍乱弧菌。革兰氏染色阴性,长0.8~3μm、宽0.5~1.5μm,从病人新分离的细菌形态典型,人工培养后常呈杆状而不易与其他肠道菌区别。取病人米泔水样粪便直接涂片染色镜检,可见其相互排列如“鱼群”状。无芽孢和荚膜,有菌毛和一根单鞭毛,运动非常活泼。悬滴观察
细菌的合成代谢产物及意义
细菌的合成代谢产物及意义是临床检验技师考试辅导的部分内容,以下是医学教育网对这块内容的整理,希望对考生有所帮助: (1)热原质:大多数为革兰阴性菌合成的菌体脂多糖。注入人体或动物体内能引起发热反应,故称热原质。 注:热原质耐高温,121℃20min不被破坏,蒸馏法去除热原质较好。 (2)毒
概述λ噬菌体的整合和转导噬菌体的形成机制
λ噬菌体的整合和转导噬菌体的形成机制首先由A·坎贝尔所推测,以后经实验证明。 当用λ噬菌体转导发酵乳糖的基因时,大约10^6 被感染的细菌中出现一个转导子。这一事实说明大约10^6 噬菌体中只有一个带有发酵乳糖的基因,这是低频转导。当λ噬菌体整合到寄主细胞后,带有发酵乳糖基因的λ噬菌体也整合到
外界因素对细菌的影响(二)
有些噬菌体不在敏感细菌内增殖,其基因整合于细菌基因组中,成为细菌DNA的一部分,当细菌分裂时,噬菌体的基因亦随着分布至两个子代细菌的基因中。这种噬菌体称为溶源性噬菌体(Lysogenic phage)或温和噬菌体(Temperat phage)。整合在细菌DNA上的噬菌体基因称为前噬菌体
粘菌素产生耐药性的沙门氏菌
近日,一项刊登在国际杂志Journal of Medical Microbiology上的研究报告中,来自北卡罗莱纳州立大学的科学家们通过对美国一名患者机体的样本进行研究,发现了一种能让沙门氏菌对抗生素产生耐药性的特殊基因,相关研究结果首次表明,mcr-3.1基因已经从亚洲传入了美国。图片来源:
一种靶向控制噬菌体来对抗细菌的方法:噬菌体疗法
有人的地方就有江湖?微观世界其实也一样残酷。研究人员发现:假单胞菌会利用自己产生的信号分子,选择性操纵竞争菌株中的噬菌体来击败敌人。这个结果或许提示了一种靶向控制噬菌体来对抗细菌的方法:噬菌体疗法。 噬菌体仍然是人类微生物群中一个相对未知的组成部分。然而,它们可以在细菌的生命周期中发挥强大
CDNA文库筛选
(一)λgt11 cDNA文库铺平板宿主细菌制备1.用一个E.coli宿主菌株单菌落分别接种2×5ml LB培养基(Y1088用于噬菌斑杂交,Y1090用于免疫筛选),于37℃振荡培养过夜。2.将过夜培养物以3000×g离心5min。3.分别用2ml λ-dil(10 mmol/L tris-Cl,
肠道菌群噬菌体或为帕金森病“幕后黑手”
大约90%的帕金森病为“散发性”,其病因不明。2030年,我国将成为世界帕金森病人数最多国家,严重威胁人民健康和生活质量,探索帕金森病病因,对研发对因防治新方法,具有迫切性及重大意义。日前,北京大学科研人员发现,长年便秘引起的肠道菌群噬菌体激增、农村环境噬菌体大量广泛分布,可能是便秘者、及农村环境帕
关于M13噬菌体的宿主菌的介绍
由于 M13 噬菌体通过 F 质粒编码的性纤毛进入宿主细胞内,故只能用雄性细菌来增殖病毒。 Messing 及其同事已经构建了许多携带 F' 质粒并便于 M13 载体进行基因操作的多种大肠杆菌菌株,其中最重要的遗传标志有: (1) lacZ D Ml5 lacZ 基因缺失突变体。 (
克隆在原核载体的DNA片段的快速鉴定
实验方法原理 已转化的重组载体的细菌细胞或 λ 噬菌体颗粒可通过直接从培养皿上挑取菌落或噬菌斑获得,然后直接加入到 PCR 混合液中,这时 PCR 混合液中含有除了未加热稳定 DNA 聚合酶外的所有试剂,其中引物与所要鉴定的已克隆 DNA 片段的侧翼序列互补。实验材料 热稳定 DNA 聚合酶正义和反
克隆在原核载体的DNA片段的快速鉴定
实验方法原理 已转化的重组载体的细菌细胞或 λ 噬菌体颗粒可通过直接从培养皿上挑取菌落或噬菌斑获得,然后直接加入到 PCR 混合液中,这时 PCR 混合液中含有除了未加热稳定 DNA 聚合酶外的所有试剂,其中引物与所要鉴定的已克隆 DNA
Nat-Commun:揭示人类肠道菌群抵抗霍乱弧菌定植机制
霍乱仍然是一个巨大的公共卫生问题。在过去的200年里,这种急性腹泻疾病已经发生了七次大流行。根据世界卫生组织(WHO)的数据,霍乱每年仍然造成多达14.3万人死亡,并感染多达400万人,大部分在贫穷或不发达国家。 霍乱是由霍乱弧菌(Vibrio cholerae)引起的,霍乱弧菌是一种水传播的
细菌室操作规程(十一)
根据以上分型原理,鉴定致病性霍乱弧菌应遵循以下3个步骤: ① 可疑菌落与Ο1群抗血清凝集,确定是属于Ο1群,还是非Ο1群弧菌。 ② 与分型血清A、B凝集,确定血清型。 ③ 作生化试验进行生物分型,确定是古典生物型,还是El-tor生物型。 3.其他弧菌的鉴定:弧菌属中除Ο1群霍乱弧菌多次暴发世界
移动基因组增加弧菌基因组可塑性的机制
移动基因组增加微生物物种多样性的示意图。研究团队 供图 6月27日,中国科学院南海海洋研究所热带海洋生物资源与生态重点实验室研究员王晓雪团队通过研究珊瑚体内具有生态竞争的假交替单胞菌和弧菌之间的互作,揭示了一种移动基因组增加弧菌基因组可塑性,驱动弧菌遗传和表型多样化的机制。相关研究在线发表
噬菌体DNA在滤膜上的杂交实验
通过用 32P 标记探针的原位杂交,可筛选携带有固定化 DNA 的滤膜,这些 DNA 来源于噬菌斑。该技术是强有力的、高度特异的和很灵敏的,能从数千个噬菌斑中鉴别出单一的重组子。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理通过用 32P 标记探针的原位杂交,可筛选携带有固定化 DNA
Northwestern筛选蛋白表达文库实验
实验方法原理 Northwestern 筛选蛋白表达文库的方法是通过构建 IPTG 可诱导的融合蛋白表达文库(融合蛋白的 N 端由载体序列编码,C 端由克隆到载体的 cDNA 文库编码),进而诱导融合蛋白表达,并将蛋白质固定于硝酸纤维素滤膜上,以标记的 RNA 探针进行筛选,最终获取能与靶
Northwestern筛选蛋白表达文库实验
Northwestern 筛选蛋白表达文库的方法是通过构建 IPTG 可诱导的融合蛋白表达文库(融合蛋白的 N 端由载体序列编码,C 端由克隆到载体的 cDNA 文库编码),进而诱导融合蛋白表达,并将蛋白质固定于硝酸纤维素滤膜上,以标记的 RNA 探针进行筛选,最终获取能与靶 RNA 分子特异性结合
Northwestern筛选蛋白表达文库实验
实验方法原理 Northwestern 筛选蛋白表达文库的方法是通过构建 IPTG 可诱导的融合蛋白表达文库(融合蛋白的 N 端由载体序列编码,C 端由克隆到载体的 cDNA 文库编码),进而诱导融合蛋白表达,并将蛋白质固定于硝酸纤维素滤
单-链-抗-体-的-噬-菌-体-展-示-技-术
实验步骤 基 本 方 案 1 全套单链抗体噬菌体载体的构建材 料新鲜分离的小鼠脾脏或者 IO7 杂 交 瘤 细 胞(单 元 1*3)R N A 提取试剂R T -P C R 试剂D E P C 水寡 核 苷 酸 引 物(表 14. 3.1)DNA marker琼脂糖胶回收试剂盒(Qiaquick G
芪蛭通络胶囊成分有哪些?
芪蛭通络胶囊的成分包括黄芪、水蛭、人参、麦冬、五味子、当归、川芎、毛冬青、赤芍、鸡血藤、丹参、制何首乌、红花、泽兰、土鳖虫、地龙、僵蚕、郁金、姜黄、全蝎、天麻、肉桂、羌活、猪牙皂、胆南星、冰片。 这些成分共同作用,用于补气活血,通络止痛,适用于中风恢复期后遗症等症状。
霍乱的传播扩散可以利用噬菌体疗法预防么?
近期发生在美国的一例引人注目的病例中,一种杀菌的病毒混合制剂成功治疗了一位囊性纤维化的患者,这名患者遭受了对多种抗生素都产生耐药性的病原体引起的致死性感染。当然了,能够治愈感染最好不过了,那么使用噬菌体(杀菌病毒)来预防感染效果如何?其适用于治疗某些疾病吗?尽管利用病毒来预防由细菌引起的感染可能
细胞培养瓶在细菌检查中的应用
利用细胞培养瓶可对细菌进行溶源性检查,具体操作方法如下:1.溶源菌培养:将经LB斜面活化的大肠杆菌225(λ),接种于装有20mlLB培养液的250ml细胞培养瓶内,30℃振荡培养16h,再从中取2ml菌悬液接入另装有20ml LB培养液的250ml三角瓶内,37℃振荡培养2h至对数期。2.排除游离
建立随机重叠DNA插入文库实验
试剂、试剂盒 乙酸铵 ATP 乙醇 甘油 蒸馏水 IPTG MgCl2 NaCl 酚
关于多黏菌素类抗生素的基本介绍
多黏菌素类抗生素是1947年从多黏芽孢杆菌培养液中获得的一组抗生素,含有多黏菌素A,B,C,D,E等多种成分,临床仅用多黏菌素B和多黏菌素E。多黏菌素类属窄谱抗生素,只对某些革兰阴性杆菌具有强大抗菌活性,如大肠埃希菌、肠杆菌属、克雷伯菌属及铜绿假单胞菌呈高度敏感,特别对铜绿假单胞菌作用最强。志贺
噬菌体的鉴定方法和步骤
1 样品采集将一定的样品放入灭菌三角瓶中,加入对数生长期的敏感指示菌如大肠杆菌菌液3~5mL,再加20mL二倍肉汤蛋白胨培养液。2 增殖培养30℃振荡培养12~18h, 使噬菌体增殖。3 离心分离将上述培养液以3000rpm离心15~20min, 取上清液,用pH7.0,1%蛋白胨水稀释至10-2~
Science:炎症会促使肠道微生物进化
欧洲的科学家们发现沙门氏菌感染引起的肠道炎症能激活细菌内的噬菌体,从而帮助帮助感染了细菌的病毒传播给其它菌株,并提高它们的增殖成功率。这些发现不仅揭示了病毒中遗传性状的编码特点,如毒力增强,而且也指出了如果用一种疫苗来减轻炎症,也许能帮助治疗某些感染。 这一研究成果公布在3月16日的Scien
关于溶菌作用的定义介绍
溶菌作用细菌细胞在外加因素的作用下,引起的解体现象。例如溶菌酶、特异性噬菌体或免疫血清加补体等都能溶菌。依抗原、抗体的种类不同可有溶血反应、溶菌反应等。溶菌反应只在某些细菌中出现(如霍乱弧菌)。应用溶血反应是补体结合反应中不可少的因素。溶血反应是由于抗原(红血球)和抗体(溶血素)进行特异性的结合