用于PCR的模板DNA制备实验——直接法(DNA免提法)
实验步骤1. 标本太少时,可将一张石蜡切片经脱蜡,水化,蒸馏水清洗,无菌蒸馏水浸泡,取出晾至半干。2. 加入 20~80 μl 直接裂解液中,加 20 mg/ml 蛋白酶 K 0.2~1 μl,放置 55℃ 裂解 3 h 以上;100℃10 min 灭活蛋白酶 K;10000 r/min 离心 10 min,直接用上清液作模板 DNA。(直接组织裂解液配制:TE 中加入 0.1% Tween-20 或 5% Chelex-100,4℃ 下保存)......阅读全文
用于PCR的模板DNA制备实验——直接法(DNA-免提法)
实验步骤1. 标本太少时,可将一张石蜡切片经脱蜡,水化,蒸馏水清洗,无菌蒸馏水浸泡,取出晾至半干。2. 加入 20~80 μl 直接裂解液中,加 20 mg/ml 蛋白酶 K 0.2~1 μl,放置 55℃ 裂解 3 h 以上;100℃10 min 灭活蛋白酶 K;10000 r/min 离心 10
用有机溶剂抽提法从DNA中除去溴化乙锭实验
欲从经 CsCl 梯度纯化的 DNA 中去除溴化乙锭,常用有机溶剂反复抽提的方法。随后可用透析或沉淀的方法去除 CsCl。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理欲从经 CsCl 梯度纯化的 DNA 中去除溴化乙锭,常用有机溶剂反复抽提的方法。随后可用透析或沉淀的方法去除 CsC
线形质粒DNA-5粘性末端去磷酸实验——抽提法
实验材料质粒试剂、试剂盒CIAPEDTABUFFER酚-氯仿乙醇TE仪器、耗材水浴锅抽干机实验步骤1、质粒DNA和CIAP以及BUFFER 37 ℃水浴30min 2、补充CIAP 再37 ℃水浴30min 3、加入50 mM EDTA至终浓度5 mM 75 ℃加热10min 失活CIAP 4、冷却
用有机溶剂抽提法从DNA中除去溴化乙锭实验
实验方法原理 欲从经 CsCl 梯度纯化的 DNA 中去除溴化乙锭,常用有机溶剂反复抽提的方法。随后可用透析或沉淀的方法去除 CsCl。 实验材料 DNA
用有机溶剂抽提法从DNA中除去溴化乙锭实验
实验方法原理 欲从经 CsCl 梯度纯化的 DNA 中去除溴化乙锭,常用有机溶剂反复抽提的方法。随后可用透析或沉淀的方法去除 CsCl。实验材料 DNA 样品试剂、试剂盒 乙醇水饱和的异戊醇或 n-丁醇酚TE仪器、耗材 透析管和夹离心机和转头实验步骤 一、材料1. 缓冲液和溶液乙醇,水饱和的异戊醇或
组织相溶性抗原基因分型中三种DNA快速抽提法比较
血液DNA抽提的质量和速度是影响组织相溶性抗原(HLA)基因分型效果的一个主要因素,目前普遍采用的标准酚-氯仿抽提法,因耗时较长,难以满足临床需求。为此,我们建立了NP-40法及辛酸法,进一步缩短时间,简化了操作步骤。现将NP-40法、辛酸法与标准酚-氯仿抽提法对比研究结果报告如下。一、资料和方法本
溶酶体的新提法的介绍
关于溶酶体的类型和命名,有新提法。有研究资料表明,根据溶酶体的形成过程和功能,把溶酶体命名为前溶酶体(endolysosome)和溶酶体。晚期胞内体与脱包被的含有溶酶体酶的转运小泡融合成前溶酶体,它从高尔基体或细胞膜上的转运泡(如果是从细胞膜上通过胞饮作用在网格蛋白介导下回收的溶酶体酶则在脱去包
索氏抽提法操作步骤
操作步骤:1.把滤纸做成与提取器大小相应的滤纸筒,然后把需要提取的样品放入滤纸筒内,装入提取器。注意滤纸筒既要紧贴器壁,又要方便取放。(滤纸筒上可以套一圈棉线,方便提取完成后取出滤纸筒。)被提取物高度不能超过虹吸管,否则被提取物不能被溶剂充分浸泡,影响提取效果。被提取物亦不能漏出滤纸筒,以免堵塞虹吸
索氏抽提法步骤是什么
1.把滤纸做成与提取器大小相应的滤纸筒,然后把需要提取的样品放入滤纸筒内,装入提取器。注意滤纸筒既要紧贴器壁,又要方便取放。(滤纸筒上可以套一圈棉线,方便提取完成后取出滤纸筒。)被提取物高度不能超过虹吸管,否则被提取物不能被溶剂充分浸泡,影响提取效果。被提取物亦不能漏出滤纸筒,以免堵塞虹吸管。如
关于茶多酚的微波浸提法简介
微波浸提法是最近几年刚开始的一种新方法,基本原理是利用在微波场中分子发生高频的运动,扩散速率增大,因此茶多酚等浸提物在微波的辐射作用下可快速浸取出来。利用微波辅助浸提,一般一次只要数分钟的时间即可达到传统浸提数小时的效果。因此大大的减少了茶多酚长时间在高温下的氧化,提高产品的品质与收率。微波技术
粗脂肪的定量测定——抽提法
一、目的与要求:1、熟悉掌握粗脂肪的测定方法。2、熟悉与掌握重量分析的基本操作,包括样品处理,烘干,恒重等。二、原理:本法为重量法,用脂肪溶剂将脂肪提出后进行称量,该法适用于固体和液体样品。通常将样品浸于脂肪溶剂,为乙醚或沸点30℃至60℃的石油醚,借助于索氏提取器进行循环抽提。用本法提取的脂肪性物
粗脂肪的定量测定:抽提法
一、目的与要求:1、熟悉掌握粗脂肪的测定方法。2、熟悉与掌握重量分析的基本操作,包括样品处理,烘干,恒重等。二、原理:本法为重量法,用脂肪溶剂将脂肪提出后进行称量,该法适用于固体和液体样品。通常将样品浸于脂肪溶剂,为乙醚或沸点30℃至60℃的石油醚,借助于索氏提取器进行循环抽提。用本法提取的脂肪性物
DNA功能化的SERS基底免标记检测多氯联苯研究中获进展
近期,中国科学院合肥物质科学研究院技术生物与农业工程研究所研究员黄青课题组在DNA功能化的表面增强拉曼散射基底免标记检测持久性有机污染物——多氯联苯(Polychlorinated biphenyls,简称PCBs)方面取得新进展,相关结果发表在《美国化学学会应用材料界面》上(ACS Appli
IgG抗体的粗提法提取球蛋白
大多用硫酸铵盐析法或硫酸钠盐析法。硫酸铵盐析须经过多次沉淀,第一次用40%饱和度,第二次用35%饱和度,第三次用33%饱和度,经三次提取后的γ球蛋白基本是IgG成分。硫酸钠法更简便,用20%即可将γ球蛋白沉淀出来。经盐析后的γ球蛋白虽大多属于IgG,但还有5%其他区带蛋白,如γ区的杂蛋白。又因I
溶酶体的新提法分类和命名介绍
关于溶酶体的类型和命名,有新提法。有研究资料表明,根据溶酶体的形成过程和功能,把溶酶体命名为前溶酶体(endolysosome)和溶酶体。晚期胞内体与脱包被的含有溶酶体酶的转运小泡融合成前溶酶体,它从高尔基体或细胞膜上的转运泡(如果是从细胞膜上通过胞饮作用在网格蛋白介导下回收的溶酶体酶则在脱去包
索氏抽提法测定脂肪原理
脂肪是食品的主要成分之一,大多数动物性食品和一些植物性食品,尤其是植物的种子、果实或果仁,都含有脂肪或脂类化合物。在实用油脂中主要存在甘油三酸酯以及一些脂肪酸、磷酸、糖酯、脂溶性维生素等类酯化合物。脂肪有两种存在形式,即游离脂肪和结合脂肪,测定食品中脂肪含量的方法有很多,但大多数采用低沸点溶
脂肪的测定方法索氏抽提法
1 原理样品用无水乙醚或石油醚等溶剂抽提后,蒸去溶剂所得的物质,在食品分析上称为脂肪或粗脂肪。因为除脂肪外,还含色素及挥发油、蜡、树脂等物。抽提法所测得的脂肪为游离脂肪。2 试剂2.1 无水乙醚或石油醚。2.2 海砂:食品中水分的测定3 仪器索氏提取器。4 操作方法4.1 样品处理4.1.1 固体样
质谱仪注册免临床吗
第一类医疗器械产品备案,不需要进行临床试验。申请第二类、第三类医疗器械产品注册,应当进行临床试验;但是,有下列情形之一的,可以免于进行临床试验:(1)工作机理明确、设计定型,生产工艺成熟,已上市的同品种医疗器械临床应用多年且无严重不良事件记录,不改变常规用途的;(2)通过非临床评价能够证明该医疗器械
助学免息贷款相关
近日,经国务院同意,财政部、教育部、人民银行、银保监会联合印发《关于做好2022年国家助学贷款免息及本金延期偿还工作的通知》(财教〔2022〕110号,以下简称《通知》)。现解读如下: 1.《通知》出台的背景和意义是什么? 答:党中央、国务院高度重视高校毕业生就业服务和保障。习近平总书记强调
关于茶多酚的超声波浸提法介绍
超声波浸提法利用超声波的机械破碎和空化作用,加速茶多酚等浸提物从茶叶向溶剂的扩散速率,缩短浸提时间,浸提液采用与传统工艺相同处理精制过程取得产品。从已报道的研究结果可见,在超声波辐射作用下,浸提不超过一小时的效果可与传统浸提数小时的效果相比。传统工艺浸提不论是用水或有机溶剂,都时间较长,在湿度较
碱提法提取虾青素的方法介绍
碱提法是用酸将水产品加工下脚料甲壳中的CaCO3溶解,用碱(NaOH+Na2CO3)将与蛋白质结合的虾青素分离,再将其中的蛋白质溶出,达到提取虾青素的目的。碱提法需消耗大量的酸、碱,其废水对环境污染严重,而且虾青素在碱性环境下高温处理时,被氧化成为鲜红色的虾红素,因此碱提法所得到的不是虾青素而是
影响索氏抽提法准确测量的因素?
1、如何利用残余法测定油料作物种子中的粗脂肪含量? 残余法测定油料作物种子中的粗脂肪含量,是用低沸点有机溶剂(乙醚或石油醚)回流抽提,除去样品中的粗脂肪,以样品与残渣重量之差,来计算粗脂肪含量。 2、测定过程中为什么需要对样品、抽提器、抽提用有机溶剂都要进行脱水处理? 进行脱水处理的原因有三:
脂肪浸提—索氏脂肪浸提法实验
实验方法原理用脂肪溶剂将脂肪从样品中浸提出来,然后将溶剂蒸发除去,称取瓶中残留物的重量或称量样品损失的重量,即可求出样品中粗脂肪的含量。在测定样品含油量时,通常采用沸点低于60℃的有机溶剂作为脂肪溶剂 (如乙醚和沸点为30℃至60℃的石油醚)所提取的脂溶性物质为脂类物质的混合物,其中含有脂肪
食品中脂肪的测定——索氏抽提法
原理脂肪易溶于有机溶剂。试样直接用无水乙醚或石油醚等溶剂抽提后,蒸发除去溶剂,干燥,得到游离态脂肪的含量。试剂和材料除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的三级水。试剂无水乙醚(C4H10O)。石油醚(CnH2n+2):石油醚沸程为30℃~60℃。材料石英砂。脱脂棉。仪器和
谢瓦格抽提法的方法原理介绍
中文名称谢瓦格抽提法英文名称Sevag method定 义一种从核酸中去除蛋白质杂质的方法。系用加有少量异戊醇或辛醇的氯仿溶液对核酸-蛋白质混合物反复振荡,使蛋白质变性沉淀而被除去。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
脂肪浸提——索氏脂肪浸提法实验
实验方法原理 用脂肪溶剂将脂肪从样品中浸提出来,然后将溶剂蒸发除去,称取瓶中残留物的重量或称量样品损失的重量,即可求出样品中粗脂肪的含量。在测定样品含油量时,通常采用沸点低于60℃的有机溶剂作为脂肪溶剂 (如乙醚和沸点为30℃至60℃的石油醚)所提取的脂溶性物质为脂类物质的混合物,其中含有脂肪、游离
脂肪浸提——索氏脂肪浸提法实验
实验方法原理用脂肪溶剂将脂肪从样品中浸提出来,然后将溶剂蒸发除去,称取瓶中残留物的重量或称量样品损失的重量,即可求出样品中粗脂肪的含量。在测定样品含油量时,通常采用沸点低于60℃的有机溶剂作为脂肪溶剂 (如乙醚和沸点为30℃至60℃的石油醚)所提取的脂溶性物质为脂类物质的混合物,其中含有脂肪、游离脂
蛋白质分离和分析——免-疫-印-迹-和-免-疫-检-测
实验步骤基 本 方 案 1 液体容器中的蛋白质印迹材 料待分析样品标准分子质量蛋白质,预 染 型(Sigma 或 Bio-Rad) 或 生 物 素 化 型(Vector labs 或Sigma)转移缓冲液无粉手套Scotch-Brite 垫 片(3M ) 或类似海绵Whatman 3M M 滤纸或类
IgG抗体的粗提法提取球蛋白的介绍
大多用硫酸铵盐析法或硫酸钠盐析法。硫酸铵盐析须经过多次沉淀,第一次用40%饱和度,第二次用35%饱和度,第三次用33%饱和度,经三次提取后的γ球蛋白基本是IgG成分。硫酸钠法更简便,用20%即可将γ球蛋白沉淀出来。经盐析后的γ球蛋白虽大多属于IgG,但还有5%其他区带蛋白,如γ区的杂蛋白。又因I
索氏抽提法检测脂肪重点注意事项
脂肪有两种存在形式,即游离脂肪和结合脂肪,测定食品中脂肪含量的方法有很多,但大多数采用低沸点溶剂直接萃取,或用酸碱溶液破坏碳水化合物和蛋白质,然后用溶剂萃取或离心离析。这就是常用的索氏抽提法、酸水解法、碱水解法等,不同的食品应采用不同的方法。其中常见的有使用脂肪抽提仪进行测定的,脂肪抽提仪是利用