多光子显微镜中的焦点深度扩展方法（一）
双光子激光扫描显微镜结合钙指示剂是活体神经元信号探测的金标准。神经网络中的神经元分布在三维空间中，监测它们的活动动态需要一种能够快速提高体积成像速率的方式。但是，使用光栅扫描多光子显微镜对大量图像进行成像，如果采用高数值孔径（NA）的物镜来获得较高的横向分辨率时，会导致较小的聚焦深度，为了获得小聚焦深度下的体积成像，必须通过一些手段进行Z轴扫描，通过扫描每个焦平面来成像许多平面，这大大限制了成像速度。如果可以牺牲轴向图像信息，通过扩展焦深在一次横向扫描中实现体积扫描，也就是体积信息被投影到单个2D图像中，就可以大大提高成像速度，这被称为扩展焦深（EDF）成像，对于要求高时间分辨率的稀疏群体结构成像（例如神经元活动的功能成像）特别有用。显微镜的轴向和横向分辨率均由物镜的数值孔径（NA）决定。高NA可使轴向和横向分辨率以及所收集的光量最大化；较低的NA将产生较低的轴向分辨率，即更长的焦深，但同时会牺牲横向分辨率和光收集效率。接下来要......阅读全文
多光子显微镜中的焦点深度扩展方法（一）
双光子激光扫描显微镜结合钙指示剂是活体神经元信号探测的金标准。神经网络中的神经元分布在三维空间中，监测它们的活动动态需要一种能够快速提高体积成像速率的方式。但是，使用光栅扫描多光子显微镜对大量图像进行成像，如果采用高数值孔径（NA）的物镜来获得较高的横向分辨率时，会导致较小的聚焦深度，为了获得小聚焦
多光子显微镜中的焦点深度扩展方法（二）
为了解决使用单个环扩展焦深光通量不够的问题， BINGYING CHEN等人利用超短脉冲相干长度短的特性，采用多环结构的分束掩模，超快激光脉冲经过时会被分束掩模分成不同的环形子束，每个子束都有时间延迟，也就是每个子束在不同的时间点在物镜的焦平面上形成贝塞尔焦点。如果每个环引入的时间延迟大大超过了激光
关于多焦点多光子显微技术的简介
多焦点多光子显微技术是 20 世纪末发展起来的, 它与单光束激光扫描显微镜 相比最大的变化是： （1） 需要一 个光束分离装置（如右图）产生多个焦点； （2） 需要一个探测器能够探测从所有焦点处发出的荧光信号 。 多焦点多光子显微技术采用旋转微透镜盘 、微透镜阵列 [6]、级联分束镜 [7
多焦点多光子显微技术进展的概述
生物医学发展对检测和成像系统的一个要求是在一次测量中能以很高的灵敏度和特异性得到多种功能信息, 另一个要求是能够无损、实时监测活体细胞的动态过程 , 这也成 为了荧光显 微技术不断发展和进步的源动力 。多焦点多光子显微技术在提高激发光能 利用率的同时 , 也提高了成像速度, 从而使实时双光子激发
关于多焦点多光子显微技术的简介
多交点多光子显微技术（multifocal multiphoton microscopy，MMM）提高了激发光能的利用率和成像速度，可以实现样品的三维快速多光子激发荧光显微成像，并且具有对活体样品损伤小，成像深度大，图像信噪比高等优点。 荧光显微技术已经成为生物医学领域的重要研究工具，激光扫描
关于正置多焦点多光子显微镜的简介
正置多焦点多光子显微镜是一种用于生物学领域的分析仪器，于2016年05月27日启用。 正置多焦点多光子显微镜的技术指标： 多种激光器灵活选择：405 nm、445 nm、488 nm、515 nm、561 nm、638 nm，输出功率可调；检测模块“标准”：ICX 285 感光元件（CCD）
LaVision双光子显微镜多焦点扫描与光激活蛋白在...（一）
LaVision双光子显微镜-多焦点扫描与光激活蛋白在核转运研究中的应用Multifocal two-photon laser scanning microscopy combined with photo-activatable GFP for in vivo monitoring of intr
扩展焦点功能
计测：可以计数，计测2点间的距离、面积等。每次计测都能自动进行统计处理。 扩展焦点功能：合成若干幅焦点位置不同的影像，构建全部都对焦正确的影像。也能清楚的观察有高矮差别的样本。 3D合成图像：通过粘贴由扩展焦点功能得到的全对焦图像，来创建实时3D图像。能任意地扩大、缩小、移动、旋转图
简述正置多焦点多光子显微镜的主要功能
正置多焦点多光子显微镜，无盖玻片样品制备和多视角成像为自由角度观察样品造就绝佳机会。角度成像数据的融合能够提高空间分辨率并使图像信息内容更加丰富。在一个时间序列内且完全相同的实验条件下，采集实验组和对比组的多角度数据集。或者在一个实验中观察多个样品并获得高通量数据。可以从最完美的视角或同时从多个
可见光双光子激发及多焦点激光扫描的结合（一）
对活体生物样品的三维观测是了解细胞功能的重要方法之一。目前已有的三维荧光成像技术包括光片显微成像技术、晶格光照明技术以及激光扫描显微成像技术(如共聚焦显微镜及双光子显微镜)等。其中激光扫描显微镜利用旋转盘可以进行多焦点的激光扫描,提高时间分辨率,而且有利于减少活细胞成像中的光损伤。本篇文献主要实现了
LaVision双光子显微镜多焦点扫描与光激活蛋白在...（二）
3. 结果Fig. 2.含有核输入输出信号的拟南芥转录因子LCL1 (分别为NLS, NES). 由质粒编码GFP融合蛋白转染的烟草BY-2原生质体。通过单光子共聚焦激光扫描显微镜分析的GFP融合蛋白稳定态定位。(a) GFP-LCL1 揭示的核与细胞质间的分区 (b) 使用核输出抑制剂leptom
LaVision双光子显微镜多焦点扫描与光激活蛋白在...（三）
Fig. 5. 烟草BY-2原生质体中At2g38360-DsRed的定位和平行双光子荧光显微镜对pa-GFP的3D监测（64 foci, 920 nm, 240 mW)。 (a) 双光子荧光下降的量化分析，给出了一个123s的扩散时间常数。Figs. 3 and 4中的数据源于两个不同
LaVision双光子显微镜多线扫描双光子成像（一）
Journal of Neuroscience Methods 151 (2006) 276–286Application of multiline two-photon microscopy to functional in vivo imagingRafael Kurtz a,∗, Matthi
多光子显微镜成像技术：多光子显微镜用于体内神经元...
多光子显微镜成像技术：多光子显微镜用于体内神经元成像的多种技术与传统的单光子宽视野荧光显微镜相比,多光子显微镜(MPM)具有光学切片和深层成像等功能,这两个优势极大地促进了研究者们对于完整活体大脑深处神经的了解与认识。2019年,Jerome Lecoq等人从大脑深处的神经元成像、大量神经元成像、高
多光子显微镜成像技术：双光子显微镜角膜成像
角膜提供了眼睛的大部分折射能力,由5层组成(图1),从外到内依次是上皮层,鲍曼层、基质、角膜后弹力层(间质膜)、内皮层。 wx_article_20200815180121_819doe.jpg 图1 角膜的组织学结构 上皮层负责阻挡异物落入角膜,厚约50μm,由三
多光子显微镜成像技术：双光子显微镜角膜成像
角膜提供了眼睛的大部分折射能力,由5层组成(图1),从外到内依次是上皮层,鲍曼层、基质、角膜后弹力层(间质膜)、内皮层。图1 角膜的组织学结构上皮层负责阻挡异物落入角膜,厚约50μm,由三种细胞构成,从外到内依次是表层细胞、翼细胞和基底细胞。只有基底细胞可进行有丝分裂和分化,基底细胞的补充是由从角膜
可见光双光子激发及多焦点激光扫描的结合（二）
在此基础上,实验对海拉细胞中的高尔基体(mTFP1)和纤颤蛋白(EGFP)进行了在体成像,见图3(j)-(n),青色为mTFP1,绿色为EGFP,实验中两种荧光蛋白同时成像,最终采用光谱分离法将不同蛋白的荧光信号分离出来。图4 海拉细胞在体延时三维观察高尔基体的成像结果后续还进行了海拉细胞的活体高尔
LaVision双光子显微镜多线扫描双光子成像（四）
2.3. 多线TPLSM中的获取模式 我们以两种获取模式操作多线TPLSM：第一种，整个研究使用所谓“帧扫描”模式，以64束激光在X、Y方向扫描样品。因此焦平面上激发了均一性照明，假定光束阵列的横向步长尺寸没有过于粗糙（通常使用≤400 nm的步长尺寸）。在Fig. 3A，展示了以“帧
LaVision双光子显微镜多线扫描双光子成像（三）
2.2.多线TPLSM中通过成像检测释放光 在单光束TPLSM中，光电倍增管PMT或者雪崩二极管APD可以很方便地用于释放光检测，由于双光子激发的原理，激发只发生在激光焦点处。因此，用于屏蔽离焦光线的共焦小孔变得不必要，并且可以使用NDD检测。这意味着激发光不会被送回扫描镜，而是直接进入位于靠
LaVision双光子显微镜多线扫描双光子成像（二）
2. 方法与结果 为了从激光扫描显微镜的功能性成像中得出重要结论，一个高的时间分辨率是很重要的。在低光情况下，这通常通过进行单线扫描来获取。这被以一个垂直系统（VS）神经元的突触前分支的激光共聚焦(Leica SP2)钙离子成像示例 (see Fig. 1, Table 1). 这类神
北京脑所吴江来实验室打造至简微型双光子显微镜，赋能自由活动小鼠高清高通量神经成像
RESEARCH PROGRESS 2025年11月29日，北京脑科学与类脑研究所吴江来实验室在Nature Communications上发表题为High-throughput two-photon volumetric brain imaging in freely moving mice
显微镜中的偏光显微镜
随着光学技术的不断进步，偏光显微镜的应用范围也越来越广阔，许多行业，如化工，半导体工业以及药品检验等等，都广泛地使用偏光显微镜。偏光显微镜产品优势：锥光观察更加清楚。1、优势的散热装置，LED照明可选。2、无限远光学系统，成像更加清晰。3、真正无应力物镜，中心可调，保证实验数据的精准性。4、微调格值
显微镜中的偏光显微镜
随着光学技术的不断进步，偏光显微镜的应用范围也越来越广阔，许多行业，如化工，半导体工业以及药品检验等等，都广泛地使用偏光显微镜。偏光显微镜产品优势：锥光观察更加清楚。1、优势的散热装置，LED照明可选。2、无限远光学系统，成像更加清晰。3、真正无应力物镜，中心可调，保证实验数据的精准性。4、微调格值
生物显微镜中物镜
物镜：在徕卡生物显微镜中物镜是决定显微镜像的质量、分辨力和放大倍数的zui关键部件。一般由几片不同球面半径的凸凹透镜按严格尺寸组台而成，放大倍数愈高、矫正程度愈高的物镜其构造愈复杂。在物镜简壁常注有主要性能指标——放大倍数、镜口率、机械筒长（镜简长）和所要求盖玻片的厚度。此外有的还标出矫正像差和色差
关于多光子激发成像技术特点的概述
Periasamy 和 Skoglund 等比较了相同光学配置下，双光子激光扫描显微镜和共聚焦扫描显微镜 [4]对非洲蟾蜍囊胚以及神经轴胚体细胞的成像能力。 研究结果表明，双光子激发成像穿透深度大、受细胞的固有荧光影响小。 因而 ，双光子提供了研究细胞内动力学、物质空间分布及结构的最佳方法。与荧
多光子显微镜成像技术：大视场多区域脑成像技术
为了了解神经回路的功能以及神经元之间的相互作用,需要对不同区域的大量神经元进行活体成像,我们这里介绍两种显微镜技术,分别针对大视场多区域成像和自由活动小鼠的活体成像。从图1可以看出用于视觉处理的神经元分布在直径约3毫米的区域——小鼠初级视觉皮层和多个较高级的视觉区域。当前的商用双光子显微镜系统通常提
多光子共聚焦扫描显微镜的原理以及应用
多光子共聚焦显微镜是光学显微镜的重大改进，主要表现为可以观察活细胞、固定细胞和组织的深层结构，并且可以得到清晰锐利的多层Z平面结构，即光学切片，并以此可以构建标本的三维实体结构。共聚焦显微镜采用激光光源，经过扩充后充满整个物镜后焦平面，然后经过物镜的透镜系统，在标本的焦平面上会聚成非常小的点。根据物
Thorlabs多光子显微镜基本套件及应用
MPM-2PKIT多光子基本套件是Thorlabs公司为想要自己搭建多光子成像系统的研究人员提供的解决方案，在量身定制的同时又不牺牲成像的性能。该套件包含一个模块化多光子成像系统所必须的核心部件，为特定应用而配置。此外，该系统无需传统显微镜，即可以对大样品，如整个活体生物等进行成像，并且该设计减小了
显微镜中的黑马奥林巴斯显微镜
奥林巴斯显微镜在中国市场一直占据着非常大的市场份额，这是因为在很大程度上奥林巴斯显微镜相对其他公司的显微镜更具有价格优势。而且且奥林巴斯自有的无限远光学系统在业界也是有一定的口碑除了价格优势之外，奥林巴斯还有许多技术或性能上的优势值得大家认可的。 1、奥林巴斯显微镜有出色的性价比，可以满足
双光子显微镜的双光子显微镜的优势
双光子荧光显微镜有很多优点：1）长波长的光比短波长的光受散射影响较小容易穿透标本；2）焦平面外的荧光分子不被激发使较多的激发光可以到达焦平面，使激发光可以穿透更深的标本；3）长波长的近红外光比短波长的光对细胞毒性小；4）使用双光子显微镜观察标本的时候，只有在焦平面上才有光漂白和光毒性。所以，双光子显