蛋白质紫外分光测定实验
由于蛋白分子中酪氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键,因此蛋白质具有吸收紫外线的性质,吸收高峰在280nm波长处。在此波长范围内,蛋白质溶液的光吸收值(A280)与其含量呈正比关系,可用作定量测定。 由于核酸在280波长处也有光吸收,对蛋白质的测定有干扰作用,但核酸的最大吸收峰在260nm处,如同时测定260nm的光吸收,通过计算可能消除其对蛋白质测定的影响,因此溶液中存在核酸时必须同时测定280nm及260nm之光密度,方可通过计算测得溶液中的蛋白质浓度。 利用紫外线吸收法测定蛋白质含量的优点是迅速、简便、不消耗样品,低浓度盐类不干扰测定。因此,在蛋白质和酶的生化制备中(特别是在柱色谱分离中)广泛应用。此法的缺点是(1)对于测定那些与标准蛋白质中酪氨酸和色氨酸含量差异较大的蛋白质,有一定的误差,(2)若样品中含有嘌呤、嘧啶等吸收紫外线的物质,会出现较大的干扰。 不同蛋白质和核酸的紫外吸收是不同的......阅读全文
蛋白质紫外分光测定实验
蛋白质紫外分光测定实验 实验方法原理 由于蛋白分子中酪氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键,因此蛋白质具有吸收紫外线的性质,吸收高峰在280nm波长处
蛋白质紫外分光测定实验
蛋白质紫外分光测定实验 实验方法原理 由于蛋白分子中酪氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键,因此蛋白质具有吸收紫外线的性质,吸收高峰在280nm波长处。在此波长范围内,蛋白质溶液的光吸收值(A280)与其含量呈正比关系,可用作定量测定。
蛋白质紫外分光测定实验
实验方法原理 由于蛋白分子中酪氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键,因此蛋白质具有吸收紫外线的性质,吸收高峰在280nm波长处。在此波长范围内,蛋白质溶液的光吸收值(A280)与其含量呈正比关系,可用作定量测定。由于核酸在280波长处也有光吸收,对蛋白质的测定有干扰作用,但核酸的最大吸收峰在260nm
蛋白质紫外分光测定实验
实验方法原理由于蛋白分子中酪氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键,因此蛋白质具有吸收紫外线的性质,吸收高峰在280nm波长处。在此波长范围内,蛋白质溶液的光吸收值(A280)与其含量呈正比关系,可用作定量测定。由于核酸在280波长处也有光吸收,对蛋白质的测定有干扰作用,但核酸的最大吸收峰在260nm处
蛋白质紫外分光测定实验
由于蛋白分子中酪氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键,因此蛋白质具有吸收紫外线的性质,吸收高峰在280nm波长处。在此波长范围内,蛋白质溶液的光吸收值(A280)与其含量呈正比关系,可用作定量测定。 由于核酸在280波长处也有光吸收,对蛋白质的测定有干扰作用,但核酸的最大吸收峰在
蛋白质紫外分光测定实验
实验方法原理 由于蛋白分子中酪氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键,因此蛋白质具有吸收紫外线的性质,吸收高峰在280nm波长处。在此波长范围内,蛋白质溶液的光吸收值(A280)与其含量呈正比关系,可用作定量测定。 由于核酸在280波长处也有光吸收,对蛋白质的测定有干扰作用,但
紫外分光光度法测定蛋白质含量实验设计
一、实验目的 1.学习紫外分光光度法测定蛋白质含量的原理。 2.掌握紫外分光光度法测定蛋白质含量的实验技术。 3.掌握TU-1901紫外-可见分光光度计的使用方法并了解此仪器的主要构造。 二、实验原理 1.紫外-可见分光光度法,是以溶液中物质的分子或离子对紫外和可见光谱区辐射能的
紫外分光光度法测定蛋白质
1 原理: pro及其降解产物的芳香环基 ,在紫外区内对某一波长具有一定的光选择吸收,在280nm下,光吸收与pro浓度(3~8mg/ml)成直线关系,因此,通过测定pro溶液的吸光度,并参照事先用K氏定氮法分析的标准样品,从标准曲线查出蛋白质的含量。 2 试剂: (1) 0.1mol/l
紫外分光光度法测定蛋白质含量
考马斯亮兰G250与蛋白质结合,在0-1000ug/ml范围内,于波长595nm处的吸光度与蛋白质含量成正比,可用于蛋白质含量的测定。考马斯亮兰G250与蛋白质结合迅速,结合产物在室温下10分钟内较为稳定,是一种较好的蛋白质定量测定方法。 1. 实验部分 1.1 仪器与试剂: Labte
紫外分光光度计——蛋白质含量测定
一、实验目的 1.学习紫外分光光度法测定蛋白质含量的原理。 2.掌握紫外分光光度法测定蛋白质含量的实验技术。 3.掌握TU-1901紫外可见分光光度计的使用方法并了解此仪器的主要构造。 二、实验原理 1.紫外-可见分光光度法,是以溶液中物质的分子或离子对紫外和可见光谱区辐射能的选择性吸收为
紫外分光光度法测定蛋白质含量
一、实验目的 1、 学习紫外分光光度法测定蛋白质含量的原理; 2、 掌握紫外分光光度法测定蛋白质含量的实验技术; 3、 掌握UV-1700PC紫外-可见分光光度计的使用方法并了解此仪器的主要构造。 二、实验原理 紫外-可见吸收光谱法又称紫外-可见分光光度法,它是研究分子吸收1
紫外分光光度法测定DNA蛋白质含量
一、实验目的 学习紫外分光光度法测定蛋白质含量的原理; 掌握紫外分光光度法测定蛋白质含量的实验技术; 掌握UV-1700紫外可见分光光度计的使用方法并了解此仪器的主要构造。 二、实验原理 紫外可见吸收光谱法又称紫外可见分光光度法,它是研究分子吸收190nm~750nm波长范
紫外分光光度法测定DNA蛋白质含量
一、实验目的 学习紫外分光光度法测定蛋白质含量的原理; 掌握紫外分光光度法测定蛋白质含量的实验技术; 掌握UV-1700紫外可见分光光度计的使用方法并了解此仪器的主要构造。 二、实验原理 紫外可见吸收光谱法又称紫外可见分光光度法,它是研究分子吸收190nm~750nm波长范围内的吸
用紫外分光度计测定溶液的浓度实验
用紫外分光度计测定溶液的浓度一、实验材料与仪器罗丹明B,蒸馏水,紫外分光度计,10ml比色皿(2个),250ml容量瓶,烧杯,移液管,比色管(若干)二、实验步骤① 用称量纸称取0.0025g的罗丹明B,放入烧杯中加入适量的蒸馏水溶解,并用玻璃棒搅拌均匀,然后转入250ml容量瓶中,贴上标签待用(此
蛋白质的测定方法之紫外分光光度法
1 原理:pro及其降解产物的芳香环基 ,在紫外区内对某一波长具有一定的光选择吸收,在280nm下,光吸收与pro浓度(3~8mg/ml)成直线关系,因此,通过测定pro溶液的吸光度,并参照事先用K氏定氮法分析的标准样品,从标准曲线查出蛋白质的含量。2 试剂:(1) 0.1mol/l柠檬酸水溶液
浅析紫外分光光度计测定蛋白质含量原理
紫外分光光度计测定蛋白质含量原理是为了学习紫外分光光度法测定蛋白质含量的原理。掌握紫外分光光度法测定蛋白质含量的实验技术。掌握TU-1901紫外可见分光光度计的使用方法并了解此仪器的主要构造。 紫外可见分光光度计实验原理是以溶液中物质的分子或离子对紫外和可见光谱区辐射能的选择性吸收为基础而建
核酸的定量测定实验——紫外分光光度法
实验方法原理核酸、核苷酸及衍生物都具有共轭双键系统, 能吸收紫外光, RNA、DNA 的紫外吸收高峰在260 nm 波长处。一般在260 nm 波长下, 每1 ml 含1 μg RNA 的溶液光吸收值为0.022 , 每1 ml 含1 μg DNA 的溶液光吸收值约为0.020 , 故测定未知浓度R
蛋白质含量测定法紫外可见分光光度法
本法系依据蛋白质分子中含有共轭双键的酪氨酸、色氨酸等芳香族氨基酸,其在280nm波长处具最大吸光度,在一定范围内其吸光度大小与蛋白质浓度呈正比。 本法操作简便快速,适用于纯化蛋白质的检测,一般供试品浓度为0.2~2mg/ml。本法准确度较差,干扰物质多。测定法(2)适用于供试品溶液中存在核酸时
DNA的Tm值测定实验_紫外分光光度法
当DNA 的稀盐溶液加热到80~100 ℃ 时, 双螺旋结构即发生解体, 两条链分开, 形成无规线团。一系列物化性质也发生改变: 260 nm区紫外吸收值增高(增色效应) , 粘度降低, 浮力密度降低等。本实验旨在准确理解DNA 的Tm 值的定义及测定Tm 值的意义,掌握DNA 的Tm 值的测定方法
紫外吸收法测定蛋白质含量
(一)原 理蛋白质分子中含有酪氨酸、色氨酸及苯丙氨酸等残基,它们的结构中具有共轭双键,对紫外光有吸收作用,其最大值在280nm波长处。在此波长附近,蛋白质溶液的光吸收值与其含量(范围是0.1~1.0mg/ml)成正比,因此,280nm的吸光度可用作蛋白质的定量测定。若将已知不同浓度的蛋白质标准溶液在
蛋白质紫外吸收与浓度测定方法
[原理]由于蛋白质中存在着含有共轭双键的酪氨酸和色氨酸,因此蛋白质溶液在280nm处具有紫外吸收高峰。在一定浓度范围内,蛋白质溶液在此波长处的吸光度与其浓度呈正比关系,因此利用这一性质可进行蛋白质定量测定。该法迅速、简便、不消耗样品、低浓度盐类不干扰测定,可测定0.1~1.0mg/mL的蛋白质溶液。
紫外分光光度法测定蛋白质含量的方法有何优缺点
紫外分光光度法测定蛋白质含量的方法有何优缺点?受哪些因素的影响和限制? 答: 优点是:方法简单、灵敏、快速、高选择性,且稳定性好,不消耗样品,低浓度的盐类不干扰测定。 缺点是:仪器昂贵,而且不同的蛋白质的紫外吸收是不相同的,测定结果存在着一定的误差,受光源、溶液的PH值、比色皿材质、缓冲介质溶
紫外分光光度法测定蛋白质含量的方法有何优缺点
紫外分光光度法测定蛋白质含量的方法有何优缺点?受哪些因素的影响和限制? 答: 优点是:方法简单、灵敏、快速、高选择性,且稳定性好,不消耗样品,低浓度的盐类不干扰测定。 缺点是:仪器昂贵,而且不同的蛋白质的紫外吸收是不相同的,测定结果存在着一定的误差,受光源、溶液的PH值、比色皿材质、缓冲介
紫外分光光度法测定蛋白质含量的方法有何优缺点
紫外分光光度法测定蛋白质含量的方法有何优缺点?受哪些因素的影响和限制?答:优点:方法操作简便、迅速、不需要复杂和昂贵的设备,不消耗样品,测定后仍能回收利用,低浓度的盐和大多数缓冲溶液不干扰测定。缺点:准确度和灵敏度差一点。干扰物质多;对于测定那些与标准蛋白质中铬氨酸和色氨酸含量差异较大的蛋白质,有一
紫外分光光度法测定蛋白质含量的方法有何优缺点
紫外分光光度法测定蛋白质含量的方法有何优缺点?受哪些因素的影响和限制? 答: 优点是:方法简单、灵敏、快速、高选择性,且稳定性好,不消耗样品,低浓度的盐类不干扰测定。 缺点是:仪器昂贵,而且不同的蛋白质的紫外吸收是不相同的,测定结果存在着一定的误差,受光源、溶液的PH值、比色皿材质、缓冲介
紫外分光光度法测定蛋白质含量的方法有何优缺点
紫外分光光度法测定蛋白质含量的方法有何优缺点?受哪些因素的影响和限制?答:优点:方法操作简便、迅速、不需要复杂和昂贵的设备,不消耗样品,测定后仍能回收利用,低浓度的盐和大多数缓冲溶液不干扰测定。缺点:准确度和灵敏度差一点。干扰物质多;对于测定那些与标准蛋白质中铬氨酸和色氨酸含量差异较大的蛋白质,有一
紫外分光光度法测定蛋白质含量的方法有何优缺点
紫外分光光度法测定蛋白质含量的方法有何优缺点?受哪些因素的影响和限制? 答: 优点是:方法简单、灵敏、快速、高选择性,且稳定性好,不消耗样品,低浓度的盐类不干扰测定。 缺点是:仪器昂贵,而且不同的蛋白质的紫外吸收是不相同的,测定结果存在着一定的误差,受光源、溶液的PH值、比色皿材质、缓冲介
紫外分光光度法测定蛋白质含量的方法有何优缺点
紫外分光光度法测定蛋白质含量的方法有何优缺点?受哪些因素的影响和限制? 答: 优点是:方法简单、灵敏、快速、高选择性,且稳定性好,不消耗样品,低浓度的盐类不干扰测定。 缺点是:仪器昂贵,而且不同的蛋白质的紫外吸收是不相同的,测定结果存在着一定的误差,受光源、溶液的PH值、比色皿材质、缓冲介
紫外分光光度法测定有机物实验方法
紫外分光光度法测定有机物实验方法紫外分光光度法测定未知物 1.仪器1.1紫外分光光度计(T6);配石英比色皿(25px):4个;1.2容量瓶(100mL、50mL):各10只;1.3吸量管(1mL、2mL、5mL、10mL):各1支;1.4移液管(20mL、25mL、50mL):各1支。 2.试
蛋白质的定量测定——紫外(UV)吸收测定法
实验原理蛋白质分子中所含酪氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键,使蛋白质在280nm波长处有最大吸收值。在一定浓度范围内,蛋白质溶液的光吸收值(A280)与其含量成正比关系,可用作定量测定。紫外线吸收法测定蛋白质含量的优点是迅速,简便,不消耗样品,低浓度盐类不干扰测定。因此,广泛应用在柱层析分离中蛋白