核酸浓度测定的五种方法

1、定磷法 核糖核酸(RNA)含磷量约为9.5%,脱氧核糖核酸(DNA)含磷量约为9.2%,采用定磷法可准确测出磷含量,进而折算出样品中核酸含量。 原理:在酸性条件下,定磷试剂中的钼酸铵以钼酸形式与样品中的磷酸反应生成磷钼酸,当还原剂存在时磷钼酸立即转变为蓝色的还原产物——钼蓝;钼蓝最大的刚吸收在650-660nm波长处,根据吸光值制作标准曲线,从而确定核酸的浓度。测定范围在1-10μg 优缺点:简单、快速;但易受蛋白与核苷酸的影响。 2、 定糖法 原理:核糖中的戊糖可在浓盐酸或者浓硫酸作用下脱水生成醛类化合物可与某些成色剂缩合成有色化合物,可用比色法或者分光光度法测定其溶液中的吸收值,在一定的浓度范围内,溶液的吸收值与核酸的含量成正比。 RNA浓度的测试:RNA与浓盐酸共热时发生降解,产生的核糖又可转变为糠醛,在FeCl3或CuCl2催化下,糠醛与3,5-二羟基甲苯(苔黑酚)反应形成绿色复合物,生成的绿色化合物......阅读全文

核酸浓度测定的五种方法

  1、定磷法  核糖核酸(RNA)含磷量约为9.5%,脱氧核糖核酸(DNA)含磷量约为9.2%,采用定磷法可准确测出磷含量,进而折算出样品中核酸含量。  原理:在酸性条件下,定磷试剂中的钼酸铵以钼酸形式与样品中的磷酸反应生成磷钼酸,当还原剂存在时磷钼酸立即转变为蓝色的还原产物——钼蓝;钼蓝最大的刚

DNA核酸浓度的测定实验

实验方法原理 构成核酸的嘌呤碱和嘧啶碱具有共轭双键,使核苷核和核酸在紫外线光具有特征性的吸收光谱,最大吸收峰为260nm。窄光带紫外分光光度计,长260nm.,比色杯光径1cm,1个吸光度值(1A)相当于50ug/ml双螺DNA,40ug/m1单螺旋DNA或RNA),20ug/ml寡核苷酸实验材料

DNA核酸浓度的测定实验

DNA核酸浓度的定量实验可以用于(1)对纯化的PCR产物进行浓度测定;(2)对纯化的酶切产物进行浓度测定;(3)对提取的质粒进行浓度测定。实验方法原理寡核苷酸,单链、双链DNA,以及RNA可以定量溶于缓冲液,构成核酸的嘌呤碱和嘧啶碱具有共轭双键,使核苷核和核酸在紫外线光具有特征性的吸收光谱,最大吸收

双氧水浓度测定哪种方法准确

这两种方法测定原理是一样的,只是称样量和高锰酸钾的浓度不同,第一种方法中的高锰酸钾的浓度没有照出来,但推算应该是0.1或0.2mol/L,称样量比第二种方法少,称样时的误差比第二种方法大;第二种方法高锰酸钾的浓度大,最后的滴定体积少(大约在6~7毫升),误差大(第一种如果高锰酸钾的浓度是0.1的话滴

常见测定蛋白浓度的三种方法介绍

酪安酸差色光谱法1.  打开分光光度剂,预热30分钟,是紫外灯处于稳定发光状态2.  在2容积为1mlde 微量石英比色杯中分别加入900ulPH7.4,PH12.0的0.1mol/l磷酸缓冲液,把盛有PH12.0缓冲液的比色杯放入样品杯中放入支架上,把盛有PH7.4缓冲液的比色杯放入到参比杯的支架

蛋白浓度测定常见的四种方法--ml

  No.1蛋白质定量分析   蛋白质的定量分析是生物化学和其他生命学科最常涉及的分析内容,是临床上诊断疾病及检查康复情况的重要指标,也是许多生物制品,药物、食品质量检测的重要指标。在生化实验中,对样品中的蛋白质进行准确可靠的定量分析,则是经常进行的一项非常重要的工作。   蛋白质种类很多,结构

紫外吸收法测定核酸浓度与纯度

实验概要学习测定DNA或RNA的浓度与纯度。实验原理核酸分子中的碱基集团含有共轭双键,它们对紫外光有强烈的吸收。核酸的最大吸收波长在260 nm,吸收低峰在230 nm。可以利用核酸的这一特性对其浓度进行测定。在波长260 nm下,A260=1时,双链DNA的含量为50 µg/ml,单链DN

蛋白质浓度测定常用的三种方法

测定蛋白质浓度的方法有很多,科研工作者广泛使用的方法比如紫外吸收法,双缩脲法,BCA方法,Lowry法,考马斯亮蓝法,凯氏定氮法等等 ,今天小编以UV法,BCA法,考马斯亮蓝法,其中的三种方法的测定蛋白质浓度的原理、优缺点、操作以及注意事项做详细介绍。UV法这种方法是在280nm波长,直接测试蛋白。

核酸纯度、浓度与分子量测定实验

            实验方法原理 溴化乙锭是一种荧光染料,在凝胶电泳中,EB分子可嵌入核酸双链的碱基对之间,在紫外线激发下发出荧光,其强度与DNA量成正比。同时核酸最大吸收波长在260 nm,在此波长下,吸光度1 A相当于一定浓度的核酸,可以通过A260/A

核酸纯度、浓度与分子量测定实验

实验方法原理 溴化乙锭是一种荧光染料,在凝胶电泳中,EB分子可嵌入核酸双链的碱基对之间,在紫外线激发下发出荧光,其强度与DNA量成正比。同时核酸最大吸收波长在260 nm,在此波长下,吸光度1 A相当于一定浓度的核酸,可以通过A260/A280 的比值,来测定所得核酸的纯度。实验材料 DNA试剂

Biochrom分光光度计测定核酸的浓度

        DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1μg/ml时,DNA钠盐的OD260=0.02。当OD260=1时,DNA浓度约为50μg/m

Biochrom分光光度计测定核酸的浓度

DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1μg/ml时,DNA钠盐的OD260=0.02。当OD260=1时,DNA浓度约为50μg/ml;RNA浓度约

核酸提取和核酸浓度、纯度的原理及方法

  【实验原理】  DNA是遗传信息的载体,是最重要的生物信息分子,是分子生物学研究的主要对象,因此DNA的提取也应是分子生物学实验技术中最重要、最基本的操作。如不能有效的完成DNA提取方面的工作,那就根本谈不上进行分子生物学方面的实验。在DNA提取过程中应做到:1、根据不同研究需要,保证结构的相应

核酸浓度检测指南(一)

 对于从事 DNA、RNA 或蛋白质相关研究的科学家而言, 经常需要对起始核酸/蛋白样品进行质量评估,未进行样品质控将可能导致数据差错,得出错误结论。如 qPCR 等分子生物学技术沿用较小体积样品,因此这些样品的质量至关重要,且有的应用(如: NGS 的文库制备)需要进行准确的浓度检测以进行后续的均

核酸鉴定方法之浓度

核酸纯化在分子生物学实验室已经广泛应用。怎样获得高质量、高纯度的DNA或RNA样品对下游实验的顺利进行至关重要,因此,对纯化后的核酸进行鉴定也是*的步骤。本文简单的回顾学习一下核酸鉴定的方法。核酸鉴定包括:浓度/纯度鉴定+完整性鉴定 1.浓度/纯度鉴定 (1)紫外分光光度计:原理:由于核酸中的碱基都

缓解肝癌疼痛的五种方法

核心提示: 肝癌是一种很危险的疾病,一旦确诊为肝癌,病人应立即住院接受治疗,同时肝癌有着诸多临床症状,例如肝部疼痛,内消化道出血等,而这其中疼痛是病人最难忍受,那么在治疗过程中有什么好办法可以缓解疼痛呢,下面就是缓解肝癌患者出现身体疼痛的五个妙招。原发性肝癌的并发症可由肝癌本身或并存的肝硬化所引起。

浅析萃取分离的五种方法

在运用液相色谱分析检测物品的试验中,经常会采用萃取法对样品进行预处理,主要是通过选择性吸附、洗脱的方式对样品进行富集、分离、净化处理,使样品更加纯净,从而降低样品中杂质对检测的干扰,大大提高检测的准确性。    根据待测样品化合物性质的不同,我们通常会采用不同的萃取原理来分离净化样品,从而实现样品回

核酸蛋白测定仪测定DNA浓度时显示无效是怎么回事

出现这种情况 你可以考虑以下因素:1、测试之前是否做了空白液试验,空白液是否和稀释或者溶解液相同.2、放置是否同光杯一致,看看光径有没有调节好.3、容易犯得错误,溶液是否完全溶解,液体中是否存在气泡,很多人粗心大意经常在这里吃亏.4、很多人喜欢用清水做空白试验,不知道你是不是,如果是的话是否保证了水

核酸蛋白测定仪测定DNA浓度时显示无效是怎么回事

出现这种情况 你可以考虑以下因素:1、测试之前是否做了空白液试验,空白液是否和稀释或者溶解液相同.2、放置是否同光杯一致,看看光径有没有调节好.3、容易犯得错误,溶液是否完全溶解,液体中是否存在气泡,很多人粗心大意经常在这里吃亏.4、很多人喜欢用清水做空白试验,不知道你是不是,如果是的话是否保证了水

核酸蛋白测定仪测定DNA浓度时显示无效是怎么回事

出现这种情况 你可以考虑以下因素:1、测试之前是否做了空白液试验,空白液是否和稀释或者溶解液相同。2、放置是否同光杯一致,看看光径有没有调节好。3、容易犯得错误,溶液是否完全溶解,液体中是否存在气泡,很多人粗心大意经常在这里吃亏。4、很多人喜欢用清水做空白试验,不知道你是不是,如果是的话是否保证了水

清洗色谱样品瓶的五种方法

 色谱样品瓶的清洗是非常重要的,如果清洗不干净,说不定会影响下次的测量,所以大家一定要掌握色谱样品瓶的清洗方法,下面来给大家介绍五种清洗方法吧。    随着各界对食品质量安全关注度的上升,色谱分析技术越来越多地运用到食品 质量安全检测中来,尤其在农产品检测领域,色谱分析技术已经被广泛运用。    在

活性验证标准品的五种方法

肝素生物测定法除了要验证标准品溶液具有抗凝作用外,还应达到不同剂量间抗凝时间有区别。2. 缩宫素效价测定原则:① 溶液应有子宫收缩作用,② 溶液的高、低剂量致子宫收缩作用应有明显差别。在试验时要注意,高、低剂量的比值不得超过1:0.7。3. 升压物质检查法可采取该方法规定的大鼠灵敏度测定方法。标准品

测定核酸的方法

琼脂糖凝胶电泳法琼脂糖凝胶具有较大的孔径,因而适用于对较大分子的电泳分离,目前琼脂糖电泳凝胶法已成为核糖核酸和脱氧核糖核酸检测、分离和性质研究的标准手段。核酸在琼脂糖凝胶中的电泳迁移率取决于琼脂糖浓度、核酸分子的大小以及核酸分子的形状三个因素。一般来说,较低浓度的琼脂糖凝胶适合于较大分子物质的电泳分

核酸纯度、浓度与分子量测定实验——Ethidium-bromide染色法

实验方法原理利用一系列不同浓度的DNA标准溶液(0、2.5、5、10、20、30、40、50 ng/ml),或已知浓度的DNA marker,和未知浓度DNA样品一起进行琼脂糖凝胶电泳,以EB染色后,在凝胶图象分析仪上观察,比较标准浓度及未知浓度的亮度,来求取DNA 的含量;比较DNA样品与DNA

cDNA浓度的测定

理论上讲,等质量是必要的。但是就反转录结果而言,里面的成分太多,测量浓度的误差比较大。我们实验室一般都是测量RNA的浓度,然后取等量RNA、过量oligodT做充分反转录,再取等量反转录体系做PCR。另外,我看你用条带定量?这样很不准确,因为你也不知道PCR多少循环后达到饱和。比方说,组间差8倍,差

cDNA浓度的测定

理论上讲,等质量是必要的。但是就反转录结果而言,里面的成分太多,测量浓度的误差比较大。我们实验室一般都是测量RNA的浓度,然后取等量RNA、过量oligodT做充分反转录,再取等量反转录体系做PCR。另外,我看你用条带定量?这样很不准确,因为你也不知道PCR多少循环后达到饱和。比方说,组间差8倍,差

盐酸浓度的测定

30%是质量百分比(g/g) 其实和氢氧化钠滴定的总酸度是一回事。因为它是用氢氧化钠滴定的。取本品约3ml,置贮有水约20ml并已精密称定重量的具塞锥形瓶中,精密称定,加水25ml与甲基红指示液2滴,用氢氧化钠滴定液(1mol/L)滴定。每1ml氢氧化钠滴定液(1mol/L)相当于36.46mg的H

常见化学需氧量测定的几种方法

 化学需氧量测定的标准方法以我国标准GB/T11914《水质化学需氧量的测定重铬酸盐法》和国际标准ISO6060《水质化学需氧量的测定》为代表,该方法氧化率高,再现性好,准确可靠,成为国际社会普遍公认的经典标准方法。  其测定原理为:在硫酸酸性介质中,以重铬酸钾为氧化剂,硫酸银为催化剂,硫酸汞为氯离

测定氧含量的3种方法

氧能溶于水,溶解度取决于温度、水表面的总压、分压和水中溶解的盐类.大气压力越高,水溶解氧的能力就越大,其关系由亨利(Henry)定律和道尔顿(Dalton)定律确定,亨利定律认为气体的溶解度与其分压成正比. 其中的电极由阴极(常用金和铂制成)和带电流的反电极(银)、无电流的参比电极(银)组成,电极浸

核酸的定量测定实验

紫外分光光度法 地衣酚显色法 二苯胺法             实验方法原理 核酸、核苷酸及衍生物都具有共轭双键系统, 能吸收紫外光, RNA、DNA 的紫外