RTqPCR需要注意的那些事
rt-qpcr需要注意的那些事，你都了解吗？在rt-qpcr实验中不论是实验小白还是老司机，都会遇到各种不同的实验问题。解决问题不仅要浪费额外的样品和试剂，还要占用大量的时间一遍遍的重复和分析，真是被实验折磨得焦头烂额。那实验过程中应该注意哪些细节呢？小翊精心为大家总结了rt-qpcr实验的注意事项，希望助小伙伴们一臂之力。rt-qpcr实验包括rna提取与质量评估，逆转录和qpcr三大步骤，每个步骤都有很多注意事项，才能做出可靠的数据。下面由小翊给您详细介绍。rna质量评估在rt-qpcr实验中，rna提取完成后，需要对rna的质量进行评估，合格后才可进行后续实验。评估方法有分光光度计，琼脂糖凝胶电泳，agilent 2100分析等，其中最常用的有分光光度计和琼脂糖凝胶电泳法检测。我们需要注意的是这两种方法需要搭配使用，才能完成对rna浓度、纯度和完整度的检测分析，以保证rna的质量。分光光度计检测法分光光度计主要用于测定rn......阅读全文
单细胞分析之全攻略步骤
分离单个细胞在您研究单个细胞之前，您需要将它可靠地分离。显微抽取、流式细胞术（FACS）、激光捕获显微切割（LCM）都可用来收集单个细胞。每种方法都各有利弊。FACS将细胞分选到PCR板上，与RT-qPCR仪器兼容。此外，FACS可利用特定的细胞标志物实现细胞富集。FACS的通量也比LCM高得多，但
AAV在中枢神经系统研究中的注射方法（一）
中枢神经系统是由许多不同类型的细胞构成的，包括神经元和神经胶质细胞。其中，根据不同的形态、大小和功能，神经元可以分为很多类型。而神经胶质细胞主要包括星形胶质细胞、少突胶质细胞和小胶质细胞。AAV在中枢神经系统（central nervous system，CNS）中的应用包括很多方面，比如在神经系统
骨肉瘤的新细胞起源以及STK11/LKB1对骨癌的发病影响－1
“少年杀手” 【背景】 成骨肿瘤（osteogenic tumor）是骨组织最常见的原发性肿瘤，包括良性骨形成肿瘤、骨瘤、成骨细胞瘤和恶性肿瘤（又称为成骨源性肉瘤或骨肉瘤）。骨肉瘤主要在儿童和青少年人群中高发，老年人位列第二发病率高峰。由于传统化疗生存效益不理想，因此预后较差，当前迫切需要更多针
单细胞分析之全攻略（上）
均值虽然有用，但无法准确反映单个细胞的表型，它们有时差异甚大。而这些表达上的差异也许包含了重要的信息，有助于我们了解癌症、确定治疗是否有效、鉴定免疫反应等。近两年，单细胞分析发展迅速，文章数以每年40%的速度增长。单细胞方法让微生物学家能够着手研究无法培养且数量有限的微生物，同时也让干细胞研究人员能
外泌体miRNA或将更适合结肠癌早期诊断
结肠直肠癌（CRC）是全球诊断率排名第三的消化道恶性肿瘤。2018年，约有881，000人死于CRC。据统计，超过70％的CRC位于结肠，也就是结肠癌（CC）。CC在北美、欧洲和澳大利亚等地区的发病率和死亡率非常高。近年来，亚洲国家CC的发病率也逐年递增，CC的诊断和治疗已成为全球关注的热点问题
整合RNA测序与ATAC测序：揭示耐盐水稻品种抗氧化防御机制，助力培育抗逆水稻新种
在广袤的农田里，水稻是人类重要的主食作物之一。然而，土壤盐渍化这一全球性难题，正严重威胁着水稻的生长与产量。据联合国粮食及农业组织相关数据显示，全球至少 10% 的土地受到盐渍化影响，这使得水稻在生长过程中面临诸多挑战。盐胁迫会导致水稻植株矮小、千粒重下降、小穗数量减少，最终造成产量大幅降低。在众多
直播预告|三位专家共同讲述下一代分子诊断
原文地址：http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2024/3/519334.shtm 直播时间：2024年3月19日（周二）20:00-22:00 直播平台： 科学网APP （科学网微博直播间链接） 科学网微博 科
免疫治疗新靶点TNFR2
在这个草长莺飞的春天，是否记得那句“要想富，多栽树”的宣传标语？今天的植树节，百奥赛图知识拓展课堂携智慧树如期而至，与您携手探寻TNFR2。 基本信息 基因功能简介 TNFRSF1B（TNF receptor superfamily member 1b） 为TNF受
美国CDC：rRTPCR检测2019新型冠状病毒操作说明
简介 目的：本文用于实时逆转录-聚合酶链反应（real-time RTPCR, rRT-PCR）试剂盒体外定性检测呼吸道和血清标本中2019新型冠状病毒（2019-nCoV）。针对2019新型冠状病毒设计引物和探针组合，用于SARS样冠状病毒的通用检测和2019新型冠状病毒的特异检测。 方案应用
新型冠状病毒的检测方法及产品开发进展
作者：中国科技大学 罗昭锋 【摘要】：新冠状病毒（2019-nCoV）检测目前只有荧光定量PCR方法和测序方法两种被认可的方法。测序不具备快速筛查潜力，这里不做讨论。目前国家药监局审批通过的都是荧光定量PCR的试剂盒。等温扩增的检测试剂盒，至少已有两个单位开发成功，有望近几天上市。等温扩增的试
MAGNA－96核酸提取操作流程
简介 目的：本文用于实时逆转录-聚合酶链反应（real-time RTPCR, rRT-PCR）试剂盒体外定性检测呼吸道和血清标本中2019新型冠状病毒（2019-nCoV）。针对2019新型冠状病毒设计引物和探针组合，用于SARS样冠状病毒的通用检测和2019新型冠状病毒的特异检测。 方案
B7H3和CCR4在免疫中的作用对比
B-hB7-H3小鼠 1、基本信息 2、B7-H3基因功能简介 图1 B7-H3介导的肿瘤免疫[1] CD276 (Cluster of Differentiation 276)是人类CD276基因编码的I型跨膜蛋白，属于免疫球蛋白超家族，也称为B7-
美国博士从事研究不端行为被抓，将面临3篇文章被撤稿
Viravuth Yin 博士是Mount Desert Island Biological Laboratory (MDIBL) 的副教授。科研诚信办公室 (ORI) 发现 Viravuth Yin 博士在美国公共卫生服务 (PHS) 等基金支持的研究中从事研究不端行为。 Viravuth
Nacia数字PCR在基因表达分析中的应用
华盛顿大学医学院儿科和加利福尼亚大学圣地亚哥分校医学院儿科的研究人员建立了一个稳定可靠的基于RNA磁珠提取和数字PCR的方法，可从粪便样本中检测与EE（热带肠病）关联的人mRNA，灵敏度可达20拷贝GAPDH mRNA/200mg粪便样本。已有报道表明病人粪便中存在人mRNA，可作为反应病人消化道病
多组学探讨自噬如何通过ATG8相关途径来影响玉米的细...2
让研究团队没有想到的是，这些代谢变化在富氮条件下的植株中表现得更为强烈，这表明自噬即使在正常生长条件下也会对玉米代谢产生重大影响。而PCA分析结果也呈现了同样的趋势，缺氮胁迫和自噬突变对于叶片的代谢有着不同的影响。这也说明了缺氮胁迫激活了自噬之外的其他分解代谢途径，以帮助应对这一营养挑战。那么自噬对
AAV在中枢神经系统研究中的注射方法
中枢神经系统是由许多不同类型的细胞构成的，包括神经元和神经胶质细胞。其中，根据不同的形态、大小和功能，神经元可以分为很多类型。而神经胶质细胞主要包括星形胶质细胞、少突胶质细胞和小胶质细胞。 AAV在中枢神经系统（central nervous system，CNS）中的应用包括很多方面，
DNA打印机升级迭代－PCR检测相关标准再更新
PCR检测——ISO标准发布近日，由上海海关主导制定的2项ISO标准正式获得国际标准化组织(ISO)通过并发布。这两项ISO标准是：《ISO/TS20224-10：2024分子生物标记分析——食品和饲料中动物源性成分实时荧光PCR检测——第10部分鸭DNA检测方法》和《ISO/TS20224-11：
科研人员揭示高温下植物种子前身胚珠命运的保护机制
北京大学生命科学学院秦跟基教授课题组在Nature子刊Nature Communications上在线发表了题为“Arabidopsis TCP4 transcription factor inhibits high temperature induced homeotic conversion
实时荧光定量－PCR
实时荧光定量 PCR ，简称 RT-QPCR, 属于 Q-PCR 的一种，目前该技术已得到广泛应用，如：扩增特异性分析、基因定量分析、基因分型、 SNP 分析等。荧光定量 PCR 常用的方法是 DNA 结合染料 SYBR GreenⅠ的非特异性方法。 SYBR Green I 是一种结
lncRNA促进胃癌进展的新机制研究思路分析
近日，南京医科大学第一附属医院的束永前团队将最新的研究成果，以题为“Upregulation of the long noncoding RNA FOXD2-AS1 promotes carcinogenesis by epigenetically silencing EphB3 through
“少年杀手”骨肉瘤的新细胞起源以及STK11/LKB1对骨癌－影响
成骨肿瘤（osteogenic tumor）是骨组织最常见的原发性肿瘤，包括良性骨形成肿瘤、骨瘤、成骨细胞瘤和恶性肿瘤（又称为成骨源性肉瘤或骨肉瘤）。骨肉瘤主要在儿童和青少年人群中高发，老年人位列第二发病率高峰。由于传统化疗生存效益不理想，因此预后较差，当前迫切需要更多针对性和个性化的治疗骨肉瘤
骨肉瘤的新细胞起源以及STK11/LKB1对骨癌的发病影响
中国科学院上海生物化学与细胞生物学研究所和中山大学肿瘤防治中心/肿瘤医学协同创新中心等机构的研究人员利用条件性敲除的成骨肿瘤小鼠模型，鉴定出骨膜源性Ctsk-Cre细胞是成骨肿瘤的起源细胞，并提出一个治疗成骨肿瘤的有希望的新靶点——LKB1-mTORC1途径。 【背景】 成骨肿瘤（osteo
”骨肉瘤的新细胞起源以及STK11/LKB1对骨癌的发病影响
成骨肿瘤（osteogenic tumor）是骨组织最常见的原发性肿瘤，包括良性骨形成肿瘤、骨瘤、成骨细胞瘤和恶性肿瘤（又称为成骨源性肉瘤或骨肉瘤）。骨肉瘤主要在儿童和青少年人群中高发，老年人位列第二发病率高峰。由于传统化疗生存效益不理想，因此预后较差，当前迫切需要更多针对性和个性化的治疗骨肉瘤
云序生物最新m6A“RNA甲基化”研究汇总—病毒篇
RNA甲基化领域是当前最耀眼的国际科研明星，也是国自然申请的大热点；究其原因，是因为最近一两年，RNA甲基化的功能与分子机制方面取得了巨大的进展。RNA甲基化已被证实在癌症发生发展，病毒感染，神经发育，干细胞分化等过程中发挥着关键作用。今天，我们承接上一期的癌症篇，为您带来病毒领域的RNA甲基化
lncRNA促进胃癌进展的新机制研究思路分析
Nature子刊|联合南京医科大发表重要研究成果：揭示lncRNA促进胃癌进展的新机制 近日，南京医科大学第一附属医院的束永前团队将最新的研究成果，以题为“Upregulation of the long noncoding RNA FOXD2-AS1 promotes carcinoge
circRNA_104075在促进肝癌发生和进展的机制研究
在全球范围内原发性肝癌是造成癌症相关死亡的三大原因之一。肝细胞癌(HCC)是最常见的原发性肝脏癌症。由于缺乏高特异性和敏感性的早期诊断生物标志物，HCC患者往往得不到及时有效的治疗。相比于长链非编码RNA和miRNA，circRNA作为一种新型环状RNA，具有共价闭合环状结构，在组织和血液中具有
m6A“RNA甲基化”研究汇总—病毒篇
RNA甲基化领域是当前最耀眼的国际科研明星，也是国自然申请的大热点；究其原因，是因为最近一两年，RNA甲基化的功能与分子机制方面取得了巨大的进展。RNA甲基化已被证实在癌症发生发展，病毒感染，神经发育，干细胞分化等过程中发挥着关键作用。今天，我们承接上一期的癌症篇，为您带来病毒领域的RNA甲基化研究
数字PCR缘何是PCR的未来？群雄逐鹿，几分天下？
新冠疫情之下，“测核酸”已成为全民热词，PCR作为测核酸的官宣仪器也火爆热卖，这里指的是荧光定量PCR（qPCR）。大家知道，有时的“漏检”是因为病毒的copy数太低；而若想减少甚至消除“漏检”，可用另一种更灵敏更精准的数字PCR（digital PCR，dPCR）技术。dPCR和qPCR到底有
多组学探讨自噬如何通过ATG8相关途径玉米细胞生理进程
玉米，作为一种深受广大人民群众喜爱的食物，出现在了全国大部地区的餐桌上，主食亦可、做菜亦可、零食亦可……简直就是居家旅行，必备食物。人们饿了吃玉米，玉米饿了吃什么呢？它真的会吃自己…… 这不是个玩笑，在缺氮条件下，玉米会利用自噬来完成细胞质的回收再利用……近期发表于植物学顶级期刊《Natu
中国学者首次详细发表冠状病毒等的检测方法
由病毒或细菌引起的呼吸道病毒感染是全球人类最常见的疾病之一，而由新兴病毒引起的疾病则是造成新型感染的疾病，例如最近导致中国武汉爆发肺炎的新型冠状病毒2019-nCoV，对全球公共卫生的产生巨大威胁。识别呼吸道病毒感染的致病性病原对于选择适当的治疗方法，挽救人们的生命，停止流行病以及避免不必要地使