PCR的退火温度怎么设定
PCR中退火的那步是引物与模板结合，一般来说，退火温度比Tm值要低上5度左右。另外，也可以根据你设计引物的软件比如primer5.0或Olige 6 推荐的温度。但这些都不是绝对的。你要是在他的推荐温度下没有目的条带，你可以试试做一个温度梯度，摸索一下退火温度。......阅读全文
引物退火温度
一般低4、5度就好了。如果你用软件设计的引物，比如oligo6什么的，它会在tm之外给你一个operate t，就是操作温度，用这个就好了。
引物的熔解温度与退火温度
primer的一个重要参数是熔解温度(Tm)。这是当50%的primer和互补序列表现为双链DNA分子时的温度.Tm对于设定PCR退火温度 是必需的。在理想状态下，退火温度足够低，以保证primer同目的序列有效退火， 同时还要足够高，以减少非特异性结合。合理的退火温度从55℃到70℃。退火温度一般
tm值与退火温度
我用primer 5设计出来的Tm值从来都是直接当退火温度用。用引物primer-blast的话我都是直接贴序列上去。有其他菌的匹配很正常，有些进化亲缘性很近的，只要在同一物种中没有匹配上的问题应该不大！
梯度PCR退火温度的设计
温度梯度PCR是指在退火温度不太明确时，为了找到最优退火温度，在一台PCR仪上同时做多管PCR，每一管放在仪器 内不同列(有的是不同行)上，分别进行PCR(如50℃~60℃可以分6管，分别为50，52，54，56，58，60度)，最后看看哪个温度的效果最好。总之是用来进行退火温度优化的。
PCR的退火温度怎么设定
PCR中退火的那步是引物与模板结合，一般来说，退火温度比Tm值要低上5度左右。另外，也可以根据你设计引物的软件比如primer5.0或Olige 6 推荐的温度。但这些都不是绝对的。你要是在他的推荐温度下没有目的条带，你可以试试做一个温度梯度，摸索一下退火温度。
pcr退火温度太高有什么缺点
说影响得看情况，退火温度太高肯定会影响引物的结合效率的。但是，实际上，好的引物一般是上下游引物的退火温度比较接近。有时候，我们可能会通过牺牲特异性的手段（当GC含量过高时，减少引物长度）来平衡两条引物的退火温度。高的退火温度是不利于复性的，所以不会因为使模板复性而降低扩增效率，倒是可能因为影响引物结
PCR的退火温度对反应的影响
引物退火温度是影响PCR的主要因素之一，一般来说每个引物都对应着各自的退火温度。影响：以文献作参考，在一定的温度范围内，退火温度越高，扩增的特异性也就越高。退火温度越低，扩增产物的特异性也就降低。如果退火温度过高，引物与模板结合差，电泳条带差，甚至没有扩增。如果温度过低，扩增特异性差，杂带较多，背景
pcr退火温度是根据什么原则设计？
在模板变性后温度快速冷却至40℃～60℃(某个退火温度 )的时候，可使引物和模板发生结合。由于模板DNA 比引物复杂得多，引物和模板之间的碰撞结合机会远远高于模板互补链之间的碰撞，这就使PCR后期的过程成为可能。退火温度与时间，取决于引物的长度、碱基组成及其浓度，还有靶基序列的长度。对于20个核苷酸
pcr退火温度一般为多少
唉，这种题就是中国特色，完全理论脱离实际。PCR退火温度是一个范围，一般是50度到65度，或者到70度做两步法PCR。其中，模板的GC含量、模板的组成（单一模板还是cDNA还是全基因组DNA还是别的什么）等等条件都会影响tm值。没有一个确定的说是多少比较好，都是具体情况具体分析。有的时候引物设计回来
PCR的退火温度对反应的影响
引物退火温度是影响PCR的主要因素之一，一般来说每个引物都对应着各自的退火温度。影响：以文献作参考，在一定的温度范围内，退火温度越高，扩增的特异性也就越高。退火温度越低，扩增产物的特异性也就降低。如果退火温度过高，引物与模板结合差，电泳条带差，甚至没有扩增。如果温度过低，扩增特异性差，杂带较多，背景
退火温度低会对PCR产生什么影响
通常来说，退火温度是由引物的GC%含量决定的，但是反应体系的条件改变也会影响引物的退火温度（如Mg,Na等离子浓度）。建议你去http://www.idtdna.com/analyzer/Applications/OligoAnalyzer/分析一下你的PCR体系中的引物退火温度，而不是仅仅由公式计
荧光定量pcrct值太高，怎么调退火温度
标准曲线按照标准曲线计算般都相量则用delta delta CT计算举例： 照组基ACT值20 内参（比βactin)CT值15实验组基A CT值18内参CT值14 首先算加量：delta CT=15-14=1212说
变性、退火温度对PCR热循环的影响
PCR退火温度应如何设置？ 在PCR自动热循环中，最关键的因素是变性与退火的温度。如操作范例所示，其变性、退火、延伸的条件是：94℃60s, 37℃60s, 72℃120s，共25～30个循环，扩增片段500bp。在这里，每一步的时间应从反应混合液达到所要求的温度后开始计算。在自动热循环仪
变性、退火温度对PCR热循环的影响
PCR退火温度应如何设置？在PCR自动热循环中，最关键的因素是变性与退火的温度。如操作范例所示，其变性、退火、延伸的条件是：94℃60s, 37℃60s, 72℃120s，共25～30个循环，扩增片段500bp。在这里，每一步的时间应从反应混合液达到所要求的温度后开始计算。在自动热循环仪内由混合液原
根据引物合成单如何设定PCR退火温度？
PCR退火温度应如何设置？ 问题：引物单上数据如下 上游TTACAAGATGGAGCCTCACC(GC含量50%) Tm(1M Na+)：68.2 Tm(50mM Na+)：46.6 下游CAAAGAATAACCCAGGACGA(GC含量45%) Tm(1M Na+)：
根据引物合成单如何设定PCR退火温度？
问题：引物单上数据如下上游TTACAAGATGGAGCCTCACC(GC含量50%)Tm(1M Na+)：68.2Tm(50mM Na+)：46.6下游CAAAGAATAACCCAGGACGA(GC含量45%)Tm(1M Na+)：66.2Tm(50mM Na+)：44.6顺便问下大家，Tm(1M
退火温度与引物的TM值有什么联系
退火温度与引物的TM值的关系主要和DNA聚合酶与其buffer有关。有些退火温度要比TM低5度、3度，有些还会高3度，有些是一模一样的。主要参考不同公司所生产的DNA聚合酶的说明书。
退火和真空快速退火炉
退火是一种金属热处理工艺，指的是将金属缓慢加热到一定温度，保持足够时间，然后以适宜速度冷却，有时是自然冷却，有时是控制速度冷却的热处理方法。 退火的目的： 1. 降低硬度，软化工件，改善切削加工性。2. 改善或消除钢铁在铸造、锻压、轧制和焊接过程中造成的各种组织缺陷以及残余应力，减少工件变形、开裂或
退火炉温度控制系统的发展现状
真空退火是随着精密机械制造、航天、国防等尖端工业而发展起来的新型热处理方法，特别是近些年来，对零件性能、精度要求的提高使真空退火炉越来越受到人们的重视。国际上从上世纪70年代开始就开始了退火炉计算机控制的研究，近年来由于计算机技术以及新的控制技术的迅速发展，退火炉的计算机控制得到了迅速的发展，退火炉
PCR反应退火温度的高低与什么因素有关
退火温度是影响PCR反应特异性的重要因素。引物与模板复性所需要的退火温度取决于引物的长度、碱基组成及其浓度。引物长度越短，引物中G+C的含量越低，所需的退火温度越低。虽然降低退火温度可能增加扩增产量，但引物与模板间的错配现象也会增多，导致非特异性扩增上升。相反，提高退火温度虽然可以提高反应的特异性，
为什么引物中GC含量越高，需要设定更高的退火温度？
GC碱基互补配对时形成三个氢键，非特异性配对后需要较高的温度才能打开氢键，从而促进特异性配对。
退火的目的
(1) 降低硬度，改善切削加工性.(2)降低残余应力，稳定尺寸，减少变形与裂纹倾向；(3)细化晶粒，调整组织，消除组织缺陷。(4)均匀材料组织和成分，改善材料性能或为以后热处理做组织准备。在生产中，退火工艺应用很广泛。根据工件要求退火的目的不同，退火的工艺规范有多种，常用的有完全退火、球化退火、和去
荧光定量pcr三步法退火温度比普通pcr要高吗
实时荧光定量pcr两步法与三步法的异同是什么?如何选择使用?比如引物退火是54...更加准确,半定量做不了绝对定量,一般来说荧光定量的退火温度更高一些,
重退火的定义
中文名称重退火英文名称reannealing定 义同一来源、具有互补碱基序列的单链核酸之间重新形成配对双链的过程。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），总论（二级学科）
什么是PCR退火？
退火：高温变性后，降低温度至55-60℃，实现模板单链与引物配对结合。
shrna引物退火原理
1. 载体取2-5ug，在25ul体系中，用2.5ul的酶切30min-1h，回收载体：载体:---2ul（2-5ug）酶---------2.5ulBuf--------2.5ul水---------18ul回收的时候希望浓度高点。2. Oligo退火形成双链若为2OD=5.4nmol的话，则每个
全纤维退火炉
全纤维退火炉是节能型周期工作的电阻炉。炉衬采用高温耐火纤维结构，节电50%-60%左右；发热元件挂件是高铝陶瓷螺钉组。 简介 全纤维退火炉是节能型周期工作的电阻炉。炉衬采用高温耐火纤维结构，节电50%-60%左右；发热元件挂件高铝陶瓷螺钉组经久耐用。 用途 应用于：高锰钢铸件、不锈钢、高
激光退火的定义
中文名称激光退火英文名称laser annealing定 义利用激光对材料进行退火处理的加工方法。应用学科机械工程（一级学科），光学仪器（二级学科），激光器件和激光设备-激光应用（三级学科）
箱式退火炉简介
在中宽和窄带钢轧钢厂中，往往用箱式炉进行小批量退火。退火件堆放在一个架子上，架子挂在退火箱盖里。箱盖盖在退火箱上。箱和盖用吊车吊到特种炉室里，炉室嵌在地坪内。退火箱不承受炉料重量。 退火时采用保护气体，它由远程煤气、燃料油或电加热。升温和保温终了后，将热箱放刭换热坑内，它将热量传给随后应进行退
真空退火炉简介
真空退火炉，主要适用于不锈钢拉深件如水暖器材、水胀件、销、医疗器械、不锈钢钉、不锈钢镙丝、压铆件、不锈钢轴承、表壳、表带、刀具、微型轴、自攻自钻、餐具等不锈钢制品在保护气氛控制下进行连续光亮退火、固溶、退磁及不锈钢淬火处理的多用炉 设备用途 主要适用于 不锈钢拉深件如水暖器材、水胀件、销、医