《Nature》11月最受关注的十篇论文
英国著名杂志《Nature》周刊是世界上最早的国际性科技期刊，自从1869年创刊以来，始终如一地报道和评论全球科技领域里最重要的突破。其办刊宗旨是“将科学发现的重要结果介绍给公众，让公众尽早知道全世界自然知识的每一分支中取得的所有进展”。近期《Nature》下载论文最多的十篇文章(2012年10月17日 ～ 2012年11月16日)： Ndi1的X-射线晶体结构被确定 Nature 491 (2012年11月15日) 电子传递链的“复合物-I”催化来自NADH的两个电子向“泛醌”的转移，启动细胞用来合成ATP的过程。有若干种“单成分II-型NADH脱氢酶”可以起“多亚单元呼吸复合物-I”的替代物的作用。本文作者确定了从酵母分离出的这些较简单的NADH脱氢酶(或称之为Ndi1s)的其中之一的X- 射线晶体结构。从无基质状态、与NADH结合状态、与“泛醌”结合状态和与NADH结合/与“泛醌”结合状态获得......阅读全文
RNA聚合酶的结构
为什么细菌的RNA聚合酶需要这么大和复杂的分子结构呢?而某些噬菌体特有的RNA聚合酶则要小得多，仅由一条多肽链组成。这证明RNA合成所需的机构可以远比宿主的酶小。这种情况说明，噬菌体内的转录仅需一条"最小"的机构。然而这种酶只能识别噬菌体本身所有的少数几个启动子；它们不能识别其他启动子。例如噬菌
磷酸化蛋白鉴定实验
实验材料 测序级膜蛋白酶试剂、试剂盒 二硫苏糖醇碘代乙酰胺乙酸溶液甲酸乙酰氯仪器、耗材 螯合琼脂糖凝胶层析介质实验步骤 这里所述的方法概括为下列几个步骤：胰蛋白酶水解消化膜和可溶性组分中的蛋白质（见 24. 3.1 )；固相金属螯合亲和层析（IMAC) 富集磷酸肽（见 24. 3. 2 )；用串
蛋白质磷酸化
Tyrosine Kinase Assay Using Synthetic Peptides (T. Miller)Small synthetic peptide substrates are especially well suited for applications such as assay
磷酸化蛋白鉴定实验
实验材料测序级膜蛋白酶 试剂、试剂盒二硫苏糖醇 碘代乙酰
磷酸化蛋白鉴定实验
实验材料测序级膜蛋白酶试剂、试剂盒二硫苏糖醇碘代乙酰胺乙酸溶液甲酸乙酰氯仪器、耗材螯合琼脂糖凝胶层析介质实验步骤这里所述的方法概括为下列几个步骤：胰蛋白酶水解消化膜和可溶性组分中的蛋白质（见 24. 3.1 )；固相金属螯合亲和层析（IMAC) 富集磷酸肽（见 24. 3. 2 )；用串联质谱对磷酸
磷酸化蛋白指的是什么
买能够区分磷酸化构型和未磷酸化构型的两种不同抗体没有听过磷酸化因子的概念。你说的两种都是蛋白质，都是细胞分子信号通路中的重要元素。JAK是一种磷酸激酶，可以将STAT磷酸化。没有听说过JAK自身被磷酸化。所以需要区分是否磷酸化的只有STAT。
磷酸化蛋白检测小妙招
蛋白质磷酸化是一种非常重要且广泛存在于原核生物和真核生物中的翻译后修饰调控方式,参与细胞的增殖、发育、分化、凋亡,细胞骨架调控、神经活动、肌肉收缩、新陈代谢及肿瘤发生等,对许多生物的细胞功能起着生物“开/关”作用。蛋白质磷酸化指由蛋白质激酶催化的把ATP的磷酸基转移到底物蛋白质氨基酸残基（丝氨酸、苏
使用Azurespot分析软件定量非磷酸化与磷酸化蛋白
背景去除背景扣除对于有效定量是必不可少的。 例如，AzureSpot有五个自动后台选项和三个手动选项。> 如果背景不均匀，请使用 Rolling Ball。 类似指定半径的圆盘在泳道轮廓下“滚动”，对信号求平均，从而产生平滑小的变化。 半径越大，滚动越平滑。> 如果轮廓的末端与轮廓的其余部分没有
使用Azurespot分析软件定量非磷酸化与磷酸化蛋白
在上期我们回顾了使用多重来成像磷酸化蛋白的技巧，在这部分中，我们将介绍使用Azurespot分析软件进行定量。 背景去除 背景扣除对于有效定量是必不可少的。 例如，AzureSpot有五个自动后台选项和三个手动选项。 > 如果背景不均匀，请使用 Rolling Bal
蛋白质结构在结构基因组学中的应用介绍
已经测定了酿酒酵母（Saccharomyces cereuisiae）、线虫（Caenorhabditis elegans）、果蝇（Drosophilamelanogaster）、拟南芥（Arabidopsis thaliana）等模式生物的基因组序列.。特别值得一提的是，随着人类基因310福建
渗透细胞蛋白磷酸化实验
基本方案 带分析 备择方案1 制备用于SDS-PAGE的天然细胞样品 备择方案2 制备用于等电聚焦的天然细胞样品 实验方法原理 检测出目标
磷酸化蛋白做WB小妙招
1、一定要在Lysis Buffer中加入蛋白酶抑制剂，还要加入一定量的磷酸酶抑制剂；2、加一抗后最好4度过夜，保证抗体有充分的结合时间，因为磷酸化的蛋白只占总蛋白量的极少部分；3、选择优质的磷酸化抗体，所以要选好的厂商，Novus为全球高端抗体品牌，其磷酸化抗体效果不错；4、抗体的稀释倍数要优化，
渗透细胞蛋白磷酸化实验
实验方法原理 检测出目标蛋白是磷蛋白后，可将这个蛋白质的磷酸化过程在无细胞系统或天然细胞系统中进行研究。大多数蛋白激酶除了在细胞内还可在胞外进行许多底物的磷酸化。天然细胞的渗透化处理为得到满意结果提供了一个有效的实验方法，通过使用一些不同的试剂可以使细胞处于短暂的渗透状态。这个过程使反应发生在细胞内
DNA结合蛋白的磷酸化研究
磷酸化化学计量的确定及磷蛋白形成动力学的测定l 磷酸化作用化学计量的确定1．在冰上建立下列反应混合液：Tris-HCl（50mmol/L；pH8.0）/MgCl2（10mmol/L） 250μlATP（10mmol/L）
tau蛋白抗体可以检测－磷酸化tau蛋白吗
但是我不能确定293T细胞是否能符合您研究目的细胞模型；如果要研究tau蛋白磷酸化与功能方面的联系需要用细胞模型。因为人为高表达的模型里得到的结果不一定就是正常条件下的结果。293T细胞是很好的基因转染表达模型，因为是人肾上皮细胞系。但是我不能确定293T细胞是否能符合您研究目的细胞模型；如果要研究
磷酸化蛋白组学需要多少蛋白
蛋白质磷酸化发挥作用的途径：（信号传导）2. 真核细胞蛋白质磷酸化位点一般位于（丝氨酸）、（苏氨酸）、（赖氨酸）3. 蛋白激酶在细胞信号转导途径主要作用：（调节细胞活性）、（放大传导信号）4. 目前常用的磷酸肽富集方式（TiO2）、（IMAC）5. 磷酸化蛋白组定性分析包括（单一磷酸化位点鉴定）、（
病毒蛋白与基因组RNA－构筑DNA蛋白复合结构多级可控构筑
生物大分子在自然进化中发展出一套独特的“自下而上”自组装方式进行各种复合结构的可控装配，为多功能生物纳米材料的加工制备提供了绝佳范例。其中，核酸-蛋白质纳米复合体系的可控构筑，不仅将实现生物学上两种基本组装模式的有效结合，以提供愈加复杂的生物结构模板，还有助于体内生物大分子相互作用的深入理解，对
磷酸化和非磷酸化蛋白分子量一样吗
理论上讲是不一样的，磷酸基图大概9.9KD左右，磷酸化后条带按道理应该发生迁移
蛋白质磷酸化的测定实验
代谢标记 X射线片放射自显影检测32P标记的蛋白质 实验材料 细胞
分析磷酸化蛋白的新方法
蛋白磷酸化是重要的翻译后修饰，在调控基因表达和细胞功能方面起着关键作用。检测磷酸化时一般使用磷酸化抗体。近几年，市场上也出现了一些新的技术和产品，可实现磷酸化的灵敏检测。 Phos-tag™便是其中的一种。它最初由日本广岛大学医药分子功能科学研究室开发，后由Wako公司商业化。P
关于麻疹病毒的形态与结构介绍
麻疹病毒为球形或丝形，直径约120nm～250nm，核心为单负链RNA，不分节段，基因组全长约16kb，基因组有N、P、M、F、H、L 6个基因，分别编码6个结构和功能蛋白：核蛋白（nucleoprotein，NP）、磷酸化蛋白（phosphoprotein，P）、M蛋白（membrane pr
高能磷酸化合物化学结构分类
从化学结构上含高能磷酸键的化合物分为：1、磷酸酐，如焦磷酸，核苷酸；2、羧酸和磷酸合成的混合酸酐，如乙酰磷酸，1，3-二磷酸甘油酸，氨基酰-AMP；3、烯醇磷酸，如磷酸烯醇式丙酮酸；4、磷氨酸衍生物（R-NH-PO3H2），如磷酸肌酸。
Science：利用宏基因组数据预测之前未知的蛋白结构
根据一项新的研究，从多种环境中收集的DNA序列数据有助研究人员构建出600多种蛋白家族的三维结构模型，而在此之前，它们的结构是未知的。这些宏基因组数据能够让人们在多种物种之间进行蛋白序列比较，从而允许利用统计学力量预测这些之前不可能预测的蛋白结构。相关研究结果发表在2017年1月20日那期Sci
蛋白质磷酸化位点怎么确定
鉴定了磷酸化肽后,还要进一步确定磷酸化肽中修饰了磷酸化位点的哪个残基.用于确定磷酸化肽中磷酸化位点的质谱方法基于两种不同原理,第一种方法取决于磷酸酯键的化学稳定性,如在ESI质谱仪的碰撞室或离子源中,或在MALDI-MS的PSD过程中.磷酸化肽可通过磷酸酯键断裂产生的碎片离子鉴定.第二种方法基于肽段
大鼠磷酸化AKT蛋白(AKT)ELISA检测法
大鼠磷酸化AKT蛋白(AKT)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 AKT 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的AKT与单抗结合，加入生物素化的抗大鼠AKT，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Str
酪氨酸磷酸化相关蛋白western－blot条带
1.首先裂解液中应该有去污剂之类的如SDS、NP-40等2.为了防止蛋白降解，还要加入蛋白酶抑制剂之类的PMSF以及胰蛋白酶抑制剂等3.为了防止磷酸化蛋白的去磷酸化，还要加入磷酸酶抑制剂之类的如氟化钠、钒酸钠之类等
Western－Blot蛋白质磷酸化操作小贴士
WB 是检测和定量磷酸化蛋白质的重要实验方法，然而大家一直都说磷酸化蛋白 WB 不好做！WB 磷酸化蛋白曝不出条带的时候，会特别沮丧。 Azure君在此给大家列出几点小建议，希望能帮助您改善一下实验结果。 1、样本是否表达： 查阅资料或通过预实验确定。 2、对照设置：
蛋白质磷酸化最重要的机制
蛋白质磷酸化是调节和控制蛋白质活力和功能的最基本、最普遍，也是最重要的机制。蛋白质磷酸化主要发生在两种氨基酸上，一种是丝氨酸(包括苏氨酸)，另一种是酪氨酸。这两类酸磷酸化的酶不一样，功能也不一样，但也有少数双功能的酶可以同时作用于这两类氨基酸，如MEK(促丝裂原活化蛋白激酶激酶mitogen-a
渗透细胞蛋白磷酸化实验——带分析
本实验讨论用三磷酸核苷在可渗透细胞和分离的细胞组分体外标记蛋白的策略。这类实验在大多数情况下还是以 [γ-32P] ATP 作为外源性磷酸供体。尽管在特殊情况下[γ-32P] GTP 也能被用于蛋白质标记。实验方法原理检测出目标蛋白是磷蛋白后，可将这个蛋白质的磷酸化过程在无细胞系统或天然细胞系统中进
蛋白磷酸化检测的注意事项
1、样本准备过程中防止蛋白质降解和保留翻译后修饰 样本准备过程中，细胞会释放蛋白酶和/或去磷酸化酶，为了减少这些酶的活性，处理样本的过程应在冰上进行，并预先冷却所有缓冲液，并且建议用含蛋白酶和磷酸酶抑制剂的裂解缓冲液。2、磷酸化特异性抗体的选择 选择磷酸化特异性抗体时，选择所要检测位