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影响PEG融合的因素

答:1. PEG的分子量与浓度: 细胞融合效果与PEG的分子量及其浓度成正比;但PEG的分子量越大、浓度越高, 对细胞的毒性也就越大。为了兼顾二者,在实验时常常采用的PEG分子量一般为1000~4000,浓度一般为40~60%。2. PEG的pH值: 经验证,PEG的pH值在8.0~8.2之间融合效果最好。3. PEG的处理时间: 处理时间越长,融合效果越好, 但对细胞的毒害也就越大。故一般将处理时间限制在1分钟之内。本实验中细胞融合后无需继续培养, 故处理时间可适当放宽至数分钟。4. 融合时的温度: 由于生物膜膜的流动性与温度成正比,故细胞的融合效果也与温度成正比。因此,为了获得更好的融合效果, 在细胞可能承受的温度范围内可适当提高处理的温度。对于哺乳动物的细, 一般采用的温度为38~40℃。......阅读全文

PEG功能化磷脂与脂质体稳定性的应用(一)

本期AVT小编分享一下PEG功能化磷脂与脂质体稳定性的那些事儿,聚乙二醇(PEG)衍生化磷脂的种类、分子量、用量等对脂质体的稳定性都会产生影响,可以改善脂质体稳定性,在延长脂质体体内循环时间及在新型脂质体中也发挥了不小的应用。感兴趣的小伙伴一起来了解下吧!脂质体具有靶向、长效、可降低药物毒性及增加药

氨基化PEG的结构式和不同的分子量介绍

mPEG-Amine (Linear Monofunctional PEG Amine NH2)甲氧基PEG氨基, 甲氧基聚乙二醇氨基,mPEG-Amine, mPEG-NH2, Methoxy-PEGMPEG1000-NH2mPEG-Amine, MW 1kmPEG20000-

讲解PEG化蛋白药物

蛋白质(含多肽)类药物主要包括酶、细胞因子等一些具有特殊功能的蛋白质。其疗效不仅取决于蛋白特定的化学结构,而且还取决于其特定的空间结构,因此可以通过基因工程或化学修饰等手段部分或全部解决此类药物的缺陷。蛋白质类药物的PEG化一直是药学领域研究的热点之一。经过30多年的研究探索,PEG修饰现已成功应用

使用复合模式SPE技术去除血浆样品中的聚乙二醇400(二)

数据管理 色谱系统: MassLynx®V4.1 SCN714和MS软件结果与讨论 PEG 400及其他四种测试化合物的色谱图如图1所示。图中宽峰是PEG400丰度较大的分子离子峰的综合TIC,包括以下分子量的PEG单峰:370、414、458、502、546、590和634。标准品(醋丁洛尔、美托

多肽PEG聚乙二醇修饰

PEG修饰,即聚乙二醇修饰,又称聚环氧乙烷修饰,是将PEG通过化学方法偶联到蛋白质或多肽分子上,从而提升多肽活性的一种方法。自Davies 1977年用PEG 修饰牛血清白蛋白以来, PEG修饰技术广泛应用于多种蛋白质和多肽的化学修饰。 PEG修饰具有延长半衰期、降低或消失免疫原性、减少毒

ESI Q-TOF质谱分析PEG化蛋白药物方法

PEG修饰蛋白及多肽类药物后,可在不产生毒性、不损害药效的情况下,通过增加蛋白类药物的溶解性、减少免疫原性、增加稳定性、延长体内药物半衰期等功效增强大分子药物的疗效。PEG的这种功效在1970年代后期被发现,到了1990年PEG化修饰的Adagen被美国FDA批准,至今已有若干个PEG修饰的大分子药

ESI Q-TOF质谱分析PEG化蛋白药物方法简介

  PEG修饰蛋白及多肽类药物后,可在不产生毒性、不损害药效的情况下,通过增加蛋白类药物的溶解性、减少免疫原性、增加稳定性、延长体内药物半衰期等功效增强大分子药物的疗效。PEG的这种功效在1970年代后期被发现,到了1990年PEG化修饰的Adagen被美国FDA批准,至今已有若干个PEG修饰的大分

ESI Q-TOF质谱分析PEG化蛋白药物方法简介

PEG修饰蛋白及多肽类药物后,可在不产生毒性、不损害药效的情况下,通过增加蛋白类药物的溶解性、减少免疫原性、增加稳定性、延长体内药物半衰期等功效增强大分子药物的疗效。PEG的这种功效在1970年代后期被发现,到了1990年PEG化修饰的Adagen被美国FDA批准,至今已有若干个PEG修饰的大分子药

Crystallization of Kinesin Family Motor Proteins

Motor proteins of several kinesin family groups have now been crystallized: monomeric Kinesin-1 motor domains from human, rat andNeurospora (Kull

PEG功能化磷脂与脂质体稳定性的应用(二)

2.4 PEG-磷脂脂质体的粒径研究表明,用不同的PEG-磷脂可制备不同粒径的脂质微粒(多室、小单室、大单室脂质体),稳定性较好:半年后PEG-磷脂脂质体在缓冲溶液中释出的亲水性标记物小于5%,在血浆中tin长达几天16。Litzinger等171制备了>300nm、150~200nm

修饰性PEG的用途介绍

聚乙烯亚胺在细胞培养中可增强黏附力较弱的细胞的黏附力。PEI是阳离子聚合物,细胞外表面的负电荷附着到覆盖有PEI的培养皿底面,为细胞和平板之间提供了更强的附着力。不过,聚乙烯亚胺有很强的细胞毒性。聚乙烯亚胺是历史上继多聚赖氨酸之后发现的第二种聚合物转染试剂。PEI能将DNA缩合成带正电荷的微粒,这些

常用多肽修饰方法及过程综述

多肽是一种由两个或多个氨基酸通过肽键(酰胺键)连接而形成的化合物。多肽在调节机体各系统、器官、组织和细胞的功能活动以及在生命活动中发挥重要作用,并且常被应用于功能分析、抗体研究、药物研发等领域。而通过对多肽进行修饰进而改变多肽的理化性质也是多肽研究中一种常用的手段。多肽修饰种类繁多,从修饰位点不同则

多肽修饰合成常用策略(二)

4、豆蔻酰化和棕榈酰化用脂肪酸酰化N末端可以让多肽或蛋白质与细胞膜结合。N末端上豆蔻酰化的序列可以使Src家族的蛋白激酶和逆转录酶Gaq蛋白靶向结合细胞膜。利用标准的偶联反应即可将豆蔻酸连接到树脂-多肽的N末端,生成的脂肽可在标准条件下解离并通过RP-HPLC纯化。5、糖基化糖肽类如万古霉素和替考拉

双水相萃取分离免疫球蛋白和单克隆抗体研究

抗体广泛用于疾病治疗、医疗诊断和免疫分离,具有广阔的市场需求和发展前景。抗体主要从动物血液、腹水和细胞培养液中分离得到,尤其是动物细胞培养制备单克隆抗体,已实现规模化生产。然而,目前抗体分离过程的成本仍旧较高,成为抗体产业发展的一个瓶颈,开发经济高效的抗体分离新方法,具有重要意义。双水相萃取具有生物

PEG修饰及其修饰GLP-1的意义

PEG修饰是一个使多肽或蛋白质在治疗或生物技术方面的效力得以提高的重要过程。当PEG以适当的方式连接在蛋白质或多肽上时,它能改变许多的特征,而主要的生物活性功能,如酶活性或特异结合位点,可以保留下来。PEG修饰通过如下几种途径改善药物的性能。首先,PEG连接在蛋白质或多肽的表面上,提高了它的分子大小

细胞融合技术

细胞融合(cell fusion)或细胞杂交(cell hybridization)是指真核细胞通过介导和培养,两个或多个细胞合并成一个双核或多核细胞的过程。人工的细胞融合开始于20世纪50年代, 60年代到70代作为一门新兴的技术, 发展非常快, 应用范围也极为广泛, 除了同种类细胞间可以

植物原生质体融合的原理及进展

  摘要  本文对植物的原生质体融合技术得研究进展进行了综述。阐述原生质体制备、培养方面的研究进展,随后介绍了原生质体融合方法、融合机理和融合方式等的研究进展,最后对其今后的应用前景进行了展望,为原生质体融合技术的发展提供了参考。  关键词  原生质体 融合技术 研究进展  01  —  原生质体制

植物原生质体融合技术的研究进展

  01  —  原生质体制备  1.材料的选择及预处理  许多研究表明,在原生质体分离之前,先对植物材料进行预处理能够有效提高原生质体的游离效率,在同等材料用量下可以分离出较多的原生质体。柳玉晶等[1]的研究表明,在分离百合叶片原生质体前对其进行13%甘露醇预处理和黑暗处理能显著提高原生质体产量。

连接桥改变PEG修饰葡激酶药用性质研究获进展

  聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)修饰技术已经被广泛应用于改善蛋白质药物的理化性质和药用功能。PEG修饰可有效提高蛋白质药物在体内的循环半衰期、增强其对蛋白水解酶的抗性、降低免疫原性。但是,由于PEG链对蛋白质表面的空间屏蔽作用,影响了蛋白质药物与其受体的相互作用,从

PEG 在医药行业主要有什么用途

1、对蛋白药物修饰的研究及应用进展蛋白药物的PEG修饰已卓有成效,国际知名的制药公司已经或正在积极推进蛋白药物的PEG修饰,1991年第一种用PEG修饰的蛋白药物PEG-ADA被FDA批准上市,近几年上市的有PEG-干扰素、PEG-GSF、PEG-生长抑素。目前处于临床前研究的PEG修饰的蛋白药物有

干旱胁迫对黄瓜幼苗叶绿素含量有何影响?

    叶片是植物重要组成部分,它是植物进行光合作用的主要器官,如果没有叶片,那么就会对植物的生长造成一定的影响,而叶片为什么会那么绿呢?是因为其中含有丰富的叶绿素,叶绿素是植物进行光合作用的主要色素,叶绿素含量的测定我们一般都使用叶绿素含量测定仪进行测定,本文通过叶绿

VISQUE用于标记和示踪T细胞的多功能树状纳米金颗粒的...

VISQUE用于标记和示踪T细胞的多功能树状纳米金颗粒的应用【VIS QUE应用案例】1.一种用于标记和示踪T细胞的多功能树状纳米金颗粒 编辑:Bio times tech-Leo 在肿瘤的治疗方法中,免疫治疗已发展成为继手术、放疗和化疗之后的第四大治疗手段,越来越多受到学者的关

未来几年生物制药产品研发走势分析

    分析:疗效独到是这些高分子量的复杂蛋白药物获得成功的关键。许多遗传性疾病,如血友病、溶酶体贮积病、肺囊性纤维化等都是难于治愈、危及生命的疾病,其病因都是基因突变等导致体内缺乏某种生理活动(代谢过程)所需要的酶。而这些酶都是分子量大、结构非常复杂的蛋白质。在基

使用复合模式SPE技术去除血浆样品中的聚乙二醇400(三)

将PEG 400从血浆中去除的主要目的就是为了清除可能引发的离子抑制效应。图5为由下面方程式得出的基质效应数据一览,据最新AAPS论文报道6。基质效应 =(含PEG的峰响应值/不含PEG的峰响应值) 图表A所示数据来源于经Oasis MCX萃取去除PEG的血浆样品。图表B所示数据来源于经萃取后又

肠内营养的置管途径及选择

    肠内营养(enteral nutrition,EN)是经胃肠道提供代谢需要的营养物质及其他各种营养素的营养支持方式,是临床上非常重要的营养治疗技术之一。安全有效地实施肠内营养的前提是要选择一条合理的营养管放置途径。肠内营养置管途径及技术种类繁多。从置入导管管

从大规模裂解物中制备λ噬菌体颗粒实验

从大规模培养物中制备的 λ 噬菌体,可在高盐存在下用聚乙二酵 ( PEG ) 沉淀的办法从裂解物中回收得到。残余的细胞碎片和 PEG 可用氯仿抽提。在进一步纯化之前,建议测定噬菌体制备物的得率。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理从大规模培养物中制备的 λ 噬菌体,可在高盐存

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现代生物分离技术在多肽蛋白质分离纯化中的应用

摘要:蛋白质是生物体的重要组成部分,在现代生物制药领域有着重要的作用,本文介绍了现代生物分离技术反胶束萃取、双水相萃取和电泳在多肽蛋白质分离中的应用和现状。关键词:蛋白质  反胶束萃取  双水相萃取  电泳一、前言随着基因工程和细胞工程的发

双水相萃取水蛭多肽的方案

双水相萃取 3.1 双水相萃取的原理及特点 3.1.1 双水相萃取的原理 双水相萃取与水-有机相萃取的原理相似,都是依据物质在两相间的选择性分配,但萃取体系的性质不同。当物质进入双水相体系后,由于表面性质、电荷作用和各种力(如憎水键、氢键和离子键等)的存在和环境因素的影响,使其在上、下相中的浓度

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