PCR纯化,跑胶没有出现条带,是什么原因

你要确定你PCR有没有扩增出条带,先用检测胶点了看一下。如果检测胶可以看到条带,回收胶看不到的话,可能是你PCR的产物的量太少了,回收胶胶孔宽,PCR结果不好的条带可能就看不到了。如果你确定你的PCR的产物是有的,明亮的,但是跑回收看不到,那么,跑胶用的TAE/TBE是不是1X的,你点胶的时候PCR产物里有没有加足够的loading你的胶里有没有加EB/泡EB(或其他染色剂)可能是你做的琼脂糖凝胶没有做好我之前也有回收载体,明明就很明亮,但是东西都在胶孔里面跑不出来T. T我觉得这种情况和loading的关系比较大......阅读全文

PCR新手指南:快速PCR技术与快速PCR仪的区别

在PCR仪上完成一个PCR反应所需要的时间决定于以下几个因素:1、模块升温和降温时间2、模块与PCR管内温度平衡时间3、延伸时间4、循环次数下面就以上几点做一点分析,以便大家了解快速PCR技术与快速PCR仪的区别。1、模块升温和降温度时间PCR仪一般会标明升温速度和降温速度,但标的大多是最大变温速度

PCR新手指南:快速PCR技术与快速PCR仪的区别

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知晓PCR,定量PCR与数字PCR的实验方法与选择

从1985年至今的30多年时间里,PCR分析经历了三代技术的发展。一代传统PCR技术,采用琼脂糖凝胶电泳的方法对PCR产物进行定性分析。第二代荧光定量PCR技术,通过在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号的积累实时监控PCR进程,最后用Cq值对基因进行定量分析。第三代数字PCR技术,通过将PC

普通PCR、实时荧光定量PCR和数字PCR对比分析(二)

模板 DNA 量越多,荧光达到域值的循环数越少,即 Ct 值越小。Log 起始模板浓度与 Ct 呈线性关系,通过已知起始拷贝数的标准品可作出标准曲线,根据样品 Ct 值,就可以计算出样品中所含的模板量。目前常用荧光标记方法 方法 优点

免疫PCR(ImmunoPCR)概念、组成和免疫PCR产物的检测

(一) 免疫PCR技术的概念免疫PCR是一种抗原检测系统,将一段已知序列的DNA片段标记到抗原抗体复合物上,再用PCR方法将这段DNA扩增,然后用常规方法检测PCR产物。免疫PCR集PCR的高灵敏度与抗体和抗原反应的特异性于一体。其突出的特点是指数级的扩增效率带来了极高的敏感度,能检出浓度低至2ng

PCR疑难解答终点PCR及相关PCR反应的分类

       1.PCR的概念        PCR,即聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR),主要由高温变性、低温退火和适温延伸三个步骤反复的热循环构成:即模板DNA先经高温变性为单链,在DNA聚合酶和适宜的温度下,两条引物分别与两条模板DNA链上的一段互

闲聊PCR

虽然长了些, 但耐心看完,应该对你的问题有所帮助 各位战友 我们来聊聊PCR :) PCR可以说是目前分子生物学实验中应用最为广泛的一种技术。从最初的在几个水浴锅里把试管放来放去,到现在各种先进的PCR仪, 到REAL TIME PCR。 设备是越来越先进,方法是越来越多,但基本的原理还是那套

Inverse-PCR

Genomic DNA Prep from 5 ml culture, resuspend in 50 µl TE Digestions Use either AciI, AluI, HaeIII, HpaII, RsaI or TaqI for Leu trans

原位PCR

About in situ PCR (Applied Biosystems) Basic information about in situ PCR and its applications. The In Situ PCR: Amplification and Detection in

实时-PCR

一旦 RNA 收集纯化完成,可以采用对不同的细胞质或核糖体 RNA 专一的商业化的实时 PCR 试剂盒,以组成型的 rRNA 为标准对所有资料进行标定。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。试剂、试剂盒cDNA 样品rRNA 引物和探针目的基因的引物和探针Tag Man Un

PCR佐剂

 Various authors recommend DMSO and glycerol to improve amplification efficiency (higher amount of product) and specificity (no unspecific products) o

标准PCR

What's PCR? (Michael Blaber's Lab)Illustrated introduction to usr/localious aspects of PCR technique. It's very valuable not only for thos

Long-PCR

Two long PCR steps:First round of the nested PCR step of the end point dilution procedure to quantitate the cDNA.First round of the nested PCR step of

PCR佐剂

Various authors recommend DMSO and glycerol to improve amplification efficiency (higher amount of product) and specificity (no unspecific products) of

PCR引物

PCR Primer Design and Reaction Optimization (Molecular Biology Techniques Manual)  PCR Primer Design (Newman Lab)  PCR Primer Design (Eppendorf)Detail

Basic-PCR

实验概要The  following basic protocol serves as a general guideline and a starting  point for any PCR amplification. Optimal reaction conditions (incubati

Colony-PCR

Colony PCR is useful in determining whether or not a specific colony on a plate has a sequence you desire. Primers for the specific sequence should be

Degenerate-PCR

Degenerate PCR is in most respects identical to ordinary PCR, but with one major difference. Instead of using specific PCR primers with a given sequen

PCR仪

简单的说,PCR就是利用DNA聚合酶对特定基因做体外或试管内In Vitro的大量合成,基本上它是利用DNA聚合酶进行专一性的连锁复制。目前常用的技术,可以将一段基因复制为原来的一百亿至一千亿倍。根据DNA扩增的目的和检测的标准,可以将PCR仪分为普通PCR仪,梯度PCR仪,原位PCR仪,实时荧光定

Quantitative-PCR

实验概要Quantitative PCR involves co-amplification of two templates: a constant amount of a preparation containing the desired target sequence and var

PCR-protocol

PCR reactionProtocol for 50µl reaction - adjust amounts if necessary, for a 20µl reaction use the same volumes of primer and dNTP-mix, but adjust the

定量PCR

定量PCR可以用于:(1)以外参或内参为标准,通过对PCR终产物的分析或PCR过程的监测,进行PCR起始模板量的定量;(2)用外标法(荧光杂交探针保证特异性)通过监测PCR过程(监测扩增效率)达到精确定量起始模板数的目的,同时以内对照有效排除假阴性结果(扩增效率为零)。实验方法原理定量PCR(即时聚

闲聊PCR

各位先生,各位女士,各位来宾,各位领导,各位海外侨胞,港澳同胞,欢迎参加两位新人的结婚晚会哦 啊 拿错了, 这是我明天参加婚礼的发言这个才是各位战友 我们来聊聊PCR :)PCR可以说是目前分子生物学实验中应用最为广泛的一种技术。从最初的在几个水浴锅里把试管放来放去,到现在各种先进的PCR仪, 到R

免疫PCR

免疫PCR (Immuno PCR, Im-PCR) 是利用抗原抗体反应的特异性和PCR扩增反应的极高灵敏性而建立的一种微量抗原检测技术。是用一段已知DNA分子标记抗体作为探针,用此探针与待测抗原反应,PCR扩增粘附在抗原抗体复合物上的这段DNA分子,电泳定性,根据特异性PCR产物的有无,来判断待测

PCR技术

实验方法原理 PCR是在模板DNA、引物和dNTPs的存在下依赖于DNA聚合酶的酶促反应。PCR技术的特异性取决于引物和模板结合的特异性。反应分为变性、退火、延伸三步,经过一定的循环,介于两个引物之间的特异DNA片段得到大量扩增。实验材料 转基因水稻叶片DNA引物试剂、试剂盒 矿物油MgCl2Pri

实时-PCR

            试剂、试剂盒 cDNA 样品 rRNA 引物和探针 目的基因的引物和探针 Tag Man Universal PCR Master Mix   超纯水

PCR-Additives

A variety of PCR additives and enhancing agents have been used to increase the yield, specificity and consistency of PCR reactions. Whilst these addit

Colony-PCR

Colony PCRDavid AmbergThis procedure will work for both yeast and E. coli:Take a small colony and suspend it in 5ul of H2O in a PCR tube. Heat for 5 m

Inverse-PCR

Genomic DNA Prepfrom 5 ml culture, resuspend in 50 µl TEDigestionsUse either AciI, AluI, HaeIII, HpaII, RsaI or TaqI for Leu transposon libraries37 de

标准PCR

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