竞争ELISA基本程序
① 抗体包被 → 4℃过夜，洗涤三次、抛干② 加入待检抗原及一定量的酶标抗原（对照孔仅加酶标抗原）→ 37℃ 60分钟，洗涤三次、抛干③ 加底物液 → 37℃ 20分钟，加终止液④ 用ELISA检测仪测定OD值。被结合的酶标抗原的量由酶催化底物反应产生有色产物的量来确定，如果待检溶液中抗原越多，被结合的标记抗原的量就越少，有色产物就减少，这样根据有色产物的变化就可求出未知抗原的量。此法的优点在于快速、特异性高、且可用于小分子抗原及半抗原的检测；其主要不足在于每种抗原都要进行酶标记，而且因为抗原的结构不同，还需应用不同的结合方法。此外，试验中应用酶标抗原的量较多。......阅读全文
阻断ELISA法的操作程序
本法主要用于检测型特异性抗体。该方法现已成为猪传染性胃肠炎（TGE）、猪伪狂犬病（PR）及猪胸膜肺炎（AP）的主要检测方法。下面以AP2型抗体的阻断ELISA检测法为例介绍其操作程序：① 100μl AP2型工作量抗原包被 → 4℃过夜，洗涤三次、抛干② 用200μl阻断缓冲液进行封闭 → 37℃
间接ELISA法的操作程序
本法主要用于检测抗体。以鸭病毒性肝炎（DVH）抗体的ELISA为例，间接ELISA的操作程序如下。⑴ 材料① 包被液、洗涤液、保温液、底物液、终止液；② DVH包被抗原、酶标抗抗体、阴性及阳性DVH参考血清；待检鸭血清；③ ELISA检测仪、加样器、聚苯乙烯微量板。⑵ 方法步骤① 加抗原包被 → 4
电泳的基本程序
该凝胶通常由琼脂糖制成,琼脂糖是一种多糖,在缓冲溶液中加热后会形成半固体,微孔凝胶。在一端,凝胶形成微小的凹痕,称为孔,研究人员将研究中的DNA样品与已知长度的参考样品(称为DNA阶梯)放置在一起。阶梯片段的长度已经通过另一种方法例如X射线晶体学来预定。当凝胶浸入导电溶液中并施加电压时,碎片开始迁移
ELISA常用检测法——竞争法原理介绍
做ELISA实验，有几种常见的实验方法，他们分别是竞争法、捕获法、间接法、夹心法、而夹心法又可以分为双抗体夹心法和双抗原夹心法！在今天的文章中，将详细得跟大家讲述竞争法的实验原理！竞争法一般分为直接竞争法和间接竞争法，这里我们以直接竞争法为例进行原理讲解。直接竞争法，其基本原理是：将合适浓度的包被抗
双夹心ELISA法的操作程序
此法与双抗体夹心ELISA的主要区别在于：它是采用酶标抗抗体检查多种大分子抗原，它不仅不必标记每一种抗体，还可提高试验的敏感性。此法的基本程序为：① 加抗体（Ab-1）包被 → 4℃过夜，洗涤三次、抛干② 加待检抗原（Ag） → 37℃ 60分钟，洗涤三次、抛干③ 加用非同种动物生产的特异性抗体（A
抗体捕捉ELISA法的操作程序
本法主要用于检测IgM抗体。由于IgM抗体出现于感染早期，所以检测出IgM，则可作为某种疾病的早期诊断。抗体捕捉ELISA根据所用标记方式不同可分为标记抗原、标记抗体、标记抗抗体捕捉ELISA等几种，其中以标记抗原捕捉ELISA比较有代表性，该方法的主要程序为：① 用抗u链（抗IgM重链）抗体包被→
双夹心ELISA法的操作程序
此法与双抗体夹心ELISA的主要区别在于：它是采用酶标抗抗体检查多种大分子抗原，它不仅不必标记每一种抗体，还可提高试验的敏感性。此法的基本程序为：① 加抗体（Ab-1）包被 → 4℃过夜，洗涤三次、抛干② 加待检抗原（Ag） → 37℃ 60分钟，洗涤三次、抛干③ 加用非同种动物生产的特异性抗体（A
抗体捕捉ELISA法的操作程序
本法主要用于检测IgM抗体。由于IgM抗体出现于感染早期，所以检测出IgM，则可作为某种疾病的早期诊断。抗体捕捉ELISA根据所用标记方式不同可分为标记抗原、标记抗体、标记抗抗体捕捉ELISA等几种，其中以标记抗原捕捉ELISA比较有代表性，该方法的主要程序为：① 用抗u链（抗IgM重链）抗体包被→
标记抗原捕捉ELISA法的主要程序
① 用抗u链（抗IgM重链）抗体包被→37℃ 60分钟后置4℃过夜，洗涤三次、抛干② 加待检血清 → 37℃ 2小时，洗涤三次、抛干③ 加酶标抗原 → 37℃ 60分钟，洗涤三次、抛干④ 加底物液 → 37℃ 20分钟，加终止液⑤ 用ELISA检测仪测定OD值。
涂片实验的基本程序
在干净的载玻片上滴上一滴蒸馏水，用接种环进行无菌操作，挑取培养物少许，置载玻片的水滴中，与水混合做成悬液并涂成直径约1厘米的薄层，为避免因菌数过多聚成集团，不利观察个体形态，可在载玻片之一侧再加一滴水，从已涂布的菌液中再取一环于此水滴中进行稀释，涂布成薄层，若材料为液体培养物或固体培养物中洗下制备的
基因检测的基本程序
基因检测是如何进行的呢？用专用采样棒从被测者的口腔黏膜上刮取脱落细胞，通过先进的仪器设备，科研人员就可以从这些脱落细胞中得到被测者的DNA样本，对这些样本进行DNA测序和SNP单核苷酸多态性检测，就会清楚的知道被测者的基因排序和其他人有哪些不同，经过与已经发现的诸多种类疾病的基因样本进行比对，就可以
鉴定细菌的基本程序
细菌鉴定的基本程序： ①细菌形态学检查； ②细菌生长特性； ③生物化学试验； ④抗原构造及血清学诊断； ⑤噬菌体及药物敏感试验； ⑥毒力测定及动物试验。
食品样品采样基本程序
采样基本程序采样基本程序可参考图。
ELISA测定的常用模式竞争法测抗原
大分子抗原因其具有两个以上的抗原决定簇，而可用双抗体夹心法测定，小分子半抗原如地高辛、茶碱等药物以及T3，T4及睾酮等激素因其只有一个抗原决定簇，从而无法使用双抗夹心方法测定，只能采用竞争抑制法测定。具体步骤如下：1．先用抗小分子的特异抗体如双抗体夹心法一样包被固相并封闭。2．同时加入待测样本和酶标
人ELISA试剂盒竞争法测抗原
人ELISA试剂盒然后再加标本和酶标抗体进行竞争结合反应。竞争法测抗体有多种模式，可将标本和酶标抗体与固相抗原竞争结合，抗HBc 一般采用此法。另一种模式为将标本与抗原一起加入到固相抗体中进行竞争结合，洗涤后再加入酶标抗体，与结合在固相上的抗原反应。抗HBe的检测一般采用此法。小分子抗原或半
如何提高竞争－ELISA－检测法的准确性？
可以提高竞争 ELISA 法准确性的方法：优化试剂：选择高质量、高纯度且亲和力一致的抗体和抗原，确保标记过程不影响其活性和结合能力。对标记的抗原或抗体进行严格的质量控制和鉴定。标准化实验操作：严格控制实验条件，包括温度、孵育时间、洗涤次数和强度等，确保每次实验的一致性。精确控制加样量，使用高精度的移
ELISA抗原竞争法检测样品中sIL...
实验概要本法是用纯化或重组的IL-2R(α链，P55，CD25，Tac抗原)蛋白包被96孔酶标反应板，同时加入已知量的抗IL-2RMcAb，再分别加入sIL-2R标准品与待测样品。则待测sIL-2R或者sIL-2R标准品与包被的纯化或重组的IL-2R蛋白竞争与抗IL-2R McAb结合。通过与标
ELISA测定的常用模式竞争法测抗体
抗体的测定一般不使用竞争法。当抗原中杂质难以去除或抗原的结合特异性不稳定时，可采用这种模式测定抗体。如乙型肝炎病毒核心抗体(HBcAb)和乙型肝炎病毒e抗体(HBe·Ab)的测定，由于e抗原较核心抗原仅多29个氨基酸，e抗原很容易转变为核心抗原，因此，HBcAb和HBeAb的测定均采用竞争法。但其测
ELISA试剂盒实验操作程序总结
实验开始前，各试剂均应平衡至室温（试剂不能直接在37℃溶解）；试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合elisa试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释
双抗体夹心ELISA法的操作程序
本法主要用于检测大分子抗原。现以检测鸡传染性法氏囊病病毒（IBDV）的双夹心抗体ELISA为例介绍本法的操作程序。① 加抗体包被 → 4℃过夜，洗涤三次、抛干② 加待检抗原 → 37℃ 30分钟，洗涤三次、抛干③ 加酶标抗体 → 37℃ 30分钟，洗涤三次、抛干④ 加底物液 → 37℃ 15分钟，加
基因治疗的基本程序
(一)治疗性基因的获得(二)基因载体的选择(三)靶细胞的选择(四)基因转移方法(五)转导细胞的选择鉴定(六)回输体内
环境监测的基本程序
根据监测目的，进行现场调查，收集相关信息和资料（水文、气候、地质、地貌、气象、地形、污染源排放情况、城市人口分布等）→根据监测技术路线，设计并制定监测方案（包括监测项目、监测网点、监测时间与频率、监测方法等）→实施方案（布点采样、样品预处理、样品分析测试等）→制定质量保证体系→数据处理→环境质量评价
固相杂交的基本程序
固相杂交的基本程序是：①准备待测样本；②制备和标记探针；③固相载体的处理；④预杂交、杂交、漂洗；⑤杂交信号检测；⑥结果判断及分析。
基因治疗的基本程序
(一)治疗性基因的获得(二)基因载体的选择(三)靶细胞的选择(四)基因转移方法(五)转导细胞的选择鉴定(六)回输体内
夹心ELISA与竞争ELISA技术在食品安全黄曲霉毒素的定量...
夹心ELISA与竞争ELISA技术在食品安全黄曲霉毒素的定量检测的应用黄曲霉毒素（Aflatoxin，AFT）是由某些霉菌（黄曲霉和寄生曲霉）产生的双呋喃环类毒素（有毒致癌物和诱变剂），这些霉菌在土壤中生长，使植被，干草和谷物腐烂。其衍生物有约20种，分别命名为B1、B2、G1、G2、M1、M2、G
大观霉素间接竞争性ELISA的建立及应用
大观霉素（spectinomycin，SPE）是一种氨基糖苷类广谱抗生素，是Mason于1961年首次从链霉菌中分离得到[1]。从结构上讲，氨基糖苷类抗生素分子中均含有氨基糖苷结构。而SPE（图1）是一种氨基环醇类抗生素，没有氨基糖苷结构，但在许多文献资料中SPE都被归为氨基糖苷类药物。在临床中，S
双抗体夹心法和竞争－ELISA－检测法的比较
双抗体夹心法和竞争 ELISA 法有以下几个方面的比较：原理双抗体夹心法：利用两种针对抗原不同表位的特异性抗体，一种包被在固相载体上捕获抗原，另一种用酶标记用于检测被捕获的抗原，形成“固相抗体 - 抗原 - 酶标抗体”复合物。竞争 ELISA 法：分为直接竞争法和间接竞争法。直接竞争法是将酶标记的抗
药物质量检测的基本程序
药物质量检测工作是按照一定的程序逐步完成的,任何一个环节出现问题或偏差,都会对检品的检测结果造成严重的影响。所以,药物质量检测工作者者应认真执行检测标准操作规程,保证检测结果的准确性。药物质量检测工作的基本程序如下。1.送检样品的取样送检样品的取样应遵循均匀、合理的原则,随机、客观地从大量的样品中取
药物质量检测的基本程序
药物质量检测工作是按照一定的程序逐步完成的,任何一个环节出现问题或偏差,都会对检品的检测结果造成严重的影响。所以,药物质量检测工作者者应认真执行检测标准操作规程,保证检测结果的准确性。药物质量检测工作的基本程序如下。1.送检样品的取样送检样品的取样应遵循均匀、合理的原则,随机、客观地从大量的样品中取
药物质量检测的基本程序
药物质量检测工作的基本程序如下。1.送检样品的取样送检样品的取样应遵循均匀、合理的原则,随机、客观地从大量的样品中取出少量样品,并应保证所取的样品具有科学性、真实性和代表性。药品应按生产批号进行检测,即每批药品生产完毕后,生产车间应填写成品请验单。每批原敷料进厂后也应由仓库填写原辅料请验单,并通知质