病毒DNA的提取实验——培养细胞中病毒DNA的提取
实验材料细胞试剂、试剂盒裂解液TE 缓冲液仪器、耗材培养瓶EP管真空泵实验步骤1. 贴壁培养细胞倾去培养液，加 PBS 洗 2次,加胰蛋白酶消化 (37℃, 5~10 min)后移入Ep管中，2000 r/min 离心 10 min, 弃上清液，用 PBS 悬浮细胞，离心洗涤 2~3次，用 PBS 重新悬浮细胞， 3500 r/min, 弃上清液。2. 悬浮细胞的培养 移入 Ep 管中，以 2000 r/min 离心 10 min, 弃上清液，用 PBS 悬浮细胞，余下的操作同贴壁培养细胞。3. 加人 1/2 体积 2M NaCl 和 1/2 体积 20% PEG 6000( 聚乙二醇 6000), 充分混匀溶解，置于 4℃ 8~12 h 或过夜， 3500 r/min 离心 20 min, 弃上清液。4. 加 1/10 原培养液体积的裂解液，混匀， 37℃作用 2~3 h 。5. 用等体积的平衡酚抽提 1次，再用氯仿／异戊醇 ......阅读全文
病毒 DNA 的提取实验
实验方法原理 实验材料 全血试剂、试剂盒 裂解缓冲液 A裂解缓冲液 B蛋白酶 K仪器、耗材 离心机水浴锅实验步骤 1. 在 750µl 全血中加入等量裂解缓冲液 A,混匀， 12000 r/min 离心 30 s, 弃上清液。2. 用 1.5mL 裂解缓冲液 A 悬起沉淀，再重复离心 1次，弃上清液
病毒 DNA 的提取实验——培养细胞中病毒 DNA 的提取
实验材料细胞试剂、试剂盒裂解液TE 缓冲液仪器、耗材培养瓶EP管真空泵实验步骤1. 贴壁培养细胞倾去培养液，加 PBS 洗 2次,加胰蛋白酶消化 (37℃, 5~10 min)后移入Ep管中，2000 r/min 离心 10 min, 弃上清液，用 PBS 悬浮细胞，离心洗涤 2~3次，用 PBS
病毒 DNA 的提取实验——全血细胞中病毒 DNA 的提取
实验材料全血试剂、试剂盒裂解缓冲液 A裂解缓冲液 B蛋白酶 K仪器、耗材离心机水浴锅实验步骤1. 在 750µl 全血中加入等量裂解缓冲液 A,混匀， 12000 r/min 离心 30 s, 弃上清液。2. 用 1.5mL 裂解缓冲液 A 悬起沉淀，再重复离心 1次，弃上清液。3. 用 117µL
病毒 DNA 的提取实验——拭子标本中病毒 DNA 的提取
实验材料拭子标本试剂、试剂盒TE 缓冲液裂解液蛋白酶K仪器、耗材离心机棉签实验步骤预操作：将采有口腔、鼻腔或生殖道等处分泌物标本的棉签置于 2 ml 生理盐水中，洗下标本。若标本在 4 h 内处理，可置于室温保存，否则需 4℃保存。1. 将生理盐水中的标本以 2 000 r/min 离心 5 min
痘苗病毒DNA提取实验
基本方案 实验方法原理 实验材料 纯化的痘苗病毒
痘苗病毒DNA提取实验
如果提取的痘苗病毒DNA用于转染，则应在蛋白酶 K 消化和苯酚抽提后分离。具体方法见本实验。实验材料纯化的痘苗病毒试剂、试剂盒Tris•Cl 溶液SDS蔗糖溶液蛋白酶 K用 50 mmol／L Tris • Cl 溶液平衡的苯酚1：1苯酚氯仿1 mol／L 乙酸钠乙醇仪器、耗材分光光度计Sorval
痘苗病毒DNA提取实验
实验方法原理 实验材料 纯化的痘苗病毒试剂、试剂盒 Tris•Cl 溶液SDS蔗糖溶液 蛋白酶 K用 50 mmol／L Tris • Cl 溶液平衡的苯酚1：1苯酚氯仿1 mol／L 乙酸钠乙醇仪器、耗材 分光光度计Sorvall 离心机实验步骤 1. 在 260 nm 处确定纯化的疸苗病毒的光密
病毒 DNA 的提取实验——新鲜或冷冻组织中病毒 DNA 的提取
实验材料新鲜或冷冻组织试剂、试剂盒匀浆缓冲液裂解液仪器、耗材剪刀匀浆器离心机实验步骤1. 取新鲜或刚解冻的组织去除血水和结缔组织，在冰浴上剪成小碎块。2. 将组织碎块移入预冷的匀浆器中，按 10 ml/g 加入匀浆缓冲液，混匀，制成匀浆液。3. 将匀浆液移人 Ep 管， 5000 r/min 离心1
DNA的提取实验
掌握核酸提取与纯化的方法，离心技术的合理使用．酚为有效的蛋白质变性剂，并且饱和的酚与水相有效的分开．因此，在含核酸的样品加入酚，可将样品中的蛋白质变性后形成沉淀层，本实验来源于牡丹江医学院 本科 5 年制检验专业实验指导实验方法原理酚为有效的蛋白质变性剂，并且饱和的酚与水相有效的分开．因此，在含核酸
DNA的提取实验
实验方法原理 酚为有效的蛋白质变性剂，并且饱和的酚与水相有效的分开．因此，在含核酸的样品加入酚，可将样品中的蛋白质变性后形成沉淀层，位于水相与有机相的界画，从而达到纯化核酸的目的．但酚不能完全抑制RNA酶的活性，而且酚层中含有10－15%的水