抽提萃取的特点
提取亲水性强的皂甙则多选用正丁醇、异戊醇和水作两相萃取。不过,一般有机溶剂亲水性越大,与水作两相萃取的效果就越不好,因为能使较多的亲水性杂质伴随而出,对有效成分进一步精制影响很大。......阅读全文
奶粉脂肪抽提仪操作步
脂肪是奶粉中重要的营养物质,也是直接反映奶粉质量的重要指标。近几年来,乳制品安全问题频频曝光,使得消费者对乳制品安全忧心忡忡。所以,高效快速地检测奶粉我品质,控制奶粉质量是解决问题的关键。 目前,奶粉脂肪含量测定方法大多为化学检测技术,这类方法虽然精度高,但耗时费力,操作过程相对复
蛋白质的抽提实验
实验方法原理 蛋白质在细菌中表现后,以反复的冷冻-解冻方法打破细胞,再用硫酸铵把蛋白质沉淀下来,此步骤可以去除大部份核酸、多醣、脂质等杂物。 实验材料 转
索氏抽提的具体介绍
从固体物质中萃取化合物的一种方法是,用溶剂将固体长期浸润而将所需要的物质浸出来,即长期浸出法。此法花费时间长.溶剂用量大、效率不高。在实验室多采用脂肪提取器(索氏提取器)来提取、脂肪提取器(如图所示)就是利用溶剂回流及虹吸原理,使固体物质连续不断地被纯溶剂萃取,既节约溶利萃取效率又高。萃取前先将固体
RNA抽提-成功经验法则
本期专文要来跟大家讨论的话题是核糖核酸(RNA)的萃取,看到这里各位心中可能已经起了疑问: RNA 萃取不是很简单吗?只要照着标准步骤操作,加一加试剂就完成了,有必要大费周章特地开篇幅来谈这件事吗?其实越简单的东西遇到困难时就越难解,各位看倌就请耐着性子,听我们娓娓道来。Lab 的经验和客户
质粒DNA的抽提与纯化
目的 : 采用碱变性法,学习小规模制备质粒DNA的技术原理 : 碱变性抽提质粒DNA是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而达到分离目的。在pH值高达12.6的碱性条件下,染色体DNA的氢键断裂,双螺旋结构解开而变性。质粒DNA的大部分氢键也断裂,但超螺旋共价闭合环状的两条互补链不会完
沥青抽提仪的使用方法
一)准备工作 1、按T07722-93沥青混合料含量试验(离心分离法),在拌和厂从运料卡车取沥青混合料试样,施在金属盘中适当拌和,待温度降100℃以下时,用大烧杯取混合料试样质量1000g左右(M)(粗粒式沥青混合料用高限,细粒式用低限,中粒式用中限)准确至0.1g。 2、如从路上用钻机
核酸的抽提mRNA提取分离技巧
与rRNA 和tRNA 不同的是,哺乳动物细胞的绝大部分mRNA 在其3'端均有一poly(A)尾,因此可以用oligo(dT)-纤维素亲和层析法从大量的细胞RNA 中分离mRNA dmonds等,1971;At Leder,1972)。在构建cDNA文库时, 必须经上述纯化步骤制备mRNA
脂肪抽提仪的完整测定方法
脂肪存在于很多物质,最常见的还是在我们的日常接触的食品中,比如:牛奶、肉类等,人体中的脂肪含量很大一部分是和我们每天摄入的食品密切相关的,作为一种营养物质,和蛋白质一样,存留在人体中含量过多过少都不行。饮食我们 可以控制,但食品中的脂肪含量是需要检测才能得出的,为了人类健康发展,如今,很多食
抽提质粒的基本原理
现在的质粒抽提一般是利用碱裂解法,是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异达到分离目的。高pH使质粒DNA和染色体DNA变性,同时沉淀蛋白质。再将pH值调至中性,质粒DNA较小,很容易复性成双链。而染色体DNA较大,不会复性,缠结成网状不溶物质,从而可以通过离心除去。
质粒抽提的原理及操作步骤
质粒抽提方法即去除 RNA,将质粒与细菌基因组 DNA分开,去除蛋白质及其它杂质,以得到相对纯净的质粒。今天我们主要来了解一下质粒抽提原理和操作步骤。 ⒈质粒抽提原理 其中用到三种溶液以及硅酸纤维膜(超滤柱)。 溶液Ⅰ:50 mM葡萄糖 / 25 mMTris-HCl/ 10 mMEDTA,pH 8
基本方案2-RNA-抽提和标记
试剂、试剂盒TRIzol 试剂PBS氣仿乙醇乙酸钠引物Superscript Ⅱ RNase H反转录酶10 X low-T dNTP 混合物EDTATE 缓冲液仪器、耗材RNeasy Maxi 试剂盒组织匀浆机圆底离心管圆锥底离心管水平离心机薄壁 PCR 管热循环仪荧光扫描仪实验步骤展
SZF06系列脂肪抽提仪介绍
脂肪抽提仪根据索氏抽提原理、用重量测定方法来测定脂肪含量。即在有机溶剂下溶解脂肪,用抽提法使脂肪从溶剂中分离出来,然后烘干、称量,计算出脂肪含量。脂肪抽提仪是脂肪测定的专用仪器。 粗脂肪测定仪主要由加热抽提、溶剂回收和冷却三大部分组成。操作时可以根据试剂沸点和环境温度不同而调节加热温度,试样在
哺乳动物组织样品RNA的抽提
哺乳动物组织样品RNA的抽提最基本的要素是防止RNA在抽提过程中降解,以及尽可能得到最高的RNA抽提效率。以下介绍我们实验室认为最符合以上两个要素的抽提方法。一、实验材料:Trizol试剂(Invitrogen公司)研钵,匀浆器,镊子,铝箔都高温灭菌即可;二、具体过程:1、样品在离体后应迅速冷冻在液
脂肪抽提仪的工作原理以及应用
目前国内的很多领域的技术已经都在不断的进步,像对动植物脂肪的测定已经开始使用脂肪抽提仪而不再是比较落后的人工服务了。目前国内对脂肪的测定主要还是只使用索氏抽提法来对脂肪进行提取的,所有的装置设备都是比较简单的玻璃仪器,操作起来还是相当麻烦的,我们现在已经在想办法进行改进。仪器脂肪抽提
细胞内cccDNA的抽提与纯化
最常用的抽提细胞内cccDNA的方法是蛋白质-去污剂沉淀法,其原理是基于rcDNA和cccDNA与蛋白质结合能力的差异。rcDNA能与蛋白质共价结合,与绝大多数细胞染色体DNA一起形成沉淀,而cccDNA不能与蛋白质结合故游离于上清中,用酚氯仿抽提上清即可得到cccDNA。根据笔者的经验,该方法的主
乙醇固定样品DNA-抽提和直接PCR
实验概要本实验从乙醇浸泡的鱼苗中提取DNA,并利用直接PCR进行了鉴定。实验原理在实际的研究工作中,野外取样的地点一旦较为偏远,受条件的限制,很难保证得到的样品活体或能够快速冷冻;另外,对一些稀有物种和濒危种,鲜活样品的采集十分困难,一般为了解决这些问题,常采用乙醇和甲醛固定的方法来处理样品,再对样
植物总DNA的快速少量抽提实验
实验方法原理 CTAB法:该方法简便、快速,DNA产量高(纯度稍次,适用于一般分子生物学操作)。 CTAB是一种非离子去污剂,植物材料在CTAB的处理下,结合65 °C水浴使细胞裂解、蛋白质变性、DNA被释放出来。CTAB与核酸形成复合物,此复合物在高盐(>0.7 mM)浓度下可溶,并稳
植物总DNA的快速少量抽提实验
CTAB法 实验方法原理 CTAB法:该方法简便、快速,DNA产量高(纯度稍次,适用于一般分子生物学操作)。 CTAB是一种非离子去污剂,植物材料在CTAB的
微量RNA的抽提RNeasy-MinElute-Spin-Column
·为了更好地裂解,细胞数不能大于5×105,细胞过多会减低产率和纯度。 准备工作: 1.在 24 ml 96-100%乙醇 中加入 6 ml 去RNA酶的水。 2.在每 1 ml Buffer RLT 中加入10 ml β-ME (加入β-ME的Buffer RLT可在室温下放置1
脂肪抽提对水解蛋白的影响
由于鱼类的蛋白质含量都是比较高的他们所含有的氨基酸和人类所需要的氨基酸成分是比较接近的,因为这类氨基酸的吸收率是比较高的,因此我们会经常说多吃鱼类是补充蛋白质最好的途径。鱼类除了蛋白质含量高以外,还有就是脂肪酸的含量也是比较高的,这些我们需要通过脂肪抽提仪来完成测定,这样对我们进行鱼类营
沥青混合料离心抽提仪试验规程
沥青混合料离心抽提仪试验规程:▲将环型滤纸置于100—110°C烘箱内烘干、称重、记录。▲打开收集器盖,再打开料碗盖。▲称量1000—1500g沥青混合料放入料碗中,用三氯乙稀浸泡1h。▲将环型滤纸放在料碗口边缘上,盖好料碗盖并紧好紧固锣丝。然后盖好收集器盖,在排出口处放好回收瓶。▲打开离心机电源,
蛋白质的抽提原理和方法
抽提是指利用某种溶剂使目的蛋白质和其他杂质尽可能分开的一种分离方法。其原理是不同蛋白质在某种溶剂中的溶解度不同,所以可以通过选择溶剂,使得目的蛋白质溶解度大,而其他杂蛋白质溶解度小,然后经过离心,可以去除大多数杂蛋白质。方法:溶剂的选择是抽提的关键,由于大多数蛋白质可溶于水、稀盐、稀碱或稀酸,所以可
蛋白质的抽提原理和方法
抽提是指利用某种溶剂使目的蛋白质和其他杂质尽可能分开的一种分离方法。其原理是不同蛋白质在某种溶剂中的溶解度不同,所以可以通过选择溶剂,使得目的蛋白质溶解度大,而其他杂蛋白质溶解度小,然后经过离心,可以去除大多数杂蛋白质。方法:溶剂的选择是抽提的关键,由于大多数蛋白质可溶于水、稀盐、稀碱或稀酸,所以可
植物总DNA抽提方法和优缺点
1、植物DNA的CTAB提取法:经典方法。效果较好,污染少。多用于核基因组提取。2、SDS提取法:较为简易,提取的为全基因组,但有蛋白污染可能。3、简易“一管法”提取方法:4、PCR研究的快速提取法:以上两者方法简单,快速,但污染多,不适合做酶切等操作。5、酚类、多糖类物质较多的植物DNA提取法:多
质粒抽提实验中溶液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ各有什么作用
溶液Ⅱ主要成分为氢氧化钠(NaOH)和SDS。DNA在pH5~9的溶液中是稳定的,但当pH>12或pH<3时,就会引起DNA双链之间氢键的解离而变性。溶液Ⅱ中NaOH浓度为0.2mob/L,加入溶液Ⅱ后,该系统的pH为12.0~12.6,因而促使染色体DNA与质粒的变性解离成单链。SDS是一种阴离子
极限土壤气相抽提XSVE技术介绍
土壤气相抽提(Soil Vapor Extraction, SVE)是1990年代初期所发展的一项成熟的土壤原位修复技术。SVE的基本原理是通过专门的地下抽提(井)系统,利用抽真空迫使非饱和区土壤中的气体发生流动,从而将其中的挥发性有机污染物脱除,达到污染土壤修复的目的。有时在抽提的同时,可
质粒抽提实验中溶液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ各有什么作用
溶液Ⅱ主要成分为氢氧化钠(NaOH)和SDS。DNA在pH5~9的溶液中是稳定的,但当pH>12或pH<3时,就会引起DNA双链之间氢键的解离而变性。溶液Ⅱ中NaOH浓度为0.2mob/L,加入溶液Ⅱ后,该系统的pH为12.0~12.6,因而促使染色体DNA与质粒的变性解离成单链。SDS是一种阴离子
脂肪抽提仪对紫苏籽的提取效果
紫苏子是唇形科草本植物紫苏的干燥成熟果实,具有化痰平喘、润肺宽肠之功效,紫苏子中的脂肪油主要含有亚油酸和α—亚麻酸,紫苏子脂肪油不仅是轻化工业的高级油料,而且又是优良的保健食油和保健食品添加剂,具有很高的利用价值和广泛的开发前景,因此应用脂肪抽提仪对其相关含油量的研究具有重要的作用。
Western-Blot-蛋白抽提试剂盒的选择
蛋白抽提试剂盒的出现弥补了细胞裂解液的应用局限性,特别是针对难提取的样本或者亚细胞器蛋白的提取,例如:针对植物、动物组织/细胞、细菌、酵母等不同样品及细胞核、细胞膜、线粒体、叶绿体、溶酶体等不同亚细胞器的专业提取试剂盒。这类特化试剂盒能够针对目的蛋白的不同来源和不同组织定位进行裂解和提取, 简化实验
电子舌分析酵母抽提物的味觉指标
实验目的:通过电子舌分析酵母抽提物的味觉风味分析 样品信息:酵母由某大学提供 检测仪器:日本INSENT公司的味觉分析系统 型号:TS-5000Z 结果分析: 味觉分析系统可以将复杂的味觉指标简单化以数值的形式展示酵母抽提物的味觉指标,并通过味觉指标的数据来比较和分析不同产地酵