辣根过氧化物酶实验的HRP的制备的简介
⒈水提取: 称取 10斤用水冲刷干净的鲜辣根(辣根皮中亦含有丰富的HRP),用菜刀切成小碎块,在搅肉机中搅碎1~2次。碎渣浆用1倍体积的水在低温下搅拌提取过夜(亦可采用高速抽提法)。次日用甩干机(或离心机)甩干,收集滤液,碎渣再用1/4倍体积水浸泡提取一次,合并两次滤液,量总体积和度,0。 ⒉硫酸铵分级分离: 在不断搅拌下,每升滤液中慢慢加入226克硫酸铵粉末(相当于0.40饱和度),大约在1~2小时内加完,置冷室中放置过夜。次日将上清液小心地用虹吸管移出,下面浑浊液以3000转/分离心15分钟,弃沉淀,合并上清液。再按每升上清液加258克硫酸铵粉末(0.8饱和度)随加随搅拌,当硫酸铵全部溶解后,置冷室过夜。次日,虹吸出上清液,沉淀部分在冰冻离心机中以13000转/分离心20分钟,弃去上清液,收集沉淀。将沉淀悬浮于100~150毫升蒸馏水中(加水量要使沉淀全部溶解为止),分装于透析袋内,放在流动自来水中进行透析1~2天......阅读全文
poly(A)+-RNA的制备实验
实验材料 RNA试剂、试剂盒 NaOH寡聚脱氧胸苷纤维素poly(A)样品缓冲液LiClEDTATE乙酸钠仪器、耗材 离心机分光光度计摇床实验步骤 1. 先用10 ml 5 mol/l NaOH清洗硅化的层析柱,然后用水冲洗。2. 取0.5 g oligo(dT)纤维素干粉加1 ml 0.1 m
反义RNA的制备实验
实验材料 限制性内切核酸酶酶水解模板 DNA大肠杆菌 DNA 多聚酶胰 DNaseⅠ试剂、试剂盒 氯仿苯酚乙醇DTTrNTP溶液转录缓冲液Tris-Cl盐酸亚精胺NaCl胎盘RNase抑制物牛血清白蛋白RNA聚合酶DEPC仪器、耗材 DNA合成仪琼脂糖凝胶电泳微量离心管实验步骤 一、化学合成的 RN
实验动物组织标本的制备实验
实验材料 家兔豚鼠白鼠试剂、试剂盒 营养液仪器、耗材 注射器线浴槽实验步骤 通常选用家兔、豚鼠、大白鼠或小白鼠等动物,禁食24 小时。击头致昏,以避免麻醉或失血对胃肠道机能的影响。立即打开腹腔,取出所需的胃、肠、胆囊等。去除附着的系膜或脂肪等组织。迅速放入充氧(或95%O2+5%CO2
转运反应成分的制备实验——胞质液的制备
实验材料血试剂、试剂盒酸-柠檬酸盐-葡萄糖溶液裂解缓冲液仪器、耗材离心机实验步骤一、网状细胞和红细胞胞质液的制备1. 自动物身上采血,每 7 ml 血加 1 ml 酸-柠檬酸盐-葡萄糖溶液(ACD;75 mmol/L 柠檬酸三钠,38 mmol/L 柠檬酸,136 mmol/L 葡萄糖,pH 5.0
来自噬菌体的惊喜——-M13-Antibody-(HRP)
前言2018年10月诺贝尔化学奖的一半颁发给了美国科学家George P. Smith和英国科学家Gregory P. Winter, 两人获奖的原因是多肽和抗体的噬菌体展示技术。噬菌体展示技术在生物医药研发中有着十分广泛的应用,是生物新药研发的源头技术,M13噬菌体则被广泛地应用于噬菌体展示技
薄膜蒸发制备方法的原理简介
欲蒸发的提取液经输液管.通过流量计进入预热器预热后,自预热器上部流出,并由底部进入列管蒸发器,被蒸汽加热即剧烈沸腾并形成大结泡沫;泡沫与水 蒸气的混合物自汽沫出口进入气液分离桥中,将汽液分离成浓缩液和蒸汽; 浓缩液经分离器下出 口阀流入浓缩液储罐,水蒸气经二次蒸汽导管进入预热器的夹层中供预热提取
关于壳聚糖制备单糖的简介
甲壳素和壳聚糖主链水解制备单糖的主要途径是化学法。对甲壳素和壳聚糖进行水解得到的最终产物是D-氨基葡萄糖单糖,D氨基葡萄糖单糖具有刺激蛋白多糖合成、辅助治疗关节炎等功能。N-乙酰氨基葡萄糖具有免疫调节、促进双歧杆菌生长、改善肠道微生态环境、治疗和预防肠道疾病等功能。甲壳素用热的浓盐酸水解可得到D
制备氮气的变压吸附法简介
该方法是以压缩空气为原料,一般以分子筛为吸附剂,在一定的压力下,利用空气中氧气和氮气分子在不同分子筛表面吸附量的差异,在一定时间内氧在吸附相富集,氮在气体相富集,实现氧、氮分离;而卸压后分子筛吸附剂解析再生,循环使用。 [3] 吸附剂除了分子筛之外,还可应用活性氧化铝、硅胶等。 目前,常用变压
DNA-亲和介质的制备实验
试剂、试剂盒ATP[y-32P]ATPT4多核苷酸激酶乙酸铵乙醇酚 氯仿氯仿 异戊醇NaOAcT4 DNA连接酶酚异丙醇重蒸水Sepharose CL-2B溴化氰NN-二甲基甲酰胺NaOH磷酸钾KClCNBr-活化的Sepharose*.4BHClT4 多核苷酸激酶缓冲液TE接头-激酶缓冲液乙醇胺-
正丁醚的制备实验
实验步骤在50 mL两颈瓶中加入5.2 mL 正丁醇, 0.8 mL 浓硫酸,两粒沸石,摇动混合均匀,安好装置。分水器内加水至支管后放去0.5 mL水即分水器内有( V-0.5 ) mL水。开始小火加热,保持瓶内液体微沸,开始回流,温度控制在134~135 ℃,待分水器已全部被水充满时表示反应已基本
质粒DNA的小量制备实验——
实验采用国产的质粒小量抽提试剂盒。它是一种新型的离子交换柱,在特定的条件下,使质粒能在离心过柱的瞬间,结合到质粒纯化柱上,在一定条件下又能将质粒充分洗脱,从而实现质粒的快速纯化。实验材料DNA试剂、试剂盒LB培养基卵清溶菌酶异丙醇TE仪器、耗材离心机漩涡混合器水浴锅实验步骤一、实验步骤1. 接种一
抗肽抗体的制备实验
提高免疫原性肽的抗血清,是最简单的方法,获得非隔离的蛋白质的抗体,例如,对来自DNA序列信息的推定蛋白质序列。 这种方法也是有用的,当隔离的抗原是困难或费时,或当抗原是一个大的蛋白家族的成员。实验步骤: 将10 mg BSA溶于0.5 ml 0.1 mol/l pH6.8的磷酸钠
质粒DNA的大量制备实验
实验方法原理 大量碱裂解方法不仅相当快捷可靠,而且可获得相当纯净的粗制DNA。煮沸法的大量制备也简单易行,但得到的DNA比较粗制。高纯度的质粒DNA可通过氯化铯/溴化乙锭平衡离心法或层析法进一步纯化粗制DNA得到。实验材料 培养基菌株试剂、试剂盒 EDTASDS乙醇乙酸钾异丙醇仪器、耗材 离心管实验
质粒DNA的小量制备实验
实验方法原理 碱裂解法是最常用的小量制备质粒DNA的方法。实验材料 培养基试剂、试剂盒 EDTASDS乙醇VTE仪器、耗材 平板实验步骤 1. 接种一个单菌落于5 ml无菌LB培养液中,在37°C培养至饱和状态(过夜)。2. 取1.5 ml培养液以最大转速离心20 S。弃上清。3. 沉淀用10
酒剂、酊剂的制备实验
实验材料 谷类酒试剂、试剂盒 当归黄芪蜜炙牛膝防风白酒黄酒蔗糖仪器、耗材 天平烧杯玻璃棒实验步骤 1. 将当归,黄芪(蜜炙),牛膝,防风4味,粉碎或粗粉。2. 按渗漉法,用白酒2400 ml与黄酒8000 ml的混合液作溶剂,浸渍48小时后,缓缓渗漉。3. 在渗漉液中加入蔗糖840 g搅拌溶解
酒剂、酊剂的制备实验
浸渍法 实验材料 谷类酒 试剂、试剂盒
EDTA的实验室制备
称取一氯乙酸94.5g(1.0mol)于1000mL圆底烧瓶中,慢慢加入50%碳酸钠溶液,直至二氧化碳气泡发生为止。加入15.6g(0.2mol)乙二胺,摇匀,放置片刻,加入40%NaOH溶液100mL,加水至总体积为600mL左右,装上空气冷却回流装置,于50℃水浴上保温2h,再于沸水浴上保温回流
转运反应成分的制备实验
制备藻胆色素蛋白标志物 胞质液的制备 细胞通透化 转运反应 试剂、试剂盒 APC 悬浮液
实验技术:组织切片的制备
【目的】组织标本必须首先被制成组织切片,再经过染色处理,然后才能在显微镜下进行临床诊断和科学研究。【原理】苏木素染色结合伊红染色是常规组织学染色技术,也称为H & E染色。苏木素是碱性染色,细胞核被染成深紫或兰色,常用作核染色;伊红是酸性染色,细胞浆染呈红色,常用作胞浆染色。【材料】1.试剂和溶液(
转运反应成分的制备实验
试剂、试剂盒 APC 悬浮液HEPESNaClSMCC仪器、耗材 微量离心管Sephadex G50 脱盐柱实验步骤 1. 在一微量离心管中,4℃,10000 g 离心 APC 悬浮液 5~10 分钟,吸走上清。2. 用 0.1 mol/L HEPES(pH 7.4),0.1 mol/L NaCl
正丁醚的制备实验
实验步骤 在50 mL两颈瓶中加入5.2 mL 正丁醇, 0.8 mL 浓硫酸,两粒沸石,摇动混合均匀,安好装置。分水器内加水至支管后放去0.5 mL水即分水器内有( V-0.5 ) mL水。开始小火加热,保持瓶内液体微沸,开始回流,温度控制在134~135 ℃,待分水器已全部被水充满时
酵母蔗糖酶的制备实验
研磨法 实验方法原理 蔗糖酶( inver tase ) (β-D-呋喃果糖苷果糖水解酶) ( fructofuranosidefructohydrol
质粒DNA的小量制备实验
实验方法原理 当菌体在NaOH和 SDS溶液中裂解时,蛋白质与DNA发生变性,当加入中和液后,质粒DNA分子能够迅速复性,呈溶解状态,离心时留在上清中;蛋白质与染色体DNA不变性而呈絮状,离心时可沉淀下来。碱裂解法是最常用的小量制备质粒DNA的方法。实验材料 细菌克隆试剂、试剂盒 LB培养基抗生素葡
质粒DNA的小量制备实验
碱裂解小量制备法 煮沸法 实验材料 DNA 试剂、试剂盒
DNA-亲和介质的制备实验
DNA 亲和介质的制备实验 试剂、试剂盒 ATP [y-32P]ATP T4多核苷酸激酶
转运反应成分的制备实验
制备藻胆色素蛋白标志物胞质液的制备细胞通透化转运反应试剂、试剂盒APC 悬浮液 HEPES
亲和柱的制备实验
配基固相化技术 实验方法原理 溴化氰活化的琼脂糖凝胶用于配体固相化是实验室最常用的固相化技术之一。其原理是溴化氰活化的介质与配体主要的氮基反应形成异脲键。但是
散剂的制备实验——示例法
散剂系指药物或与适宜辅料经粉碎、均匀混合而制成的干燥粉末状制剂,供内服或局部用。内服散剂一般溶于或分散于水或其他液体中服用,亦可直接用水送服。局部用散剂可供皮肤、口腔、咽喉、腔道等处应用;专供治疗、预防和润滑皮肤为目的的散剂亦可称撒布剂或撒粉。实验材料碳酸氢钠氧化镁试剂、试剂盒硫酸氢钠仪器、耗材研钵
颗粒剂的制备实验
实验材料 大清叶 板蓝根 连翘 拳参 试剂、试剂盒 纯化水 乙
质粒DNA的大量制备实验
碱裂解法 氯化铯/溴化乙锭平衡离心法 层析法 实验方法原理 大量碱裂解方法不仅相当快捷可靠,而且可获得相当纯净的粗制DNA。煮沸法的大量制