用细胞系提DNA的方法
细胞鉴别试验的方法有多种,根据检测目标分类包括细胞水平（形态、分类特征）、染色体水平、分子水平（生化、酶学、分子生物学特征）；根据方法学分类,包括细胞遗传学检测,免疫学检测,生物化学检测和分子生物学检测等.目前,常用的细胞鉴别试验方法包括细胞形态学检查、种属特异性抗原的检测、染色体核型分析、同功酶分析、限制性内切酶分析等等.细胞形态学检查：通常在细胞接种24小时和48小时后,用100倍显微镜检查,观察细胞在低密度和高密度生长时的形态.这种方法比较直观,但只是一个比较粗略的鉴别方法,并且与检测人员的经验密切相关.种属特异性抗原检测：也就是用种属特异性抗血清来检测种属特异性抗原,比如间接免疫荧光抗体染色.这种方法操作起来比较简单,但是试验敏感性较差,也就是如果存在少量的细胞污染不能分辨出来.......阅读全文
用细胞系提DNA的方法
细胞鉴别试验的方法有多种,根据检测目标分类包括细胞水平（形态、分类特征）、染色体水平、分子水平（生化、酶学、分子生物学特征）；根据方法学分类,包括细胞遗传学检测,免疫学检测,生物化学检测和分子生物学检测等.目前,常用的细胞鉴别试验方法包括细胞形态学检查、种属特异性抗原的检测、染色体核型分析、同功酶分
细胞系的－DNA－STR－谱_细胞团抽提
实验方法原理用 Qiagen®QIAamp®迷你试剂盒从细胞团提取 DNA；抽提到的 DNA 用SGMPlius®扩增，然后用 ABI377 DNA 测序仪进行聚丙烯酰胺凝胶电泳，用GeneScan®和Genotyper®软件进行分析。实验材料Qiagen®DNA迷你试剂盒试剂、试剂盒无水乙醇磷酸缓
DNA抽提
DNA抽提（主要内容如下）· Working with DNA· DNA Extraction from Bacteria and Other Organisms· DNA Extraction from Cell and Tissue· Mitochondria DNA Isola
DNA抽提指南(TRIZOL)
按照RNA 分离操作方案在完全移去水样层后，匀浆中的DNA 存在于中间层和苯酚层中也可以被分离出来。在沉淀和多次洗脱后，DNA 溶解在8 mM NaOH中。用TRIZOL试剂从组织和培养细胞中完全回收的DNA 可以用来做样品中DNA 含量的测定。同时抽提的基因组DNA 可以用于对Northern a
质粒DNA的抽提与纯化
目的 ： 采用碱变性法，学习小规模制备质粒DNA的技术原理 ： 碱变性抽提质粒DNA是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而达到分离目的。在pH值高达12.6的碱性条件下，染色体DNA的氢键断裂，双螺旋结构解开而变性。质粒DNA的大部分氢键也断裂，但超螺旋共价闭合环状的两条互补链不会完
细胞系的多位点DNA指纹检测——细胞系－Southern－印迹－DNA－制备
实验方法原理细胞中提取的 DNA 经限制性酶消化，利用 Southern 印迹技术将消化产物固定在尼龙膜上 [ Ausubel et al.，1996，2002 ]，与来自 M 13 噬菌体的标记 DNA 进行杂交。实验材料D-PBSHinfI酶及其缓冲液琼脂糖凝胶5×TBE储存液EDTA二钠盐6×
提质粒，得到的DNA浓度特别低
通细菌扩增培养程混杂菌导致含目质粒细菌比例降通挑克隆规模培养提质粒通发现质粒产量错扩增培养质粒提建议挑取克隆鉴定功再用平皿培养功菌液再离比较散克隆再扩增培养提前先提1ml鉴定确认没问题更换菌种持续现问题更换菌种产受态细胞期扩增产已经退化表型改变换进口受态细胞切恢复
细胞系的－DNA－STR－谱_细胞系结果分析
实验材料GeneScan®和Genotyper®软件PowerMac计算机实验步骤本节包括 2 个主要领域：分析利用GeneScan®分析软件中 DNA 程序收集软件收集到的原始数据，和利用Genotype®软件为前面用GeneScan®软件分析过的 DNA 谱中的指定等位基因名称。1. 打开凝胶图
细胞系的－DNA－STR－谱
细胞团抽提 用SGM Plus®进行扩增 利用ABI377DNA测序仪进行凝胶电泳 细胞系结果分析 实验方法原理 用 Qiage
细胞系的－DNA－STR－谱
实验材料 Qiagen®DNA迷你试剂盒试剂、试剂盒 无水乙醇磷酸缓冲液仪器、耗材 小离心管离心机水浴或可以维持56℃的烤箱涡流混合器实验步骤 一、开始实验前，必须准备以下试剂：(a)蛋白酶溶剂溶解：向 Qiagen® 冷冻干燥的蛋白酶中加适量蛋白酶溶剂。该溶液 2~8°C 保存 2 个月内稳定。(
植物总DNA的快速少量抽提实验
实验方法原理 CTAB法：该方法简便、快速，DNA产量高(纯度稍次，适用于一般分子生物学操作)。 CTAB是一种非离子去污剂，植物材料在CTAB的处理下，结合65 °C水浴使细胞裂解、蛋白质变性、DNA被释放出来。CTAB与核酸形成复合物，此复合物在高盐（>0.7 mM）浓度下可溶，并稳
DNA新“写法”提振合成生物学
虽然科学家能以更快的速度阅读DNA序列，但其编写DNA的能力并未跟上。那些想要的用于诸如合成生物学等领域的“定制”DNA，只能勉强对付在缓慢且昂贵的化学过程中被合成的短链。 这种情况似乎即将改变。近日，来自法国一家生物技术初创公司的研究人员在于美国旧金山举行的合成生物学会议上宣布，利用生物体内
植物总DNA抽提方法和优缺点
1、植物DNA的CTAB提取法：经典方法。效果较好，污染少。多用于核基因组提取。2、SDS提取法：较为简易，提取的为全基因组，但有蛋白污染可能。3、简易“一管法”提取方法：4、PCR研究的快速提取法：以上两者方法简单，快速，但污染多，不适合做酶切等操作。5、酚类、多糖类物质较多的植物DNA提取法：多
乙醇固定样品DNA－抽提和直接PCR
实验概要本实验从乙醇浸泡的鱼苗中提取DNA，并利用直接PCR进行了鉴定。实验原理在实际的研究工作中，野外取样的地点一旦较为偏远，受条件的限制，很难保证得到的样品活体或能够快速冷冻；另外，对一些稀有物种和濒危种，鲜活样品的采集十分困难，一般为了解决这些问题，常采用乙醇和甲醛固定的方法来处理样品，再对样
植物总DNA的快速少量抽提实验
CTAB法 实验方法原理 CTAB法：该方法简便、快速，DNA产量高(纯度稍次，适用于一般分子生物学操作)。 CTAB是一种非离子去污剂，植物材料在CTAB的
水稻总DNA的快速少量抽提CTAB法
DNA分子是分子生物学研究的基本材料，依不同的实验目的可采取不同的抽提方法获取数量和质量不等的 DNA 。 实验目的：了解植物 DNA 抽提的主要方法，掌握 CTAB 法快速抽提水稻 DNA 。 实验材料及试剂： 水稻 叶片，1.5 × CTAB ，氯仿 / 异戊醇 (24:1) ，
小鼠基因组DNA抽提操作规程
一、原理与意义先用细胞裂解液对已制备好的组织匀浆充分裂解，然后用蛋白酶去除其中的蛋白，再用氯仿一次抽提（无需用酚抽提）、预备液沉淀、RNase去除RNA、乙醇再沉淀即可得到完整DNA。该方法适用于从人或动物的各种组织、血液、培养细胞、G+/G-细菌中快速抽提基因组DNA。抽提出来的DNA能用于几乎所
古DNA揭示德系犹太人起源
一个国际科学家小组从人类遗骸牙齿中提取了古代DNA，研究了德国埃尔福特一个曾经繁荣的中世纪德系犹太人社区的生活。相关成果近日发表于《细胞》，证明埃尔福特犹太社区的基因多样性比现代德系犹太人要多。“今天，如果你比较来自美国和以色列的德系犹太人，你会发现他们在基因上非常相似，就像是同一群人，无论他们住在
细胞系的多位点DNA指纹检测
细胞系 Southern 印迹 DNA 的制备 经标记的 M13 噬菌体 DNA 的制备 杂交 实验方法原理 细胞中提取的 DN
plasmid－DNA的抽提•纯化试剂盒MagExtractor®Plasmid
产品索引 5870 中文名称： plasmid DNA的抽提•纯化试剂盒 英文名称： MagExtractor®-Plasmid- 产品编号： NPK -300 产品类别： 分子生物学 生产厂家： TOYOBO 产品价格：
植物总DNA的快速少量抽提实验——CTAB法
DNA分子是分子生物学研究的基本材料，依不同的实验目的可采取不同的抽提方法获取数量和质量不等的DNA。实验目的是了解植物DNA抽提的主要方法，掌握CTAB法快速抽提水稻DNA。实验方法原理CTAB法：该方法简便、快速，DNA产量高(纯度稍次，适用于一般分子生物学操作)。 CTAB是一种非离子去污剂，
细胞系的多位点DNA指纹检测——杂交
实验方法原理用标记的 M13 mp9 DNA 与 Southern 印迹后的细胞 DNA 杂交，严格冲洗后，通过放射自显影技术，观察与 M13 序列结合的 DNA 片段分布图谱 [ Westneat et al.，1988 ] 。试剂、试剂盒严谨冲洗液预杂交 杂交液20×SSC 储存液实验步骤1.
植物DNA的提取实验中吸收样品、抽提应注意什么
抽提时应缓慢摇匀，不能太用力，时间要适当长一点。离心后吸取上清要慢，枪头最好用蓝枪头或是剪过的黄枪头，注意千万不能触到蛋白膜。原因就是DNA链容易断裂，所以要轻，要用口大的枪头。为了抽提效果好所以延长时间。
质粒DNA的抽提、沉淀及琼脂糖凝胶电泳
一、实验目的·学习酚、氯仿抽提去除蛋白质的基本方法·了解质粒DNA的抽提方法·学习掌握琼脂糖凝胶电泳的方法·熟练取液枪的使用方法二、实验原理·在DNA的粗提液或其他的DNA反应体系中，一般都混有蛋白质、寡糖苷酸等杂质。酚和氯仿可以使蛋白质变性，离心后变性蛋白质存在于有机相和水相之间的界面，吸取上层含
细胞系的－DNA－STR－谱_用SGM－Plus®进行扩增
实验材料SGM Plus® PCR 混合物的各种成分试剂、试剂盒纯无菌水仪器、耗材热循环仪实验步骤1. 参照 ABI 的操作步骤，为待扩增样品准备足量的混合物，每个样品管包含：(a) AMPF/STR®PCR 反应混合物 21 μl(b) AMPF/STR®SGM Plus®引物一套 11 μl(c
细胞系的－DNA－STR－谱_利用ABI377DNA测序仪进行凝胶电泳
试剂、试剂盒TEMEDSGM Plus®凝胶上样混合液仪器、耗材ABI377 DNA 测序仪制胶材料凝胶装置材料冰或者电制冷板热循环仪凝胶板和凝胶盒缓冲液梢热传导板实验步骤1. 在烧杯中混合以下各成分，制备 4 % 聚丙烯酰胺凝胶（制胶材料：量筒、天平、过滤器（如 Sartolab 150 ml 滤
磁珠法抽提dna的回收率偏低什么原因
回收率低可能主要是磁珠的吸附作用不好，也有可能是试剂盒设计不合理。至于磁珠方面最主要的问题是，很多磁珠不是单分散的，影响重复性，有的磁珠表面包硅不完整，影响保存稳定性。试试普瑞迈格磁珠，尺度均匀、单分散、稳定性好、性价比最高，我知道有不少试剂盒厂家选用他们的磁珠。。
细胞系的多位点DNA指纹检测——经标记的－M13－噬菌体－DNA制备
实验方法原理用随机引物延伸法标记 M13mp9 DNA [ Finberg and Voglstein，1983 ]，并用葡聚糖柱（Sephadex） 纯化。实验材料模板HEPESDTM试剂氧核苷酸牛血清蛋白P-dGTPKlenow 酶试剂、试剂盒DTM试剂OL试剂标记缓冲液洗柱缓冲液仪器、耗材Se
抗原提呈细胞提呈过程介绍
APC表达已被处理的抗原多肽，供T细胞受体（TCR）特异性识别，此为抗原提呈。以巨噬细胞为例，可将抗原提呈过程分为3个阶段。 1 抗原摄取：巨噬细胞通过吞噬，吸附，吞饮等途径摄取外源性抗原。 2 抗原加工处理：抗原在巨噬细胞内被降解，暴露免疫原性多肽，后者与APC中产生的HLA-II分子结合
低熔点琼脂糖凝胶中DNA的回收（有机溶剂抽提）
羟乙基修饰的琼脂糖可降低链间的氢键数目，并可在比标准琼脂糖更低的温度下熔化和凝固。多糖链上这种替换发生的程度决定了琼脂糖熔化与凝结的确切温度。这一特性构成了从凝胶中回收及操作 DNA 的基础（Wielander 1979; Parker and Seed, 1980)。 本实验来源「分子克隆实验指南