电泳迁移率变动分析的实验方法
通常用32P标记DNA分子,而不标记蛋白质。电泳结束后,用放射自显影技术显现具放射性标记的DNA条带位置。如果细胞蛋白提取物中不存在与同放射性标记的DNA探针结合的蛋白质,那么所有放射性标记都将出现在凝胶的底部;反之,将会形成DNA-蛋白质复合物,由于受到凝胶阻滞的缘故,放射性标记的DNA条带就会出现在凝胶的不同部位。......阅读全文
电泳迁移率变动分析的实验方法
通常用32P标记DNA分子,而不标记蛋白质。电泳结束后,用放射自显影技术显现具放射性标记的DNA条带位置。如果细胞蛋白提取物中不存在与同放射性标记的DNA探针结合的蛋白质,那么所有放射性标记都将出现在凝胶的底部;反之,将会形成DNA-蛋白质复合物,由于受到凝胶阻滞的缘故,放射性标记的DNA条带就会出
电泳迁移率变动分析的实验方法
通常用32P标记DNA分子,而不标记蛋白质。电泳结束后,用放射自显影技术显现具放射性标记的DNA条带位置。如果细胞蛋白提取物中不存在与同放射性标记的DNA探针结合的蛋白质,那么所有放射性标记都将出现在凝胶的底部;反之,将会形成DNA-蛋白质复合物,由于受到凝胶阻滞的缘故,放射性标记的DNA条带就会出
电泳迁移率变动分析的实验方法介绍
通常用32P标记DNA分子,而不标记蛋白质。电泳结束后,用放射自显影技术显现具放射性标记的DNA条带位置。如果细胞蛋白提取物中不存在与同放射性标记的DNA探针结合的蛋白质,那么所有放射性标记都将出现在凝胶的底部;反之,将会形成DNA-蛋白质复合物,由于受到凝胶阻滞的缘故,放射性标记的DNA条带就
电泳迁移率变动分析
中文名电泳迁移率变动分析外文名electrophoretic mobility shift assay定义用放射性同位素标记待检测的片段(即探针DNA),然后与细胞提取物共温育,形成DNA-蛋白复合物,将该复合物加到非变性聚丙烯酰胺凝胶中进行电泳。
电泳迁移率变动分析的简介
用放射性同位素标记待检测的片段(即探针DNA),然后与细胞提取物共温育,形成DNA-蛋白复合物,将该复合物加到非变性聚丙烯酰胺凝胶中进行电泳。 电泳迁移率变动分析,又称凝胶阻滞实验,英文名electrophoretic mobility shift assay,简称EMSA。是体外利用电泳迁移
电泳迁移率变动分析的应用
用于研究特定的转录因子以及转录因子所结合的顺势作用元件。用于研究与蛋白质相结合的DNA的序列的特异性。评估突变对探针DNA与结合蛋白相互作用的影响。用于研究DNA-foot printing。
电泳迁移率变动分析的定义
电泳迁移率变动分析,又称凝胶阻滞实验,英文名electrophoretic mobility shift assay,简称EMSA。是体外利用电泳迁移率的变化来分析DNA与蛋白质相互作用的一种特殊的凝胶电泳技术。
电泳迁移率变动分析的应用
用于研究特定的转录因子以及转录因子所结合的顺势作用元件。 用于研究与蛋白质相结合的DNA的序列的特异性。评估突变对探针DNA与结合蛋白相互作用的影响。 用于研究DNA-foot printing。
简述电泳迁移率变动分析的应用
1、用于研究特定的转录因子以及转录因子所结合的顺势作用元件。 2、用于研究与蛋白质相结合的DNA的序列的特异性。 3、评估突变对探针DNA与结合蛋白相互作用的影响。 4、用于研究DNA-foot printing。
杂交实验的实验方法
所有操作均在超净工作台上进行。1.原生质体的分离和收集。2.将收集的两种不同材料的原生质体分别悬浮在0.16mol/L的CaCl2·2H2O(pH5.8~6.2)原生质体密度调整为2×105/ml左右(用血细胞计数板统计原生质体密度)。3.将两种原生质体悬液等量混合。4.用刻度吸管将混合的原生质体悬
凝胶迁移率变动分析
中文名称凝胶迁移率变动分析英文名称gel mobility shift assay定 义利用凝胶进行的电泳迁移率变动分析。不同大小的分子在凝胶中电泳移动的速度不同,当某种分子与另一种分子特异性结合后,它在非变性凝胶电泳带中的位置就发生了变化,由此可以分析不同分子间的相互作用。如待检测DNA样品与核
凝胶迁移率变动分析的特点
中文名称凝胶迁移率变动分析英文名称gel mobility shift assay定 义利用凝胶进行的电泳迁移率变动分析。不同大小的分子在凝胶中电泳移动的速度不同,当某种分子与另一种分子特异性结合后,它在非变性凝胶电泳带中的位置就发生了变化,由此可以分析不同分子间的相互作用。如待检测DNA样品与核
克尔效应实验的实验方法
1.放入克尔盒,并转动至消光位置;2.接通克尔盒的偏转电源,即可观察到屏幕上有光亮。改变两极板之间的电压,可以观察到屏幕上的光强会随之变化;3.保持两极板之间的电压不变,旋转克尔盒,同样可以观察到屏幕上光强变化。
测定蛋白质与DNA结合位点的电泳迁移率变动分析法
放射性标记DNA探针的制备l 聚丙烯酰胺凝胶的制备1.按照(三)中操作流程灌制非变性聚丙烯酰胺凝胶。将10×TBE稀释成0.5×的工作浓度。聚丙烯酰胺的工作浓度取决于待测DNA片段的大小,200bp左右的片段需要4~5%的凝胶,小于100bp的片段应灌制6~8%的凝胶。 l DN
实验动物实验标本的采集实验——动物采血方法
实验材料实验动物试剂、试剂盒消毒液仪器、耗材注射器实验步骤(1) 大鼠、小鼠的采血方法:①剪尾采血:适用于少量采血,如制作血涂片、白细胞计数等。动物麻醉后,将尾尖剪去约 5 mm, 待血液流出采集。也可用刀割破尾动脉或尾静脉,让血液自行流出。小鼠可每次采血约 0. 1 ml, 大鼠约 0.4 ml。
克尔效应实验的实验方法介绍
1.放入克尔盒,并转动至消光位置;2.接通克尔盒的偏转电源,即可观察到屏幕上有光亮。改变两极板之间的电压,可以观察到屏幕上的光强会随之变化;3.保持两极板之间的电压不变,旋转克尔盒,同样可以观察到屏幕上光强变化。
实验误差的表示方法
实验结果都有误差,误差是表示测量的结果与真值的接近程度。分析实验中,待则组分在样品中的真值是不知道的,也无法测得真值,即使是国家标准参考物质中(即标准样品)含量值也不是真值,只是若干个实验室使用各种不同的测量方法对均匀样品进行多次重复测定数据的统计平均值,它应该是非常接近真值,但它仍然不是真值。误差
动物的注射方法实验
实验方法原理 实验材料 小白鼠试剂、试剂盒 灭菌生理盐水仪器、耗材 注射器(1 ml)6 号针头消毒煮沸器碘酒棉花75% 酒精棉花消毒干棉花实验步骤 1. 注射器的准备与消毒注射器与针头一般用高压蒸气灭菌或干热灭菌比较彻底,而且可以预先准备好,但也可用煮沸消毒法,不过消毒后不能久放。此处主要介绍煮沸
动物实验的常用方法
在医学教学、科研和医学工作中,不论是从事基础医学的还是临床医学、预防医学,都需要用实验动物来进行各种实验。通过对动物的实验的观察和分析,来研究和解决医学上存在的许多问题,动物实验方法已成为医学科学研究和教学工作中必不可少的重要手段。动物实验方法是多种多样的,在医学的各个领域内都有其不同的应用,其中一
腺苷的实验制备方法
1、对照品溶液的制备精密称取腺苷对照品适量,加甲醇配制成1mL含40μg的对照品溶液。2、供试品溶液的制备取供试品20mL置100mL量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀超声处理5分钟,放置待沉淀完全,滤过,取许滤液50mL蒸干,残渣加水20mL溶解,以水饱和的正丁醇提取4次,合并正丁醇提取液蒸干,残渣加50
mtt的实验方法
⒈选择适当的细胞接种浓度。一般情况下,96孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有105个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大,因此,在进行MTT试验前,要进行预实验检测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线,确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间,以保证培养终止致细胞过满。这样,才能保证MT
实验动物的麻醉方法
实验动物的麻醉方法1.全身麻醉(1)吸入法 用一块圆玻璃板和一个钟罩或一个密闭的玻璃箱作为挥发性麻醉剂的容器,多选用*作麻药。麻醉时用几个棉球,将*倒可其中,迅速转入钟罩或箱内,让其挥发,然后把待麻醉动物投入,约隔4--6分钟即可麻醉,麻醉后应立即取出,并准备一个蘸有*的棉球小烧杯,在动物麻醚变浅时
mtt的实验方法
⒈选择适当的细胞接种浓度。一般情况下,96孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有105个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大,因此,在进行MTT试验前,要进行预实验检测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线,确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间,以保证培养终止致细胞过满。这样,才能保证MT
病毒的培养方法实验
实验方法原理 鸡胚培养方法操作简便,适用于流感病毒,痘病毒,疱疹病毒和脑炎病毒等的培养。最常用的鸡胚接种方法有四种,即绒毛尿囊膜接种法,羊膜腔(羊水囊)接种法,尿囊腔接种法和卵黄囊接种法。根据不同病毒和不同目的采用适宜的接种方法。实验步骤 1. 鸡胚的检查将9~11 日龄鸡胚置于检卵器上,照视观察
玻片凝集实验的方法
人类ABO 血型鉴定试验(玻片法)1.原理人类ABO血型抗原有A和B两种。A型红细胞膜上有A抗原,B型红细胞上有B抗原,AB型有A和B两种抗原,而O型则不含有A和B抗原。据此,如分别将抗A和抗B血清与待测红细胞混合,抗A和/或抗B血清与红细胞表面上的相应抗原结合而引起红细胞凝集,根据其凝集状况便可判
实验动物的处死方法
实验动物的处死方法很多,应根据动物实验目的、实验动物品种(品系)、以及需要采集标本的部位等因素,选择不同的处死方法。无论采用哪一种方法,都应遵循安乐死的原则。安乐死是指在不影响动物实验结果的前提下,使实验动物短时间无痛苦地死亡。处死实验动物时应注意,首先要保证实验人员的安全;其次要确认实验动物已经死
实验动物的处死方法
实验概要本文介绍了大鼠和小鼠及家兔和狗的几种处死方法,大鼠和小鼠的处死方法主要有:脊椎脱臼法,断头法,击打法,急性失血法和化学致死法。家兔和狗的处死方法主要有:空气栓塞法,急性失血法等。实验步骤1. 大鼠和小鼠的处死方法: 1) 脊椎脱臼法:右手抓住鼠尾用力向后拉,同时左手拇指与食指用力向下按
实验动物的麻醉方法
1.全身麻醉 (1)吸入法 用一块圆玻璃板和一个钟罩或一个密闭的玻璃箱作为挥发性麻醉剂的容器,多选用乙醚作麻药。麻醉时用几个棉球,将乙醚倒可其中,迅速转入钟罩或箱内,让其挥发,然后把待麻醉动物投入,约隔4-6分钟即可麻醉,麻醉后应立即取出,并准备一个蘸有乙醚的棉球小烧杯,在动物麻醚变浅时给套在鼻
实验电炉的接线方法
1.打开包装箱,检查高温炉是否完好,根据装箱单及开箱说明检查配套附件是否完整。 2、高温炉放置地点应选择空气流通,无震动,无易燃﹑易爆气体或高粉尘的场所。 3、请使用与所采购高温炉相匹配的工作电源电压,加装与高温炉炉体工作电流相匹配的空气开关,可靠连接接地保护线,切勿将高电压引入,以免引起仪
实验电炉的接线的方法
接线的方法: 1.打开包装箱,检查高温炉是否完好,根据装箱单及开箱说明检查配套附件是否完整。 2、高温炉放置地点应选择空气流通,无震动,无易燃﹑易爆气体或高粉尘的场所。 3、请使用与所采购高温炉相匹配的工作电源电压,加装与高温炉炉体工作电流相匹配的空气开关,可靠连接接地保护线,切勿将高电压