数字PCR在癌症标志物稀有突变检测的应用
在一份给定的样本中，相比于野生型DNA，癌症相关的突变序列比例较低，经常无法检测。而凭借其超高灵敏度，dPCR系统可以很容易地定量分析低至0.001%-0.0001%的突变频率。之前用任何方法都无法实现准确稳定检测的样本，现在可以使用dPCR轻松进行定量分析。例如，已实现肺癌相关的表皮生长因子受体（EGFR）中T790M突变的检测，可以更好地评估抗酪氨酸激酶抑制剂的治疗。......阅读全文
数字PCR在甲基化含量鉴定的应用
作为表观遗传学研究中重要的一个研究方向——甲基化程度分析，现阶段有不同的方法或技术来进行研究：如传统的亚硫酸氢盐处理后的克隆测序法、抗体检测法、定量PCR检测法等受限于方法学的问题，不能获得甲基化程度的精确定量，而数字PCR系统通过对样品的微液滴处理及目标分子的绝对拷贝数定量，为甲基化程度的精确定量
数字PCR在无创产前筛查的应用
无创伤的产前诊断, 如21号染色体为3倍体的唐氏综合征、已知父母基因型的胎儿地中海贫血或胎儿遗传性耳聋基因检测等。目前无创检测标本来源主要为孕妇血液，而待检测的胎儿DNA受到母体DNA的干扰，影响了检测的准确性。数字PCR技术可以作为二代测序法的补充来进行无创伤产前诊断，从而提高工作效率、降低检测
数字PCR和HRM在肿瘤样本中的应用
摘要：Vogelstein和Kinzler（美国国家科学院院刊，1999年）第一次描述了Digital PCR（dPCR）的概念，一种在微量细胞群中（如原发性肿瘤组织）鉴定突变的方法。通过稀释样品DNA到一个单个分子水平，它可以把PCR自然模拟指数转化为数字信号。当PCR成功的扩增出这些单个
数字PCR在糖尿病治疗中的应用
数字PCR技术目前在糖尿病中的研究热点，通过定量检测非甲基化DNA的水平，对I型糖尿病β细胞死亡进行定量，从而监控病情发展。
Nacia数字PCR在基因表达分析中的应用
华盛顿大学医学院儿科和加利福尼亚大学圣地亚哥分校医学院儿科的研究人员建立了一个稳定可靠的基于RNA磁珠提取和数字PCR的方法，可从粪便样本中检测与EE（热带肠病）关联的人mRNA，灵敏度可达20拷贝GAPDH mRNA/200mg粪便样本。已有报道表明病人粪便中存在人mRNA，可作为反应病人消化道病
数字PCR技术的应用领域
从上世纪90年代以来qPCR技术的爆发式发展使得现代核酸检测技术具有全新的面貌，而进入二十一世纪之后，速度更快、通量更高。成本更低的DNA测序技术正在迅速发展，也是目前竞争最为激烈的研究领域之一，即使在这种情况下，dPCR技术仍然以其高度的灵敏性和特异性在诸多科学领域争取到属于自己的一席之地。即使在
检测稀有突变的两大工具比拼
物以稀为贵，突变检测也是如此。如今，稀有突变（rare mutation）已成了热门的研究对象，并推动了PCR仪器和检测的发展。尽管定量PCR（qPCR）在相当一段时间内仍将占据优势，但数字PCR（dPCR）并不会让它专美。 什么是稀有突变？ “稀有突变”这个词代表什么意思？你询问不同的人，
数字PCR技术的发展与应用简介
数字PCR技术的原理数字PCR（Digital PCR-dPCR）技术是一种新的核酸检测和定量方法，与传统定量PCR（qPCR）技术不同，数字PCR采用绝对定量的方式，不依赖于标准曲线和参照样本，直接检测目标序列的拷贝数。由于这种检测方式具有比传统qPCR更加出色的灵敏度和特异性、精确性，dPCR迅
Naica自动化微滴芯片数字PCR系统在HPV检测的应用
人类DNA中HPV16和HPV18的灵敏度和特异性检测 全世界有超过5％的癌症是因人乳头瘤病毒（HPV）导致的，它主要通过性传播的方式感染[1]。十多种HPV亚型由于其在细胞转化中的作用以及宫颈癌和口咽癌发病率的增加而被认为是高风险的。在这些亚型中，HPV16和HPV18是最普遍的，在大约70％的宫
数字PCR在拷贝数变异（CNV）研究的应用
微滴化的样品处理及检测，这种摆脱Ct值的计算方法而直接获取目标基因的绝对拷贝数，为拷贝数变异的研究提供了绝对的检测精度。是其他诸如二代测序、芯片杂交等平台无法达到的。采用数字PCR能够有效对二代测序（NGS）和微阵列比较基因组杂交（aCGH）等实验结果进行验证，并具有检测周期短、成本低、样本通量高等
数字PCR在精准医学领域的十大应用
数字PCR是一种新的核酸检测和定量方法，借助微液滴或微坑，通过单个模板分子的PCR扩增，可实现不依赖于标准曲线和参照样本的准确、绝对定量。数字PCR使得反应更灵敏、结果更可靠、展示更直观，尤其适用于微量或痕量DNA检测与定量。下面我们就目前已经比较明确的数字PCR应用方向做个介绍。基因表达差异研究数
数字PCR技术在DNA定量精准等领域的应用
数字PCR先进的数字PCR技术实现了样品中的单分子核酸扩增，从而使的DNA定量的精准度提高到了全新水平。Philip与Stilla Technologies的首席执行官兼联合创始人Rémi Dangla进行了交流，讨论了数字PCR技术领域的进展和挑战。Stilla Technologies公司总部位
数字PCR技术的应用举例
EGFR突变的肺癌治疗过程中 的液体活检检测是一个非常具有挑战性的工作 ，但这个基因在亚洲人群的高突变频率使非常多的肺癌患者在接受对应靶向药中受益（约30%）。数字PCR可以以肺癌患者的血浆中游离肿瘤DNA（CTDNA）为样品，检测EGFR敏感性和药物抗性相关的突变。 运用数字PCR为精准
数字PCR应用及前景
剖析|你想要知道的数字PCR应用及前景 一． PCR的发展历史 PCR技术自问世以来，在遗传病、病原体、癌基因等分子诊断领域和法医鉴定等方面发挥了巨大作用。代 PCR在进行扩增后通过凝胶电泳进行定性分析。 随着生物分子荧光技术的发展，1992年实时荧光定量PCR(Quantitative Real
数字PCR应用及前景
一． PCR的发展历史 PCR技术自问世以来，在遗传病、病原体、癌基因等分子诊断领域和法医鉴定等方面发挥了巨大作用。第一代 PCR在进行扩增后通过凝胶电泳进行定性分析。 随着生物分子荧光技术的发展，1992年实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR, qPCR) 应运
预防癌症新手段：微滴式数字PCR(ddPCR)技术
“预防就是治疗”--《众病之王：癌症传》 战胜癌症，早期预防、早期发现是关键。癌症患者如果在晚期被发现，90%的患者都会死亡，而肿瘤在早期发现，5年的存活率是90%。早期发现恶变细胞踪迹，可以通过干预手段，提高自身免疫力，也可以完整切除，结合化疗，治疗疾病。 微滴式数字PCR（Droplet
Digital－PCR－技术的发展与应用（二）
液滴数字PCR数字PCR源于乳液PCR(emulsion PCR)技术 ，利用微滴发生器可以一次生成数万乃至数百万个纳升甚至皮升级别的单个油包水微滴,作为数字PCR的样品分散载体，PCR反应结束后检测每个微滴的荧光信号。目前Bio-Rad公司的QX100系统、 QX200系统均为采用液滴技术
数字PCR检测技术介绍
数字PCR（Digital PCR-dPCR）技术是一种新的核酸检测和定量方法，又称单分子PCR，它的原理是将一个标准PCR反应分配到大量微小的反应器中，在每个反应器中包含或不包含一个或多个拷贝的目标分子( DNA模板) ，实现“单分子模板PCR扩增”。 扩增结束后，通过阳性反应器的数目“数出”目标
数字PCR在－二代测序辅助建库的应用
目前靶向测序建库方法包括扩增子方法，在均相溶液中，当扩增引物增加时，由于扩增引物之间的相互作用，从而影响扩增的效率；如果将其分散到大量微液滴中扩增，将可大大降低引物间相互作用，提高扩增效率。同时还可以实现对于少量模板的有效扩增，得到更多的有效测序数据。
关于PCR技术那些事
什么是PCR？聚合酶链式反应（Polymerase chain reaction，PCR）是一种分子生物学技术，用于体外扩增特定的DNA片段。PCR技术发展简史PCR之父 Kary MullisPCR反应基本原理和反应过程基本原理：反应过程：变性——将被复制的DNA片段在高于其Tm的条件下（94~9
数字PCR技术的发展和原理
数字PCR即Digital PCR（dPCR)，它是一种核酸分子绝对定量技术。相较于qPCR，数字PCR可让你能够直接数出DNA分子的个数，是对起始样品的绝对定量。在定量PCR时，我们常常纠结一个问题，究竟是相对定量还是绝对定量呢？如今，你无需纠结了，因为数字PCR（digital PCR）来了。尽
数字PCR发展历程
传统的荧光定量PCR，经过多年的发展，已是很成熟的实验方案了。其中，最常用的是Taqman法和SYBR Green法。而在这二种方法当中，Taqman法又以其特异性高、定量精确，得到广大用户的认可。但是Taqman法PCR，它还是一个相对定量的办法。它测的是一个Ct值，也就是PCR到第几个循
癌症标志物检测新技术
近期，一个来自美国普度大学的科学家团队表示他们成功开发了一种用于检测抑制癌症及其他疾病标志蛋白及相关生物标志物的新型纳米检测技术。??在我们的身体中存在着大量的糖蛋白，在很多情况下，这些被糖类修饰的蛋白分子经常出现于我们的血液与尿液中，具有作为多种癌症和其他疾病指示器的作用。然而，我们血液或尿液中的
癌症标志物检测新技术
近期，一个来自美国普度大学的科学家团队表示他们成功开发了一种用于检测抑制癌症及其他疾病标志蛋白及相关生物标志物的新型纳米检测技术。??在我们的身体中存在着大量的糖蛋白，在很多情况下，这些被糖类修饰的蛋白分子经常出现于我们的血液与尿液中，具有作为多种癌症和其他疾病指示器的作用。然而，我们血液或尿液中的
MALDITOFMS在突变检测中的应用
近年来随着精准医疗的需求，临床中提出了越来越多的检测需求。以非小细胞肺癌为例，EGFR、KRAS、BRAF、ALK、ROS1、RET、MET、HER-2已经成为临床中常用的检测需求。 目前检测中，常以荧光定量方法检测mutation，FISH方法检测fusion，或者采用NGS技术进行检测。E
数字PCR在CRISPRCas9基因编辑结果验证的应用
CRISPR-Cas9技术的发明，是基因编辑技术的一大突破，但如何验证实验是否成功，仍需要高灵敏度的检测方法，数字PCR技术可以满足这一需求。Broad研究所张锋团队发明了以CRISPR为基础的SHERLOCK技术可以对核酸进行高灵敏度的定性检测，但精确定量评估时仍采取了数字PCR进行确认。
不同高灵敏相机在数字PCR的使用操作区别
PCR即聚合酶链式反应，就是一种将特定的DNA片段放大扩增的分子生物学技术, 可以将微量DNA片段扩增成便于检测的海量目的基因片段，可将PCR看作是生物体外的特殊DNA复制。最传统的“第一代PCR”采用琼脂糖电泳的方法对PCR产物进行分析，但该方法操作繁琐、只适用于定性研究、交叉污染风险大。为了避免
细胞检测技术在癌症治疗中的应用
细胞检测技术在癌症治疗中的应用存在以下一些难点：肿瘤异质性：癌症通常由具有不同分子特征和表型的细胞组成，这使得通过单一的检测技术难以全面准确地描述肿瘤的特性。检测的敏感性和特异性：某些细胞检测方法可能无法检测到低水平的肿瘤细胞或标志物，或者可能出现假阳性或假阴性结果。技术复杂性和成本：一些先进的细胞
美国RainDance推出RainDrop™－数字PCR系统
2012年4月，美国RainDance Technologies公司在美国癌症研究学会（AACR）的年会上推出了RainDrop™ 数字PCR系统。这一新型系统在PCR分析的灵敏度、多重分析和绝对定量方面表现优异。RainDance Technologies公司推出的RainDrop™ 数字PC
GENEπ数字PCR技术应用教程
数字 PCR( digital PCR ，dPCR ) 下一代DNA/RNA扩增技术。原理是将一个PCR 反应体系分配到大量微小的反应单元中，在每个微反应器中包含或不包含 1 个或多个拷贝的目标核酸分子 (DNA 模板) ，进行“单分子模板”PCR 扩增。扩增结束后，通过阳性反应单元( 通过