新型AdvanceBio酰胺HILIC色谱柱,一键实现多聚糖分离分析
糖基化通常作为生物治疗药物的关键质量属性(CQA)或产品质量属性进行监测。亲水相互作用色谱(HILIC)是用于游离 N- 糖分析的主要色谱柱技术。具有复杂 N- 糖图谱的蛋白质进行 HILIC 分离分析时仍然存在技术挑战,如关键多聚糖对的共洗脱(图 1)。特别是使用荧光检测器(FLD) 时,多聚糖共洗脱会对多聚糖相对定量带来挑战,只能通过大幅延长 HILIC 梯度时间来解决。图 1. InstantPC 标记的西妥昔单抗 N-糖的 LC/FLD 色谱图 (A)。根据 MS 数据生成的提取化合物色谱图显示,荧光曲线中的其他多聚糖峰不明显 (B)▷ 通过改变流动相浓度来调节电荷基团选择性的色谱柱为了解决上述问题,安捷伦开发了新型 AdvanceBio 酰胺 HILIC 色谱柱。这款色谱柱基于酰胺键合相,同时在工艺上使得其对流动相例子强度的变化做出响应。因此可以通过调节流动相离子强度来改变带电糖型的分离和选择性(图 2)。图......阅读全文
新型-AdvanceBio-酰胺-HILIC-色谱柱,一键实现多聚糖分离分析
糖基化通常作为生物治疗药物的关键质量属性(CQA)或产品质量属性进行监测。亲水相互作用色谱(HILIC)是用于游离 N- 糖分析的主要色谱柱技术。具有复杂 N- 糖图谱的蛋白质进行 HILIC 分离分析时仍然存在技术挑战,如关键多聚糖对的共洗脱(图 1)。特别是使用荧光检测器(FLD) 时,多聚糖共
新型-AdvanceBio-酰胺-HILIC-色谱柱,一键实现多聚糖分离分析
糖基化通常作为生物治疗药物的关键质量属性(CQA)或产品质量属性进行监测。亲水相互作用色谱(HILIC)是用于游离 N- 糖分析的主要色谱柱技术。具有复杂 N- 糖图谱的蛋白质进行 HILIC 分离分析时仍然存在技术挑战,如关键多聚糖对的共洗脱(图 1)。特别是使用荧光检测器(FLD) 时,多聚糖共
进一步优化糖蛋白的糖谱分析数据质量
当前获批的生物药物中,有 60% 都是经过糖基化修饰的。糖基化是生物治疗蛋白的一种重要的翻译后修饰。N 糖的结构可能会显著影响治疗性蛋白质(如单克隆抗体(mAb)和 Fc 融合蛋白)的免疫原性、药代动力学和药效学,是公认的关键质量属性(CQA),也是生物治疗蛋白开发的关键之一。用染料标记释放的 N
ACE-HILIC色谱柱方法开发指南Ⅱ--HILIC的分离机制
HILIC分离机制HILIC是一种复杂的分离技术,通过多种相互作用模式来实现保留。这些相互作用的权重(中哪种是主要作用)是基于固定相、流动相和分析物的理化特性。为了得到可靠和稳健的HILIC方法,了解潜在的不同相互作用(了解可能存在的不同相互作用)是很有帮助的。这样可以为待进行的方法开发合理选择色谱
使用UPLC荧光/质谱法分析2AB标记的多聚糖混合物
蛋白质糖基化是生命系统非常重要的翻译后修饰之一,在免疫识别,蛋白分泌,信号转导等生命过程中发挥了重要作用。与蛋白相连的多聚糖是这些功能的重要载体,特别是对于单克隆抗体药物,多聚糖部分对药物的生物活性有着重要的影响。因此,发展分离效率高,检测灵敏度好的糖基化分析方法对单克隆抗体药物分析具有十分重要
用UPLC荧光/质谱法分析2AB标记的多聚糖混合物
蛋白质糖基化是生命系统非常重要的翻译后修饰之一,在免疫识别,蛋白分泌,信号转导等生命过程中发挥了重要作用。与蛋白相连的多聚糖是这些功能的重要载体,特别是对于单克隆抗体药物,多聚糖部分对药物的生物活性有着重要的影响。因此,发展分离效率高,检测灵敏度好的糖基化分析方法对单克隆抗体药物分析具有十分重
使用UPLC荧光/质谱法分析2AB标记的多聚糖混合物
蛋白质糖基化是生命系统非常重要的翻译后修饰之一,在免疫识别,蛋白分泌,信号转导等生命过程中发挥了重要作用。与蛋白相连的多聚糖是这些功能的重要载体,特别是对于单克隆抗体药物,多聚糖部分对药物的生物活性有着重要的影响。因此,发展分离效率高,检测灵敏度好的糖基化分析方法对单克隆抗体药物分析具有十分重要的意
使用UPLC荧光/质谱法分析2AB标记的多聚糖混合物
蛋白质糖基化是生命系统非常重要的翻译后修饰之一,在免疫识别,蛋白分泌,信号转导等生命过程中发挥了重要作用。与蛋白相连的多聚糖是这些功能的重要载体,特别是对于单克隆抗体药物,多聚糖部分对药物的生物活性有着重要的影响。因此,发展分离效率高,检测灵敏度好的糖基化分析方法对单克隆抗体药物分析具有十分重要的意
使用UPLC荧光/质谱法分析2AB标记的多聚糖混合物
蛋白质糖基化是生命系统非常重要的翻译后修饰之一,在免疫识别,蛋白分泌,信号转导等生命过程中发挥了重要作用。与蛋白相连的多聚糖是这些功能的重要载体,特别是对于单克隆抗体药物,多聚糖部分对药物的生物活性有着重要的影响。因此,发展分离效率高,检测灵敏度好的糖基化分析方法对单克隆抗体药物分析具有十分重要
hilic色谱柱的分离机理主要包括什么
hilic色谱柱的分离机理主要包括以下三个方面:(1)分配机理(2)离子交换(3)偶极-偶极相互作用。 hilic色谱柱采用了极性改性的固定相,能够在其表面形成一层富水层,从而增强了对一些强极性化合物的保留能力,有效地克服了反相色谱柱对该类化合物保留能力差的缺点。与传统的反相色谱柱不同,hilic色
GlycoWorks用于N糖分析中HILIC-SPE及IgG对照标准品(一)
目的展示GlycoWorksTM工作流程的各方面优势,包括在方法验证和故障排除中适用于不同SPE型式的灵活性以及所采用的人IgG对照标准品的可行性。 背景蛋白质的糖基化反应是十分有意义的翻译后修饰,可以调节蛋白质的结构和功能。生物治疗药物的糖基化作用无疑是必须进行彻底表征与监测的结构特征,尤其是在多
优化N糖分析的GlycoWorks工作流程
目的 展示GlycoWorksTM工作流程的各方面优势,包括在方法验证和故障排除中适用于不同SPE型式的灵活性以及所采用的人IgG对照标准品的可行性。 背景 蛋白质的糖基化反应是十分有意义的翻译后修饰,可以调节蛋白质的结构和功能。生物治疗药物的糖基化作用无疑是必须进行彻底表征与监测
沃特世HILIC糖蛋白分析柱-为生物治疗提供多聚糖占比信息
沃特世介绍了一种新型ACQUITY UPLC® BEH Amide 300Å 1.7-µm 糖蛋白分析专用柱,它可帮助生物制药公司更深入地了解他们所研发的治疗性蛋白中糖基分子的位置。精确鉴定糖基在蛋白质结构中的位置对于获得安全和有效的生物治疗性蛋白而言至关重要。 正在申请ZL的新型ACQUIT
ACE-HILIC色谱柱方法开发指南Ⅲ--HILIC法色谱条件
HILIC流动相HILIC模式中用作流动相的溶剂类似于RPLC模式下所用的溶剂。流动相条件是各种HILIC保留机制的关键因素。通过改变洗脱液中有机组分和水组分的比例,可以改变分析的保留率。在HILIC模式下,保留因子建议保持在1.5-10之间。有机改性剂HILIC中最常用的有机改性剂是非质子溶剂乙腈
“脱”颖而出-|-AdvanceBio脱盐产品重磅发布
为什么要脱盐,有什么好处?保护您的数据和质谱仪(MS)使用质谱进行完整蛋白和亚基分析时,非常希望在分析前去除不需要的成分。样品前处理不仅可用于提高数据质量,也是保护质谱仪的一种方式。非挥发性样品缓冲液会导致质谱中出现盐加合物以及分子量计算不准确。这种盐还会快速污染离子源,甚至在仪器内部中进一步降低灵
安捷伦新品AdvanceBio-Peptide-Plus色谱柱亮相慕尼黑
分析测试百科网讯 2020年11月16日,慕尼黑上海分析生化展(analytica China)在上海新国际博览中心正式开幕。安捷伦携全产品线参加本次展会。11月17日下午,安捷伦举办了“生物制药液相分析新产品、新技术讲座”,带来了关于新一代1290 Infinity II生物液相和Agilen
HILIC色谱柱的优势特点介绍
色谱柱法是指用气体作为流动相的色谱法。由于样品在气相中传递速度快,因此样品组分在流动相和固定相之间可以瞬间地达到平衡。另外加上可选作固定相的物质很多,因此HILIC色谱柱法是一个分析速度快和分离效率高的分离分析方法。近年来采用高灵敏选择性检测器,使得它又具有分析灵敏度高、应用范围广等优点。 HILI
HILIC色谱柱的维护和保养
液相色谱是样品组分在柱填料与活动相之间质量交换而达到分离的目的,因此要求活动相具备以下的特点: a、活动相对样品具有一定的溶解能力,保证样品组分不会沉淀在柱中(或长时间保存在柱中)。 b、活动相具有一定惰性,与样品不产生化学反应(特殊情况除外)。 c、活动相的黏度要尽量小,以便在使用较长的分析
ACE-HILIC色谱柱方法开发指南Ⅵ--HILIC应用实例(二)
较早洗脱峰的保留窗口(时间段)非常窄,这表示:等度HILIC可用于分离分析物。(等度方式的HILIC可以被用于分离这些化合物)10mM甲酸铵,pH3.0(溶于MeCN/H2O中)(94:6 v/v)被选为等度条件(图20)。在这些条件下,峰4和5要保留得更多(好),但峰2和3仍未解析出(被分离)。根
ACE-HILIC色谱柱方法开发指南Ⅴ--HILIC法平衡要点
HILIC法平衡时间在RPLC模式下,可再现保留所需的典型柱平衡约为10倍柱体积。图14中可清楚反映这一点但是,对于HILIC分离则不同。通常,HILIC色谱柱的平衡时间比RPLC色谱柱的更长。这是该技术的一个特点,也是可再现保留所必需的。在固定相粒子周围建立和形成稳定的水合层对可再现HILIC色谱
ACE-HILIC色谱柱方法开发指南Ⅵ--HILIC应用实例(一)
ACE HILIC法开发平台和工作实例图17显示了HILIC方法开发的流程图。一般方法是:收集分析物相关的信息(如果已知的话),针对三个ACE HILIC相(用三款不同的ACE HILIC色谱柱在不同的pH洗脱液条件下)执行梯度或等度HILIC筛选实验(取决于样本分析物的亲水性范围),然后再优化色谱
东曹参展CPHI-China-2014-推TSKgel系列色谱柱分析应用
2014年6月26日,第十四届世界制药原料展、第九届世界制药机械、包装设备与材料中国展、第二届世界医药合同定制服务中国展在上海新国际博览中心盛大开幕,吸引了汇集20多个国家和地区的2500家参展企业和近45000名海内外专业观众。东曹(上海)生物科技有限公司携TSKgel色谱柱、IC-
ACE-HILIC色谱柱方法开发指南Ⅳ--HILIC仪器兼容性
ACE HILIC色谱柱检测器兼容性HILIC是一种能很好兼容众多主流检测器的技术。因此,检测的(检测器的)选择受检测器可用性、所需的检测限制和分析物的理化特性(即:具有发色团或电荷)等综合因素的影响。 UV-Vis检测器UV-Vis检测器是分析试验室中最常见的检测器之一。根据仪器的不同,一次可记录
TSKGEL-HILIC系列色谱柱促销
为答谢广大客户平素的厚爱,TSK-GEL HILIC 系列色谱柱 ,近日起至2011年12月31日将实行半价促销 东曹(上海)生物科技有限公司 电话(Tel): 021-3461-0856 传真(Fax): 021-3461-0858 网址: www.separations.
HILIC色谱柱的四大优势
HILIC色谱柱法是指用气体作为流动相的色谱法。由于样品在气相中传递速度快,因此样品组分在流动相和固定相之间可以瞬间地达到平衡。另外加上可选作固定相的物质很多,因此HILIC色谱柱法是一个分析速度快和分离效率高的分离分析方法。近年来采用高灵敏选择性检测器,使得它又具有分析灵敏度高、应用范围广等优点。
HILIC色谱柱的清洗溶剂如何选择?
一般而言,HILIC色谱柱用淋洗液保存即可。若需要长时间保存,需要向柱内泵入3%硼酸溶液,然后取下柱子,用无孔接头将柱子两端堵死,放在通风干燥处保存。短时间不用,建议每周开机一次。 当色谱柱被玷污后,柱效会有所下降,保留时间缩小,分离度下降。清洗时,将色谱柱与抑制器分离,让废液直接排出流速不宜
HILIC模式下的色谱柱平衡操作
【ACE色谱柱】HILIC模式下的色谱柱平衡摘要 为了得到稳定及可重复的保留时间,在分析之前用流动相充分平衡HILIC柱,必须确保在固定相表面存在稳定的吸附水层。相似的,在执行一轮梯度洗脱运行后,色谱柱需要用梯度开始的条件重新平衡,形成稳定的吸附水层。 平衡 在液相色谱中,为了得到稳定及
ACE-HILIC色谱柱方法开发指南Ⅰ--HILIC的优劣势剖析
引言亲水作用色谱(HILIC)采用与反相液相色谱(RPLC)类似的洗脱液,为亲水性或极性到(至)极性很强的分析物提供了适宜的保留和分离替代方法(适宜的保留和分离提供了替代方法)。RPLC的特征在于保留较少或无保留,所以这类亲水性分析物(log P 值约为零或更小的那类分析物)的保留是一种挑战(这些亲
柱色谱分离
所用色谱管为内径均匀、下端缩口的硬质玻璃管,下端用棉花或玻璃纤维塞住,管内装有吸附剂。色谱柱的大小,吸附剂的品种和用量,以及洗脱时的流速,均按各单体中的规定。吸附剂的颗粒应尽可能保持大小均匀,以保证良好的分离效果,除另有规定外通常多采用直径为0.07-0.15mm的颗粒。吸附剂的活性或吸附力对分离效