复旦成功解析TET蛋白结构揭示发病机制重要意义
复旦大学生物医学研究院研究员徐彦辉课题组经过4年潜心研究,首次成功解析了哺乳动物骨髓造血关键蛋白TET2的三维结构。该成果对揭示疾病发病机制、开发血液肿瘤(如髓系白血病)治疗性药物等具有重要意义。12月6日,相关研究在线发表于《细胞》杂志。 哺乳动物TET蛋白家族有TET1蛋白、TET2蛋白和TET3蛋白3个成员。如果TET蛋白失去活性(丧失功能)的话,就会导致各种疾病的发生,尤其会罹患血液肿瘤。 徐彦辉课题组开展研究,获得了TET2蛋白与DNA的三维结构。利用X射线晶体学等研究方法,研究人员发现,TET2蛋白特别“聪明”,它能自动识别、找到甲基化标记,并将甲基化标记修饰过的DNA翻转到TET2蛋白内部。随后,在内部铁离子的帮助下,该蛋白发生氧化反应,将标记逐步添加至DNA甲基化标记上。 进一步研究发现,血液肿瘤患者中含有多种TET2蛋白突变,且突变率很高。研究人员认为,正是因为这些突变影响了TET2蛋白的......阅读全文
四环素控制系统诱导基因表达实验——pTettTAK-稳定转染1
为了克服用别的方法在哺乳动物细胞中诱导基因表达所遇到的困难,四环素调控的基因表达系统被发展出来。这些困难包括多向性的、非特异的作用;或诱导试剂、处理方法对细胞的毒性;高的非诱导表达背景等。本实验所描述的方法是用改造的含有转录激活因子的四环素调控系统,它能在培养的细胞和转基因小鼠(在某种程度上)中表达
RNA标记
RNA labeling (Amersham Pharmacia)For the generation of radiolabelled, single stranded RNA for use as hybridization probes 32P-pCp 3' End-labeling
DNA标记
DNA标记(主要内容如下) DNA Labeling by Nick Translation Random Primed Labeling End-Labeling Purification of Labeled DNA Non-isotopic Labeling OthersDNA L
RNA标记
RNA标记是将标记物(如放射性同位素、荧光素或酶)共价地连接到RNA,通过检测标记物,进而实现对RNA鉴别和检测的目的。RNA标记在分子探针领域应用广泛,在疾病诊断方面也很有前景。 理想的RNA标记方法应符合以下要求: 1. 操作简单,灵敏度高 2. 不影响碱基配对的特异性 3. 不影响RN
分子标记
内容:一、遗传标记 二、DNA分子标记 三、染色体原位杂交 四、DNA分子标记的应用 长期以来,植物育种中选择都是基于植株的表型性状进行的,当性状的遗传基础较为简单或即使较为复杂但表现加性基因遗传效应时,表型选择是有效的。但水稻的许多重要农艺性状为数量性状,如产量等;或多基因控制的质量性状,如抗性等
华东师范大学JBC发表表观遗传研究新成果
来自华东师范大学的研究人员在新研究中证实,Tet (Ten-Eleven Translocation)蛋白家族受到O-GlcNAc糖基转移酶(OGT)的差异调控。这一研究发现发表在1月6日的《生物化学杂志》(JBC)上。 文章的通讯作者是华东师范大学生命医学研究所的翁杰敏(Jiemin
与白血病相关的TET2基因编码功能描述
该基因编码的蛋白是一种催化甲基胞嘧啶转化为5-羟甲基胞嘧啶的甲基胞嘧啶双加氧酶。编码蛋白参与骨髓生成,该基因的缺陷与数种骨髓增生性疾病有关。该基因有两个编码不同亚型的变体。The protein encoded by this gene is a methylcytosine dioxygenase
研究表明阻断microRNAs有助于治疗血癌
一种有助于保持血液摆脱(抵抗)癌症的基因被微小的RNA片段控制,这一发现可能导致出现更好的方法来诊断血癌,甚至导致出现新的治疗形式。该研究结果于10月10日被耶鲁大学医学院研究人员证实并发表于CellReports杂志上。 在过去的几年中,研究人员已经确定TET2基因在保持血细胞健康中起到
Cell-Reports:阻断microRNAs有助于治疗血癌
10月10日,耶鲁大学医学院研究人员在Cell Reports杂志上发表文章证实:一种有助于保持血液摆脱(抵抗)癌症的基因被微小的RNA片段控制,这一发现可能导致出现更好的方法来诊断血癌,甚至导致出现新的治疗形式。 在过去的几年中,研究人员已经确定TET2基因在保持血细胞健康中起到关键
方案1-用-FLAG抗原表位标记蛋白质进行蛋白质免疫共沉淀
实验材料抗 FLAGM2 单克隆抗体293 T 细胞试剂、试剂盒抗 FLAGM2 琼脂糖亲和凝胶甘氨酸辣根过氧化物酶IEF缓冲液裂解缓冲液NaCl磷酸盐缓冲液聚乙烯亚胺RF10培养基RPMI 1640 培养基4 X SDS-PAGE 加样缓冲液叠氮化钠胰岛素仪器、耗材大型离心机配有检测 GFP 滤片
澳科学家发现兴奋剂检测新蛋白标记物
澳大利亚麦考瑞大学的科学家们发现了兴奋剂检测的新方法,这将使测出运动员是否服用违禁药物变得更加容易。 人体生长激素(HGH)被认为是使用较多的违禁药物之一,但目前的检测手段和方法难以令人满意。麦考瑞大学阿拉姆吉尔汗博士领导的团队发现,新的蛋白质可以应用在兴奋剂检测中。 阿拉姆吉尔汗在接受新华
生物物理所合作研究确定线虫脂滴的标记蛋白
4月9日,中科院生物物理研究所刘平生研究组在分子细胞蛋白质组学杂志Molecular & Cellular Proteomics在线发表题为Proteomic study and marker protein identification of caenorhabditis el
p66ShcA蛋白-乳腺癌预后的新生物标记
预测治疗后效果对医疗管理来说是至关重要的。发表在最新一期《分子与细胞生物学》上的研究报告指出,p66ShcA蛋白有望作为生物标志,用以识别预后较差的乳腺癌。 预后良好的患者可幸免进行带有严重副作用的侵入性治疗,但不对侵入性肿瘤进行侵入治疗或可导致死亡。癌症之所以致命,在很大程度上是由于其发生了
新蛋白质交联抗体的标记和修饰使用方法
介绍现在的研究中,一个大生物分子与另一个大分子的共价结合,如抗体与酶或酶与DNA的共价结合,仍是研究人员实验中的重点之一。其中有几种方法可用于交联两个生物分子。一种常见的方法是使用一种小分子交联剂(如Sulfo-SMCC)。SMCC的一端有胺反应性NHS酯基与蛋白质的游离胺(-NH2)反应,另一端有
非标记蛋白质的磷酸化作用分析实验
免疫印迹分析 化学发光法 实验材料 蛋白质样品 试剂、试剂盒
胶体金标记蛋白A技术(Protein-Agold-technique,-PAg法)1
PAg复合物制备方法简便,作为第二抗体,无种属特异性,可以免去不同种属动物要制备不同的特异性免疫球蛋白。PAg 复合物与包埋剂和细胞成分都极少发生非特异性的交互作用,蛋白A和金粒间非共价的结合特性既不影响蛋白A的活性,又能保持高度的稳定性,PAg复合物分子最小易于穿透组织。PAg复合物的原液在4
胶体金标记蛋白A技术(Protein-Agold-technique,-PAg法)2
(2)0、5mol/L,pH7.4 Tris-Hcl缓冲液:Tris,60.57g,1mol/L Hcl约420m1,调pH值至7.4,最后加双蒸水至1000m1,此为储备液。(3)0、05mo1/L Tris缓冲生理盐水:氯化钠8.5-9g;0.5mo1/L,pH7.4 Tris-Hcl缓冲液10
大连化物所开发出新型蛋白质邻近标记工具
中国科学院大连化学物理研究所研究员张丽华、赵群团队与研究员刘宇团队合作,开发出一种超光敏荧光蛋白仿生标签工具。该工具可在相变蛋白质聚集后的紧实微环境中激活光催化反应活性,实现周围互作蛋白质的化学邻近标记,以及相分离蛋白质组组分变化规律的特异性解析。相关研究成果近日发表于《先进科学》。肌萎缩性脊髓侧索
中科院、北大Cell-Research发布癌症表观遗传重要发现
来自中科院北京基因组研究所、北京大学、武汉大学等机构的研究人员证实,在肾癌中5-羟甲基胞嘧啶(5hmC)丧失与基因体(gene body)高度甲基化有关。这一研究发现发布在12月18日的《细胞研究》(Cell Research)杂志上。 中科院北京基因组研究所的慈维敏(Weimin Ci)研
联合用药治疗胸腺上皮肿瘤效果显著
近日,来自美国国家癌症中心的研究人员通过研究在I/II期临床试验中评估了药物belinostat同顺铂、多柔比星及环磷酰胺联合用于治疗胸腺上皮性肿瘤的效果,相关研究刊登于国际杂志Clinical Cancer Research上。 文章中,研究者Thomas表示,进行I/II期临床试验的目的就
张毅Cell子刊发表表观遗传学重要成果
几年前汤姆森科技信息集团旗下《科学观察》(Science Watch)评出的高影响力论文数量最多的研究人员中,哈佛大学医学院的张毅(Yi Zhang)教授成为分子生物学和遗传学领域高影响力论文的数量最多的前十位顶级科学家之一。其大量文章被Nature、Science和Cell等世界顶级生物科
发育生物学领域的基础研究取得突破性进展
TET(ten-eleven translocation)蛋白是生物体内存在的一种双加氧酶。TET蛋白家族有三个成员,分别为TET1、TET2和TET3。TET蛋白可以催化5-甲基胞嘧啶(5-mC),使其转化为5-羟甲基胞嘧啶(5-hmC),是DNA去甲基化过程中一种重要的酶,对维持干细胞的多
CMD1基因通过去甲基化调控莱茵衣藻对高光强的适应性
DNA甲基化是指DNA序列上特定的碱基通过共价键结合的方式获得一个甲基基团的化学修饰过程,是一种普遍存在于生物体的DNA修饰方式。DNA甲基化能够在不改变DNA序列的前提下改变遗传表现,是表观遗传学的核心研究领域之一。目前的研究表明,DNA甲基化与基因组印记、X染色体失活、转座因子抑制、衰老和癌
1月24日-Nature-杂志生物学精选
VTA神经元在抑郁症中所起作用 “腹侧被盖区”(VTA)中的多巴胺能神经元参与奖励处理,但也参与介导应激反应。来自Ming-Hu Han实验室和Karl Deisseroth实验室的两篇论文,揭示了专门操纵这些神经元对于由应激激发的行为的影响。Han及其同事研究了在社会挫败(一个压力非
裴端卿组综述DNA去甲基化的级联调控模型
中国科学院广州生物医药与健康研究院裴端卿课题组综合近期体细胞重编程过程中TET相关DNA去甲基化的研究进展【1】和之前的相关研究,对细胞命运变化过程中的DNA甲基化模式重排过程和级联调控模型进行了调研,提出偶联TET进行DNA去甲基化可能是转录因子打开染色质的一种基本模式,该综述以The Bat
Nature子刊揭示干细胞表观遗传调控新机制
对基因组序列略加修饰在多能干细胞转化为各种分化细胞类型中起至关重要的作用。来自德国慕尼黑大学(LMU)的一个研究小组现在鉴别出了负责一种修饰的因子。 每个细胞中都包含有存储遗传信息,这些信息编码在构成DNA的碱基序列中。然而,在特定的细胞类型中实际上只有部分的信息得到利用。碱基序列为蛋白质合成
研究揭示双加氧酶的低复杂度结构域调控DNA氧化去甲基化
《自然-结构与分子生物学》(Nature Structural & Molecular Biology)在线发表了中国科学院分子细胞科学卓越创新中心杜雅蕊/徐国良团队完成的题为Auto-suppression of Tet dioxygenases protects the mouse oocy
免疫标记技术常用的标记物介绍
常用的标记物有荧光素、酶、放射性核素及胶体金等。免疫标记技术具有快速、定性或定量甚至定位的特点,是应用最广泛的免疫学检测技术。 常用的免疫荧光素主要有: 1 .异硫氰酸荧光素 (FITC) ,最大吸收光谱为 490~495nm ,最大发射光谱为 520~530nm ,呈黄绿色荧光。 2 .
遗传发育所揭示黑色素瘤转移机制
上皮间质转化(Epithelial Mesenchymal Transition,EMT)描述了上皮来源的细胞通过特定程序转变成间充质样细胞的过程。EMT的发生是肿瘤转移的重要过程。恶性黑色素瘤是起源于黑色素细胞的一种恶性肿瘤,虽然并非上皮肿瘤,其发展过程中表现出很多类似EMT的特征。TET(T
Cell:维生素C真的可以抗白血病
维生素C是人体必需的营养素,我们可通过食用新鲜蔬菜和水果轻松补充维生素C。维生素C对人体有多种好处,而其在抗肿瘤中的作用,自上世纪70年代发现以来,受到了广泛的关注,被认为在肿瘤的临床治疗中具有广阔的前景【1】。然而,在之后的临床试验中,高剂量的维生素C并没有展示出治疗益处。这可能是由于口服维生