蛋白质研究国家重大科学研究计划项目在京启动
——“‘先天免疫相关蛋白质复合物结构与功能的研究’项目部署会在北京召开” 3月27日，蛋白质研究国家重大科学研究计划“先天免疫相关蛋白质复合物结构与功能的研究”项目部署会在北京召开。项目首席科学家清华大学柴继杰教授介绍了项目的总体情况、整体研究目标和课题间的相互衔接和依托关系，并就项目管理、经费使用、课题和单位间的协作互动等提出了具体要求，各课题负责人介绍了课题的准备情况，项目研究团队交流了项目和课题的研究内容和方案，与会专家进行了深入的讨论，提出了许多针对性的建议。 国家重大科学研究计划项目“先天免疫相关蛋白质复合物结构与功能的研究”围绕“先天免疫分子识别、信号转导及其调控的分子机制”这一关键科学问题，运用结构生物学、生物化学、遗传学和细胞生物学等研究手段，阐明先天免疫的识别机制和免疫应答的转录调控机制，寻找新型病原体模式识别受体、信......阅读全文
蛋白质间相互作用研究方法：免疫共沉淀
相互作用在生理上的证实和探索l 通过免疫共沉淀确定结合蛋白1．用磷酸盐缓冲液洗30块10 cm培养板上的适宜细胞。刮去每块板上的细胞到1 ml冰冷的EBC裂解缓冲液中。2．将每毫升细胞悬液转移到微量离心管中，在微量离心机上4℃以最大速度离心15 min。3．收集上清（约30 ml）并加入3
蛋白质间相互作用研究方法2：免疫共沉淀
相互作用在生理上的证实和探索l 通过免疫共沉淀确定结合蛋白1．用磷酸盐缓冲液洗30块10 cm培养板上的适宜细胞。刮去每块板上的细胞到1 ml冰冷的EBC裂解缓冲液中。2．将每毫升细胞悬液转移到微量离心管中，在微量离心机上4℃以最大速度离心15 min。3．收集上清（约30 ml）并加入3
蛋白质免疫印迹实验
实验步骤 操作流程(1)制备与凝胶大小一致的硝酸纤维素膜一张，吸水滤纸 2 张 (Whatman 3 MM)。(2) 将凝胶在转印缓冲液中浸泡 30m in，将转移膜、滤纸和海绵垫也在同样的缓冲液浸湿。(3) 安装转印「夹心三明治」。将凝胶放置在玻璃平板上，然后将一张浸湿的滤纸放在凝胶上，如
蛋白质免疫印迹实验
蛋白质免疫印迹实验 实验步骤 操作流程 (1)制备与凝胶大小一致的硝酸纤维素膜一张，吸水滤纸 2 张
蛋白质免疫印迹技术
实验概要免疫印迹是利用聚丙烯酰胺凝胶电泳来检测样品或提取物中某种特定蛋白的方法。聚丙烯酰胺凝胶紧贴着膜放置，在电流的作用下蛋白质从凝胶迁移到膜上并且被固定，常用的膜是硝酸纤维素或 PVDF（聚偏乙烯氟化物）。膜是凝胶蛋白质的复制品，然后可以与抗体结合后进行染色。实验步骤1. 样品准备1) 抽
蛋白质免疫印迹实验
这是一个建立在 B urnette 实验方案基础上的实验流程，小于 80k D a 的蛋白质的转移效果很好并且结果稳定, 重复性好。应用这种膜转移方法，我们利用多克隆抗体在下面的样本中检测目的蛋白：哺乳动物细胞和细菌溶解产物、细胞培养上清、组织提取物以及组织液。虽然下列实验条件是根据我们自己的实验需
先天免疫相关蛋白质复合物结构与功能研究计划启动
3月27日，蛋白质研究国家重大科学研究计划“先天免疫相关蛋白质复合物结构与功能的研究”项目部署会在北京召开。项目首席科学家清华大学柴继杰教授介绍了项目的总体情况、整体研究目标和课题间的相互衔接和依托关系，并就项目管理、经费使用、课题和单位间的协作互动等提出了具体要求，各课题负责人介绍了课题的准备
体内甲醛交联及染色质免疫沉淀研究DNA和蛋白质作用
染色质由真核基因组包装而成，它参与了转录、复制、重组、修复等许多以DNA一蛋白质相互作用为基础的生化过程。研究者感兴趣的是这些过程涉及到哪些特异的基因或DNA序列,有哪些蛋白质参与。尽管有许多人对染色质进行分类,就像Holde将其分为转录活性或非活性位点,但染色质构本身是动态的,并且DNA与非组蛋白
蛋白质（十二）相关研究
相关研究延长寿命据国外媒体11日报道，一项开创性研究可能成为老年人长寿和保持健康的关键。美国研究人员发现一种名为SIRT1的蛋白质。它不仅可以延长老鼠寿命，还能推迟和健康有关的发病年龄。另外，它还改善老鼠的总体健康，降低胆固醇水平，甚至预防糖尿病。研究人员表示，虽然这项研究是在老鼠身上进行的，但它有
蛋白质（十五）主要研究
主要研究历史在18世纪，安东尼奥·弗朗索瓦（Antoine Fourcroy）和其他一些研究者发现蛋白质是一类独特的生物分子，他们发现用酸处理一些分子能够使其凝结或絮凝。当时他们注意到的例子有来自蛋清、血液、血清白蛋白、纤维素和小麦面筋里的蛋白质。荷兰化学家格利特·马尔德（Gerhardus Joh
蛋白质组研究系统
4700 TOF/TOF蛋白质组分析系统4700TOF/TOF蛋白质组分析系统是全球第一台TOF/TOF 串联飞行质谱仪，它作为目前的最新质谱技术，它一问世即被世界各大蛋白组研究中心和著名蛋白质实验室所争相采用。它由两级TOF和高能碰撞池组成，其工作原理是离子在MALDI源中产生并被加速和聚焦；对于
蛋白质的研究方法
蛋白质是被研究得最多的一类生物分子，对它们的研究包括“体内”(in vivo)、“体外”(in vitro)、和“在计算机中”(in silico)。体外研究多应用于纯化后的蛋白质，将它们置于可控制的环境中，以期获得它们的功能信息；例如，酶动力学相关的研究可以揭示酶催化反应的化学机制和与不同底
蛋白质与免疫亲和介质结合实验
仪器、耗材 SDS-PAGE 电泳装置 聚丙烯酰胺小胶实验步骤 材料与设备SDS-PAGE 电泳装置聚丙烯酰胺小胶（10%)操作程序1) 将溶解、稀释的 AMS 沉淀物和洗过的免疫亲和介质混合后，于 0、5、15 和 30 min 各取样 100-ul。2) 立即离心样品，留上清，供 SDS-PAG
免疫染色法检定蛋白质
实验概要转印到纸上的蛋白质抗原，可与其专一性抗体结合，再以二次抗体-酶结合体(2nd Ab-HRP) 或Protein A-HRP 呈色；可在一群转印色带中，专一性地挑出目标蛋白质，是最有用的检定工具。主要试剂1. 抗体溶液：可用传统抗血清或单株抗体，其最适使用浓度，随抗体效价不同而异，以下为一般适
蛋白质与免疫亲和介质结合实验
材料与设备SDS-PAGE 电泳装置聚丙烯酰胺小胶（10%)操作程序1) 将溶解、稀释的 AMS 沉淀物和洗过的免疫亲和介质混合后，于 0、5、15 和 30 min 各取样 100-ul。2) 立即离心样品，留上清，供 SDS-PAGE 电泳分析，测
蛋白质工程拓展免疫细胞语言
根据世界卫生组织统计，每年约600万人死于败血症，这些数字令人担忧。这种俗称“血液中毒”的疾病通常始于无害的感染。 一旦触发免疫系统过度反应，自身组织就会受到攻击和损伤。过度反应最终会导致危及生命的防御系统全面崩溃。仅在德国，死于败血症的人数就超过了艾滋病、结肠癌和乳腺癌的总和！ 世界各地的
蛋白质免疫印迹（Western－Blot－）（二）
二、蛋白样品制备 1. 单层贴壁细胞总蛋白的提取 （1） 倒掉培养液，并将瓶倒扣在吸水纸上使吸水纸吸干培养液（或将瓶直立放置一会儿使残余培养液流到瓶底然后再用移液器将其吸走）。 （2） 每瓶细胞加3 ml 4℃预冷的PBS（0.01M pH7.2～7.3）。平放轻轻摇动1 min洗涤细胞，然后弃
蛋白质免疫印迹（Western－Blot，WB－）
实验方法原理 Western免疫印迹（Western Blot）是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测的方法。对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测。与Southern或Northern杂交方法类似，但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺
免疫染色法检定蛋白质
实验概要转印到纸上的蛋白质抗原，可与其专一性抗体结合，再以二次抗体-酶结合体(2nd Ab-HRP) 或Protein A-HRP 呈色；可在一群转印色带中，专一性地挑出目标蛋白质，是最有用的检定工具。主要试剂1. 抗体溶液：可用传统抗血清或单株抗体，其最适使用浓度，随抗体效价不同而异，以下为一般适
蛋白质与免疫亲和介质结合实验
仪器、耗材SDS-PAGE 电泳装置 聚丙烯酰胺小胶实验步骤材料与设备SDS-PAGE 电泳装置聚丙烯酰胺小胶（10%)操作程序1) 将溶解、稀释的 AMS 沉淀物和洗过的免疫亲和介质混合后，于 0、5、15 和 30 min 各取样 100-ul。2) 立即离心样品，留上清，供 SDS-PAGE
蛋白质分离和分析——免疫沉淀
实验步骤 基 本 方 案 1 用非变性去垢剂裂解细胞制成的悬液进行免疫沉淀材 料未标记或标记的细胞悬液P B S ，冰预冷非变性裂解缓冲液，冰预冷5 0 % (V A O protein A-Sepharose 填 料（Sigma， Amersham Pharmacia Biotech)保存于含 0
蛋白质免疫印迹（Western－Blot，WB－）
实验方法原理 Western免疫印迹，是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测的方法。对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测。 与Southern或Northern杂交方法类似，但We
蛋白质免疫印迹（Western－Blot－）（一）
蛋白质免疫印迹（Western Blot ）可以：（1）从蛋白质混合物中检出目标蛋白质；（2）定量或定性确定细胞或组织中蛋白质的表达情况；（3）用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA、蛋白质-RNA相互作用后续分析。实验方法底物化学发光ECL法Western印迹法图解实验方法原理Western免疫印迹（
蛋白质免疫印迹（Western－Blot，WB－）
蛋白质免疫印迹（Western Blot ） 可以：（1）从蛋白质混合物中检出目标蛋白质；（2）定量或定性确定细胞或组织中蛋白质的表达情况；（3）用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA、蛋白质-RNA相互作用后续分析。实验方法原理： Western免疫印迹（Western Blot）是将蛋白
蛋白质免疫印迹（Western－Blot－）（三）
四、SDS－PAGE电泳 1. 清洗玻璃板 一只手扣紧玻璃板，另一只手蘸点洗衣粉轻轻擦洗。两面都擦洗过后用自来水冲，再用蒸馏水冲洗干净后立在筐里晾干。 2. 灌胶与上样 （1）玻璃板对齐后放入夹中卡紧。然后垂直卡在架子上准备灌胶。（操作时要使两玻璃对齐，以免漏胶。） （2）按前面方法配10%分离
免疫方向研究思路
在“蛋白组学在临床科研中的应用”这一系列的文章中，我们分享了眼科、内分泌、心血管、神经等方面的研究思路。今天我们来介绍一个非常重要的，并且离不开蛋白质组学研究的一个学科——免疫方向的科研套路，哦不，是思路。话不多说，满满干货！ 第一篇， 强直性脊椎炎杂志：Cts-Clin Transl S
免疫印迹与免疫检测实验——转移槽转印蛋白质
实验材料蛋白质试剂、试剂盒转移缓冲液仪器、耗材摇床海绵纤维素膜尼龙膜电转仪实验步骤1. 制备抗原样品，并用小型或标准尺寸的单向或双向凝胶分离蛋白，在一个或多个泳道中分离预染色或生物素酰化的蛋白质分子量标准。2. 电泳完成后，拆卸凝胶夹层，去除积层胶。以适量的转移缓冲液室温平衡凝胶30 min。3
日发现植物免疫系统关键蛋白质
日本科学家近日发现，水稻体内有一种名为“抵抗性蛋白质”的物质，是其免疫系统的关键。这一研究成果已经刊登在最新一期美国《科学》杂志网络版上。 日本奈良尖端科学技术大学院大学植物分子遗传学教授岛本功率领的研究小组，利用水稻对比研究发现，一种名为“抵抗性蛋白质”的物质一旦察觉到植
免疫沉淀法浓缩蛋白质实验
实验方法原理 通过免疫沉淀，用蛋白质特异性抗体能够定量分离目的蛋白。免疫沉淀法由三个步骤组成。首先将特异性抗体加入细胞提取物，第二步加入经化学固定的金黄色葡萄球菌，以确保形成大量沉淀。这些细菌通过蛋白质 A 和抗体形成复合物，蛋白质 A 与免疫球蛋白的 Fe 部分有高度的亲和性。或者说，纯化的蛋
免疫沉淀法浓缩蛋白质实验
实验方法原理通过免疫沉淀，用蛋白质特异性抗体能够定量分离目的蛋白。免疫沉淀法由三个步骤组成。首先将特异性抗体加入细胞提取物，第二步加入经化学固定的金黄色葡萄球菌，以确保形成大量沉淀。这些细菌通过蛋白质 A 和抗体形成复合物，蛋白质 A 与免疫球蛋白的 Fe 部分有高度的亲和性。或者说，纯化的蛋白质