深圳罗湖首次截获人体组织DNA片段

深圳市出入境检验检疫局罗湖局日前在一名旅客携带入境行李中截获人体组织DNA片段,这是罗湖口岸首次截获该类物品。 据相关工作人员介绍,当日在该旅客行李中发现一批离心管样品,共36支。经查,该批样品为人体组织DNA片段,用离心管装载并包裹于牛皮纸盒中放置于填充干冰的保温箱内,离心管及纸盒外无任何标识,只有离心管管口注明了样品编号。 据悉,当事旅客称该批人体组织DNA片段样品系朋友所托携带入境,用于某科研公司的DNA测序,以应用于癌症方面的科研,不清楚卫生检疫审批相关要求。提供的该样品相关说明文件指出,该批人体组织DNA片段样品来源于“新加坡国立癌症中心”,是非感染者的DNA片段,仅作医学科研用途;每支离心管均有自己的标识号码,对应文件中的相应编码注明了样品的浓度、碱基对数量等资料。 由于人体组织DNA样品未取得《入/出境特殊物品卫生检疫审批单》,现场工作人员将其依法截留并作进一步调查处理。......阅读全文

准备插入片段实验

试剂、试剂盒 缓冲液、溶液和试剂酶和酶缓冲液核酸和寡核苷酸仪器、耗材 专用设备实验步骤 第 1 阶段:DNA 引物的激酶处理研究表明很多种 DNA 聚合酶(比如,T7、修饰过的 T7、Taq、Vent、Tth 和 Klenow)具有脱氧核苷酸末端转移酶(Tdt) 活性(Clark1988;H

准备插入片段实验

试剂、试剂盒缓冲液、溶液和试剂酶和酶缓冲液核酸和寡核苷酸仪器、耗材专用设备实验步骤第 1 阶段:DNA 引物的激酶处理研究表明很多种 DNA 聚合酶(比如,T7、修饰过的 T7、Taq、Vent、Tth 和 Klenow)具有脱氧核苷酸末端转移酶(Tdt) 活性(Clark1988;Hu1993)。

冈崎片段的概念

冈崎片段:相对比较短的DNA链(大约1000核苷酸残基),是在DNA的后随链的不连续合成期间生成的片段,这是ReijiOkazaki在DNA合成实验中添加放射性的脱氧核苷酸前体观察到的。DNA复制过程中,2条新生链都只能从5'端向3'端延伸,前导链连续合成,后随链分段合成。这些分段合

准备插入片段实验

            试剂、试剂盒 缓冲液、溶液和试剂 酶和酶缓冲液 核酸和寡核苷酸 仪器、耗材 专用设备

细胞化学词汇冈崎片段

冈崎片段是相对较短的DNA核苷酸序列(真核生物中大约有150到200个碱基对长),它们的合成是不连续的,并随后通过DNA连接酶连接在一起,形成DNA复制过程中的滞后链。冈崎片段是20世纪60年代两位日本分子生物学家、名古屋大学的一对校友夫妇冈崎令治和冈崎恒子共同发现的。

细胞化学词汇插入片段

将一段DNA序列载入到细菌质粒中,这一段被整合的序列被称为插入片段。

DNA片段的连接技术

一、目的与原理DNA酶切片段的联接是两DNA片段相邻的5‘磷酸和3’羟基间可有连接酶催化形成磷酸二酯键,这个连接反应在体外一般都有大肠杆菌DNA连接酶和T4DNA连接酶催化,但是分子生物学试验中主要采用T4DNA连接酶,因该酶在正常条件下,即能完成连接反应。本实验拟通过T4DNA连接酶对酶切片断的连

抗体分子的水解片段

  在一定条件下,Ig分子肽链的某些部分易被蛋白酶水解为不同片段。木瓜蛋白酶(papain)和胃蛋白酶(pepsin)是最常用的两种Ig蛋白水解酶,并可籍此研究Ig的结构和功能,分离和纯化特定的12多肽片段。[2]  (一) 木瓜蛋白酶水解片段  木瓜蛋白酶水解Ig的部位是在铰链区二硫键连接的两条重

DNA片段回收与纯化

    质粒、噬菌体等经酶切,电泳;PCR产物经电泳后,常常需要对一些DNA电泳片段进行回收和纯化,用于亚克隆、探针标记等。DNA回收和纯化常用方法有压碎法、低融点琼脂糖法、冻融法等,也有现成的试剂盒供应。一、冻融法1.  紫外灯下仔细切下含待回收DNA的胶条,将切下的胶条(小于0.6g)捣碎,置于

抗体分子的水解片段

在一定条件下,Ig分子肽链的某些部分易被蛋白酶水解为不同片段。木瓜蛋白酶(papain)和胃蛋白酶(pepsin)是最常用的两种Ig蛋白水解酶,并可籍此研究Ig的结构和功能,分离和纯化特定的12多肽片段。(一) 木瓜蛋白酶水解片段木瓜蛋白酶水解Ig的部位是在铰链区二硫键连接的两条重链的近N端,可将I

DNA片段的回收实验

实验方法原理 本方法特别适合于PCR片段的回收,具有纯度高、操作简洁等特点,经此方法回收的片段可有效的用于重组载体构建。通过15分钟的纯化过程,PCR产物即能被有效地从含引物二聚体、非特异性扩增引物片断等混合物中分离出来,成为高度无盐的、不含其他大分子成分的纯化片断。在较宽的分子量范围内有较高的回收

RNAi片段siRNA设计原则

RNAi target selection rules:Targeted regions on the cDNA sequence of a targeted gene should be located 50-100 nt downstream of the start codon (ATG).S

DNA片段的制备方法

常用以下方法获得DNA片段:①用限制性核酸内切酶将高分子量DNA切成一定大小的DNA片段;②用物理方法(如超声波)取得DNA随机片段;③在已知蛋白质的氨基酸顺序情况下,用人工方法合成对应的基因片段;④从mRNA反转录产生cDNA。

DNA片段的回收实验

树脂回收法 微量柱法 液氮冻融法 常规方法             实验方法原理 本方法特别适合于PCR片段的回收,具有纯度高、操作简洁等特点,经此方法

微量柱法纯化DNA片段

实验概要目的DNA片段的回收技术是重组DNA中的关键技术,回收是指从电泳介质中纯化出目的片断。目前待回收的片断主要有酶切片断和各种PCR片断;回收的介质主要有琼脂糖和PAGE;回收的方法主要有树脂回收、微量柱回收、玻璃奶回收、液氮冻冻融回收及透析袋大量回收等,下面分别介绍树脂、微量柱及液氮冻冻融回收

大片段的精确扩增实验

试剂、试剂盒 甜菜碱PCR 反应缓冲液TEN+BSA酶和酶缓冲液核酸及引物仪器、耗材 PCR 仪实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂灭菌水配制的下列试剂,储存在指定的温度条件下。(1) 5mol/L 甜菜碱(SigmaB-2629 或 SigmaB-2754)过滤灭菌,室溫保存。(2) 10X

大片段的精确扩增实验

            试剂、试剂盒 甜菜碱 PCR 反应缓冲液 TEN+BSA 酶和酶缓冲液 核酸及引物 仪器、耗材

DNA片段的亚克隆实验

实验材料 DNA试剂、试剂盒 CIPdNTPDNA聚合酶T4聚合酶DTTATP仪器、耗材 水浴锅电泳仪培养箱实验步骤 1.  在20 μl 反应体积内用合适的酶完全消化DNA。75℃加热15 min,灭活酶。如若无需进一步的酶促处理,接歩骤6。2.  如果5’磷酸需要去除,加入2 μl 10×CIP

冻融法回收DNA片段

            实验方法原理 冻融法是指采用反复冷冻与融化时由于细胞中形成了冰晶及剩余液体中盐浓度的增高可以使细胞破裂。这种方法简单方便,但要注意那些对温度变化敏感的蛋白质不宜采用此法。  实验材料

冻融法回收DNA片段

冻融法回收DNA片段可用于:(1)获取纯化的DNA片段;(2)回收PCR产物。实验方法原理冻融法是指采用反复冷冻与融化时由于细胞中形成了冰晶及剩余液体中盐浓度的增高可以使细胞破裂。这种方法简单方便,但要注意那些对温度变化敏感的蛋白质不宜采用此法。 实验材料DNA胶条试剂、试剂盒Tris-HCl饱和酚

PCR扩增分离目的DNA片段

一、目的了解多聚合酶链反应DNA 扩增技术的基本原理和实验应用,掌握PCR反应基本技术。二、原理PCR(Polymerase Chain Reaction)即聚合酶链式反应是1986 年由Kallis Mullis 发现。这项技术已广泛地应用于分子生物学各个领域,它不仅可用于基因分离克隆和核酸序列分

DNA片段探针的应用实验

实验材料 DNA试剂、试剂盒 杂交液洗膜液仪器、耗材 注射器超声仪水浴锅实验步骤 1.  用5~20 ml 杂交液Ⅰ依次浸泡10~20张硝酸纤维素滤膜。滤膜装入杂交袋中,加入足够的杂交液,密封后42℃预杂交1 h。 2.  往带螺盖的试管中,加入放射性探针和2 mg 超声波处理的鲱鱼精DNA,煮沸1

大片段的精确扩增实验

用 10 对不同的引物扩增约 5kb 的片段,模板 DNA 是一样的,反应体系是 50ul, 对照中未加模板,含有单一引物。对于循环数较多(25〜40) 的反应,一般应设置一个没有模板或单引物对照。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。试剂、试剂盒甜菜碱PCR 反应缓冲液TE

目的基因片段与载体连接

1.目的学会DNA片段的体外连接技术。2.原理在Mg2+和ATP存在下,T4 DNA连接酶能催化载体分子的粘性末端与外源DNA的相同粘性末端联接成重组DNA分子。3.器材旋涡混合器,微量移液取样器,移液器吸头,1.5ml 微量离心管,双面微量离心管架,台式离心机,干式恒温气浴。易生物仪器库:http

DNA片段的亚克隆实验

基本方案 凝胶块中DNA连接             实验材料 DNA 试剂、试剂盒

DNA小片段的纯化回收

DNA 电泳小于100bp的片断通常在电泳时就比较难观察分辨,需要用分辨率很高的琼脂糖或者丙烯酰胺凝胶。比如Cambrex的NuSieve 3:1或者GTG,或者是大名鼎鼎的MetaPhor琼脂糖。所以实际上对于小片断,可以分为两种情况:一个是真的要回收电泳中特别小的片断,这种情况我们前面有提到,比

大片段PCR的注意点

在实验室使用PCR仪进行PCR时,遇到3-5kb以上的大片段DNA时,许多同学的扩增结果往往出现假阴性,条带模糊等不理想的情况。那么对于大片段的DNA进行PCR时要注意哪些?怎样才能得到理想的结果呢?主要从以下方面入手更正:1,确定反应体系各组分的量是否足够(如引物量、模板量,镁离子量等);2,确定

DNA片段探针的应用实验

甲酰胺法 水溶液中杂交             实验材料 DNA 试剂、试剂盒

目的基因片段与载体连接

实验概要本实验介绍了目的基因片段与载体连接的操作步骤,有助于学会DNA片段的体外连接技术。实验原理在Mg2 和ATP存在下,T4 DNA连接酶能催化载体分子的粘性末端与外源DNA的相同粘性末端联接成重组DNA分子。主要试剂1. T4 DNA 连接酶2. 连接酶缓冲液3. 无菌ddH2O主要设备1.

冈崎片段的研究与发展

冈崎片段是相对较短的DNA核苷酸序列(真核生物中大约有150到200个碱基对长),它们的合成是不连续的,并随后通过DNA连接酶连接在一起,形成DNA复制过程中的滞后链。冈崎片段是20世纪60年代两位日本分子生物学家、名古屋大学的一对校友夫妇冈崎令治和冈崎恒子共同发现的。