细胞培养大攻略2

26、PFHM-II 和HYBRIDOMA-SFM之间有什么差别? PFHM-II (Protein-free Hybridoma Medium)是不包含有蛋白质的单克隆抗体生产培养基。如果作为杂交瘤生产培养基使用,PFHM-II可能需要补充低水平的血清。HYBRIDOMA-SFM即是杂交瘤生产培养基,也是单克隆抗体生产培养基。它包含低水平的蛋白质。 27、在High Five无血清培养基中去污剂的浓度是多少? High Five无血清培养基中去污剂的浓度:0.025 g/L Tween-80,1.0 g/L Pluronic Poly-all。 28、High Five细胞用多大的密度冻存? 3.0x106 cells/ml 29、在我的果蝇培养基中发现形成白色沉淀,加热后溶解。它是什么?对我的细胞有害吗? 可能是谷氨酰胺沉淀,但是更可能是L-酪氨酸沉淀。培养基中谷氨酰胺的浓度比典型的2 mM高6倍。酪氨......阅读全文

细胞培养大攻略2

26、PFHM-II 和HYBRIDOMA-SFM之间有什么差别? PFHM-II (Protein-free Hybridoma Medium)是不包含有蛋白质的单克隆抗体生产培养基。如果作为杂交瘤生产培养基使用,PFHM-II可能需要补充低水平的血清。HYBRIDOMA-SFM即是杂交瘤生产培养

细胞培养大攻略

一、细胞培养基础和步骤细胞培养基大全细胞原代培养步骤细胞传代培养步骤二、细胞培养常见问答1、加到培养基中的血清 必须灭活吗?答:不是必须的,看做什么实验了。2、四季青胎牛血清灭活是56 ℃30分钟吗?答:如果用于培养大多数的肿瘤细胞,血清一般是不需要灭活的,这样可以有效保存血清中的生长因子 。但是如

细胞培养大攻略9

85、培养液出现沉淀,但pH值不变 可能原因 (1)洗涤剂清洗后残留有磷酸盐,将培养基成分沉淀下来。 (2)冰冻保存培养液。 建议解决方法 (1)用去离子水反复冲洗玻璃器皿,然后灭菌。 (2)将培养液加热到37℃,摇动使其溶解如沉淀仍然存在,丢弃培养液。 86、培养液出现沉淀, 同时pH 发生变化 

细胞培养大攻略7

62、贮存在冰箱中的瓶口已开的培养基,在放置几天后颜色变紫? 这主要是由于在暴露到周围的CO2水平时,碳酸氢纳导致了pH值的上升。您可以在使用前松开瓶口,在CO2培养箱孵育培养基10-15分钟,来校正溶液的pH值(确定松开瓶口以保证气体交换)。 63、 细胞培养基偶然被冻,可否继续使用? 如果细胞培

细胞培养大攻略6

44、细胞冷冻管解冻培养时, 是否应马上去除DMSO? 除少数特别注明对DMSO 敏感之细胞外, 绝大部分细胞株(包括悬浮性细胞), 在解冻之后, 应直接放入含有10-15 ml新鲜培养基之培养角瓶中, 待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附之问题。 

细胞培养大攻略8

79、细胞传代消化时所用胰酶浓度越高越好吗? 不见得!因为胰蛋白酶溶液的消化能力是和溶液的pH、温度、胰酶浓度及溶液中是否含有Ca++, Mg++离子和血清等因素有关。通常情况下,pH 8.0 , 温度 37℃其作用能力最强。另外,钙、镁离子及血清均能大大降低其消化能力。我们每次进行传代消化前,一定

细胞培养大攻略4

10、为什么培养基中可以省去加酚红?   酚红在培养基中被用来作为PH值的指示剂:中性时为红色,酸性时为黄色,碱性时为紫色。研究表明,酚红可以模拟固醇类激素的作用(特别是雌激素)。为避免固醇类反应,培养细胞,尤其是哺乳类细胞时,用不加酚红的培养基。由于酚红干扰检测,一些研究人员在做流式细胞检测时,不

细胞培养大攻略3

70、 血清解冻后发现有絮状沉淀物出现,该如何处理?血清中沉淀物的出现有许多种原因,但最普遍的原因是由于血清中脂蛋白的变性所造成,而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解冻后,也会存在于血清中,亦是造成沉淀物的原因之一。但这些絮状沉淀物,并不影响血清本身的质量。 若欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清

细胞培养大攻略5

24、昆虫细胞培养的最适PH值和渗透压是多少?   生长培养基的PH值对细胞的增值和病毒或重组蛋白的生产均会产生影响。对于大部分鳞翅类昆虫细胞系,在PH值 6.0-6.4范围的大部分应用效果良好。培养鳞翅类昆虫细胞系时,培养基的最适渗透压是 345-380 mOsm/kg.。为保证可靠和持久的细胞培

PCR技术大攻略

一、PCR技术及步骤聚合酶链式反应(PCR)PCR扩增产物的克隆上述两个实验包含基本原理、步骤、问题等。二、PCR常见问题汇总1. 没有得到扩增产物 (1)酶失活或在反应体系中未加入酶。Taq DNA聚合酶因保存或运输不当而失活,往往通过更换新酶或用另一来源的酶以获得满意的结果。 (2)模板含有杂质

细胞培养攻略:细节决定成败

  培养细胞就像养育BABY一样,要精心照料,用心呵护。最好每天都去看看它们,满足它们所需要的物质需求,防止出现培养箱缺水、二氧化碳不足、温度不够等各种小意外,还要注意很多小细节,以免开展重复的实验导致不必要的人力物力浪费。  那培养细胞都要注意哪些小细节呢?就让我们一起来看看吧!  1.细胞生长的

细胞培养攻略:细节决定成败

培养细胞就像养育BABY一样,要精心照料,用心呵护。-好每天都去看看它们,满足它们所需要的物质需求,防止出现培养箱缺水、二氧化碳不足、温度不够等各种小意外,还要注意很多小细节,以免开展重复的实验导致不必要的人力物力浪费。 那培养细胞都要注意哪些小细节呢?就让我们一起来看看吧! 1.细胞生长的营养来源

IHC全攻略2:如何制备样品

  对于每一项IHC/ICC研究,组织和细胞样本的制备都不可掉以轻心。为了方便孵育,整个组织必须被切成超薄(5-10 μm)的切片,或切成小块用于整体免疫组化(whole mount IHC)。对于ICC实验,在开始染色步骤之前,细胞必须附着在显微镜载玻片或盖玻片上。样本制备也与固定方法密切

CCL2-ELISA试剂盒选择攻略

趋化因子配体2(CCL2),又名单核细胞趋化蛋白 1 (MCP-1),是 CC 趋化因子家族的小分子量细胞因子。CCL2 通过蛋白聚糖的粘多糖侧链锚定到内皮细胞的质膜上,主要由单核细胞、巨噬细胞和树突状细胞分泌。CCL2 可招募单核细胞、记忆性 T 细胞和树突状细胞到组织损伤或感染引起的炎症

细胞培养技术2

◇湿热消毒的注意事项①不可用安全阀摘子排气。②消毒的过程中若出现漏气现象,可调节消毒器盖内的胶垫的位置。③灭菌完毕,不要急于取出消毒品,可利用消毒器的余热去除物品部分湿气,待半小时左右再移入干燥箱烘干。2.干热消毒  这种消毒方法主要用于玻璃器皿消毒,一般温度在160℃维持90—120分钟就可以杀死

细胞培养生化分析仪选型攻略及福利

背景:在生物制药行业,细胞培养操作在确定整个生产过程中起着至关重要的作用。在过去几十年中,该行业在从补料分批培养中获得更高的产品效价方面取得了很大的进展。细胞生产的蛋白质类产品的产量都已达克级有的甚至可达10克级,比80年代中期提高了100多倍,用于治疗各种疾病的生物产品的种类也越来越多,这些成果的

人单核细胞白血病(THP1)细胞培养攻略

THP-1细胞系是1980年Tsuchiya等人建立的人单核细胞白血病细胞系。它来自一位急性单核细胞白血病患者的血液,有分化为多种巨噬细胞的能力,是各领域研究常用的细胞系之一。THP-1是人外周血的单核细胞系,最初来源于急性单核细胞性白血病患者。属于悬浮细胞,适合用于转染或感染实验。其表面抗原HLA

家庭生活五大攻略-轻松搞定垃圾分类

  垃圾是放错地方资源的理念,所有的垃圾只要合理的分类收集,分类处理,都将转化为资源。  对于家庭来说,合理的分类回收,不仅能减少垃圾排放,还能通过垃圾分类使之重新变成资源。今天就为大家介绍几个家庭垃圾分类的处理办法,让环保的可持续理念从家居生活的点滴开始。  攻略一:居室空间充足的

细胞攻略-|-PK15(猪肾细胞)细胞培养教程(尚恩生物)

▲细胞正常生长形态照片细胞名称:PK-15(猪肾细胞)细胞别称: PK(15); PK (15); PK 15; PK15; Porcine Kidney-15细胞货号: SNL-131生长特性: 贴壁培养条件: DMEM+10% FBS+1% P/S培养环境: 空气,95%;二氧化碳 (CO2),

企业“走出去”如何走得稳?专家列举7大攻略

  日前,全球化智库(CCG)发布《中国企业全球化报告》称,2016年中国企业对外直接投资达1830亿美元,位居全球第二大对外投资国。2017年随着国家对海外投资的国有企业审核进一步加强,民营企业的投资额将有望超过国企,成为“走出去”的主要力量。日前,政商学界人士在第四届中国企业全球化论坛上畅谈“走

2A1细胞培养操作

1)复苏细胞:将含有 1mL2A1细胞。悬液的冻存管在  37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL  培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 250px 皿中,加入约 8m

WML2细胞培养操作

1)复苏细胞:将含有 1mLWML2细胞。悬液的冻存管在  37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL  培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 250px 皿中,加入约 8

各类上皮细胞培养2

6)毛细血管内皮细胞培养 肿瘤条件培养基制备: 1.取C3H 小鼠的S-180 实体肉瘤组织。 2.胰蛋白酶消化,Dulbecco 改良Eagle 氏培养液15ml(含10%小牛血清),接种到T-75 Falcon 产培养瓶中培养。 3.在细胞生长接近完全汇合时,收集培养液制成条件培养基;再用含10

2B4细胞培养操作

1)复苏细胞:将含有 1mL2B4细胞。悬液的冻存管在  37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL  培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 250px 皿中,加入约 8m

LLCMK2细胞培养操作

1)复苏细胞:将含有 1mLLLC-MK2细胞。悬液的冻存管在  37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL  培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 250px 皿中,加入

平滑肌细胞培养方法2

1 材料与方法1.1 材料 9~12d新生健康清洁级KM小鼠,雌雄不限,购自重庆医科大学实验动物中心。RPMI-1640干粉培养基,D-Hanks粉,标准胎牛血清,胰蛋白酶粉(1∶250)均购自Hy-Clone公司;青霉素钠、硫酸链霉素购自华北制药厂;鼠抗兔平滑肌α肌动蛋白单克隆抗体,购自Zymed

HepG2细胞培养的条件

HepG2人肝肿瘤细胞株广泛应用于遗传毒理学及病毒培养等方面的研究,研究肝脏疾病发病机理及其临床应用有着重要意义。由于其与肝细胞具有相同的生物学活性,还被用于胰岛素抵抗的研究。本文对肝癌细胞培养的最佳条件做一简单综述。1.HepG2细胞的复苏条件1.1 复苏温度的选择唐孟萱等采用下述方法进行细胞复苏

常见癌症体检攻略

很多癌症的可怕之处在于,一旦发现,就是中晚期。人们不禁要问,平时所进行的体检,难道不能发现?专家指出,常规体检很难早期发现癌症,专业的设备和医生,才能捕捉到早期癌变信号。虽然癌症被称为"绝症",但早期癌症的治愈率可以高达80%,而且病人所遭受的痛苦和治疗费用也会大大降低,因此早期发现才是癌症治

高血压诊疗攻略

  高血压是临床常见病,无论哪个科室都能碰到,那么问题来了,当你收治的患者疑似高血压或者已经确诊高血压的时候,你该怎么处理呢?近日,在 Practice Update 网站上,来自美国西奈山心脏研究所的 Ronald 博士分享了个人对高血压的诊疗经验,内容详实,值得广大医生学习!    怎么诊断

精液常规检查攻略

在婚前、孕前检查及男性不育诊治过程中,做精液常规检查是不可或缺的内容,它是男性生育力的重要指标,然而这么简单的检查,您的检查对了吗?在接诊患者过程中只要检查精液,我们都会询问患者:“请问您禁欲几天了?”患者A回答:“我昨晚专门射了一次精!我的精液很新鲜的”患者B回答:“我家离得远,我有两周都没有同房