科学家发现嗅鞘细胞新起源
据美国物理学家组织网11月15日报道,嗅鞘细胞(OECs)是包在嗅觉神经纤维外面起保护作用的被膜,过去25年来,人们一直认为嗅鞘细胞是由鼻内膜形成的,但英国科学家一项新研究显示,嗅鞘细胞有着不同的起源。 如果将嗅鞘细胞移植到受损的脊髓中,能促进神经修复,支持中枢神经系统再生,这一新发现为治疗脊髓损伤提供了更加可靠的资源。该研究由英国维康基金和伊萨克·牛顿基金资助,研究结果发表在本周的美国《国家科学院院刊》上。 理论上讲,可以利用病人鼻子中取出的内膜组织,在培养皿中生长出嗅鞘细胞来,然后将其移植到损伤的脊髓中就能促进神经修复,而无需担心任何排异反应。但这种方法得到的细胞数量太少,不能为治疗提供足够的来源。 论文主要作者、英国剑桥大学发展与神经科学生物系的克雷尔·贝克博士说:“鼻内膜中的嗅鞘细胞太少了,其中还包裹着周边神经纤维,而这些纤维和嗅鞘细胞非常相似,对促进脊髓修复没什么效果。很难从鼻内膜中提纯出足够的......阅读全文
LSCM表达荧光蛋白的组织
表达荧光蛋白的组织经冷冻切片制样后,可直接封片,观察并扫描图像,也可配合使用其它荧光染料进行免疫荧光抗体标记和核染色。同时表达GFP 和 RFP 荧光蛋白的组织切片,如还需作免疫荧光抗体标记,应选择可以被 633 nm 和 405 nm 波长激光器激发的荧光染料,如 CY5、Alexa fluor
图解光诱导荧光蛋白系统
GFP蛋白曾经为蛋白质定位等相关研究带来革命性的进展,而随着具有和GFP类似遗传学特征的光学指示剂蛋白的出现,蛋白质相关的动态研究也将获得更多的手段和技术,本文详细介绍了激光诱导荧光系统在蛋白质研究中的应用。 近年来随着蛋白质学研究的进展,研究人员相继发现和特异克隆了一些特殊蛋白质。这些蛋
免疫荧光和细胞分离
实验步骤基 本 方 案 1 单细胞表面抗原的免疫荧光标记材 料基 本 方 案 2 固定和渗透单细胞的细胞内抗原的免疫荧光标记材 料辅 助 方 案 1 用 异 硫 氰 酸 荧 光 黄(FITC) 偶联抗体材 料6 . 计算荧光素/蛋 白 质 比(F/P ):F/P = F I T C 摩尔数/蛋白质摩
细胞免疫荧光操作步骤
1.细胞爬片;2.4%多聚甲醛固定10min(固定细胞器用预冷的70%甲醇+30%丙酮);3.PBS漂洗5min;4.0.5% Triton 穿孔15min(丙酮固定法不用透化处理);5.PBS漂洗2次,每次5min;6.1%BSA封闭30min;7.加入1%BSA稀释的一抗,于37℃杂交2h;8.
细胞免疫荧光染色实验
实验原理利用抗原抗体反应,鉴定细胞是否表达某种蛋白。细胞经固定后,用特异性抗体(一抗)识别目的蛋白,再用一抗的抗体(二抗)识别一抗,二抗一般耦联荧光基团或化学反应基团,通过荧光或化学发光显示目的蛋白。主要试剂防淬灭剂、DPBS、指甲油、4% PFA、10 μg/mL PI、10 μg/mL Hoec
细胞荧光化学实验
荧光法较一般光学方法具有灵敏度高、特异性强、方法简便等优点,因此近年来荧光组织化学特别是免疫荧光技术有了很大的发展。利用荧光技术可研究细胞内化学成分的分布与定位,研究细胞与组织中物质的吸收与转运,进行病理鉴别以及细胞免疫等方面的研究。 当用一种波长的光(如紫外光)照射某种物质时,这种物质会在极短的时
免疫荧光细胞化学技术
免疫荧光细胞化学技术免疫荧光细胞化学是现代生物学和医学中广泛应用的技术之一,是由Coons等(1950)建立,经过近43年的发展,免疫荧光技术与形态学技术相结合发展成免疫荧光细胞(或组织)化学。它与亲合化学技术如葡萄球菌A蛋白(SPA)、生物素与卵白素、植物血凝素(ConA等)相结合拓宽了领域;与激
细胞免疫荧光染色实验
实验原理利用抗原抗体反应,鉴定细胞是否表达某种蛋白。细胞经固定后,用特异性抗体(一抗)识别目的蛋白,再用一抗的抗体(二抗)识别一抗,二抗一般耦联荧光基团或化学反应基团,通过荧光或化学发光显示目的蛋白。主要试剂防淬灭剂、DPBS、指甲油、4% PFA、10 μg/mL PI、10 μg/mL Hoec
细胞免疫荧光实验步骤
细胞免疫荧光主要用于蛋白定位研究和细胞内信号转导,细胞免疫荧光技术是利用免疫技术和荧光标记技术相结合,原理就是利用抗原-抗体反应之后,采用荧光标记,标记完成后,显微镜下观察细胞内某种抗原成分的多少,从而做出一个定位研究,也可以为细胞内信号传导提供一个明确的指导,细胞免疫荧光具有敏感性强、特异性高、速
光学磁扭仪和荧光诱导活细胞细胞核蛋白的分解
实验概要机械力在生物过程中发挥着显著作用。这些机械力可以通过骨架长丝网络传送到细胞,诱导胞浆内不同的生化反应。虽然已经有充足的报告显示,细胞质酶可被细胞表面的局部应力直接激活,但一直没有证据表明,机械力可以直接改变核功能,包括卡哈尔体蛋白质复合物的结构变化。本实验描述了通过利用磁场扭曲力改变,流式细
DNA纤维荧光原位杂交技术的技术特点
FISH的分辨率取决于载体DNA的浓缩程度,如何提高分辨率一直是一个重要课题。Wiegant等和Heng等首先利用化学方法对染色体进行线性化,再以此为载体进行FISH,使其分辨率显著提高,这就是最初的纤维-FISH。纤维-FISH应用各种不同技术,将待研究细胞的全部遗传物质即DNA在载玻片上制备出D
简述荧光蛋白的相关试验分析
研究人员用特殊处理的荧光蛋白植入老鼠的脑细胞,这些荧光蛋白能够“点亮”神经元,从而使研究人员能够研究大脑是如何处理信息的。该技术被命名为脑彩虹,它的产生让神经科学家们第一次有机会从内部研究活体大脑。当外界信息涌入大脑时,脑彩虹让神经科学家们更加了解神经回路是如何加工信息的。 这项技术源自水母的
小脑神经鞘瘤病例分析
男,53岁。于1个月前无明显诱因出现头晕、行走不稳,易向右倾倒,无恶心呕吐,之后头晕加重,行走缓慢,步幅蹒跚,偶有右耳耳鸣,来院就诊。查体双侧咽反射减退,伸舌向右偏,右侧肢体共济运动不稳准,闭目直立征阳性。 头颅MRI示:右侧小脑半球占位性病变,伴大小不等囊性变,大囊位于肿瘤边缘,微囊到中囊变位于
腓肠肌内神经鞘瘤病例分析
周围神经鞘瘤影像报道多是发生于肌间隙内神经血管束走行区病变,骨骼肌内的神经鞘瘤少见。本文报道1例并进行文献复习,对其影像学表现探讨。 男,43岁,自述3月前无意间发现左小腿包块,因包块较小,未引起重视,未作治疗,约一月前包块逐渐增大。查体:左小腿后侧可触及大小约2.0 cm×3.0 cm包块
神经鞘脂贮积症的概述
神经鞘脂 (sphingolipid) 是一类复合脂,其共同结构是酰基鞘氨醇 (ceramide) 。酰基鞘氨醇是由鞘氨醇 (sphingosine) 通过氨基与脂肪酸链共价连接而成。因连接的侧链基团和脂肪酸链的不同,神经鞘脂分为不同的类型。神经节苷脂是神经鞘脂的一大类,其结构特征是 N -神经
神经鞘瘤的临床表现
各种年龄、不同性别均可发生。发生于颅神经较周围神经者更为常见。通常为单发,有时多发。大小不等,大者可达数厘米。皮肤损害常发生于四肢,尤其是屈侧较大神经所在的部位。其他如颈、面、头皮、眼及眶部也可发生。此外尚可见于舌、骨及后纵隔。 肿瘤为散在柔软肿块,通常无自觉症状,但有时伴有疼痛及压痛。如肿瘤
关于神经鞘膜瘤的简介
神经鞘膜肿瘤有神经鞘瘤(neurilemmoma)和神经纤维瘤(neurofibroma)两类。两者均为神经鞘细胞来源,但临床表现和组织形态有一定差别,故分别叙述。 神经鞘瘤可发生在周围神经、颅神经或交感神经。颅神经鞘瘤占颅内肿瘤5%~10%,发生于听神经,所以又称听神经瘤(acoustic
免疫荧光染色能进行细胞平均荧光强度分析吗
细胞免疫荧光的详细操作步骤1,取出细胞爬片放到35mm或60mm用过的细胞培养皿里,PBS洗三遍。注意有的时候作的细胞爬片可能比较小,因此夹取的时候要小心。2,4%多聚甲醛固定20分钟,PBS洗三遍。3,0.2%TritonX100通透10分钟,PBS洗三遍。4,与二抗相同宿主的血清封闭30分钟,P
免疫荧光组织(细胞)化学技术——荧光素及其标记抗...1
制备荧光抗体是免疫荧光组织化学的重要技术之一,制备特异性强和高效价的荧光抗体必须选用高质量的荧光素和高效价的抗体。 一、荧光素 荧光是指一个分子或原子吸收了给予的能量后即刻引起发光,停止能量供给,发光也瞬时停止。可以产生明亮荧光的染料物质,称荧光素。目前主要常用于标记抗体的荧光素如下: 1、异硫氰酸
免疫荧光组织(细胞)化学技术:荧光抗体的质量控制
1、染色特异性和敏感性的测定方法 (1)特异性染色和效价测定 直接染色法中效价以倍比稀释如1:2、1:4、1:8……,与相应抗原标本作一系列染色,荧光强度在“+++”的最大稀释度,为其染色滴度(效价)或单位。实际染色时,可取低一个或两个稀释度(即2~4个单位),如染色效价为1:64,实际应用时可取1
免疫荧光组织(细胞)化学技术——荧光素及其标记抗...2
免疫荧光组织(细胞)化学技术——荧光素及其标记抗体的方法 2P3(2)Chadwick氏法 试剂和材料:抗体球蛋白溶液、异硫氰酸荧光素、3%重碳酸钠水溶液、0.01 mol/L pH8.0磷酸盐缓冲盐水、1%硫柳汞、离心机及离心管、三角烧瓶(25 ml)、冰槽、无菌吸管及毛细滴管、烧杯(500 ml
流式细胞计量术(基于荧光的蛋白质分析)实验
活细胞表面抗原的荧光染色(直接免疫荧光) 活细胞表面抗原的荧光染色(间接免疫荧光) 实验材料 细胞
利用“无创”技术检测活细胞中荧光蛋白表达(二)
结果波长优化用GeminiEM对DsRed进行波长扫描,以此举例如何进行波长优化。为了检测最大激发波长,我们首先固定发射波长为600nm,然后对发射波长进行扫描。扫描结果显示最大激发波长为556nm(图1)。同样为了检测最大发射波长,我们固定激发波长为535nm,然后扫描发射波长,从而得到584nm
流式细胞计量术(基于荧光的蛋白质分析)实验
活细胞表面抗原的荧光染色(直接免疫荧光) 活细胞表面抗原的荧光染色(间接免疫荧光) 实验材料 细胞
利用“无创”技术检测活细胞中荧光蛋白表达(三)
细胞混合结果在本次实验中,我们在一个96孔板里混合了多种细胞,保证每个孔大约50,000个细胞。因此,如果是1:1混合,那么每种细胞会有25,000个。如果是1:1:1混合,那么每种细胞将有16,700个。实验板分别用480/510nm(AsGFP和ZsGreen的优化结果)和550/588nm(D
流式细胞计量术(基于荧光的蛋白质分析)实验
活细胞表面抗原的荧光染色(直接免疫荧光)实验材料细胞初始抗体试剂、试剂盒PBS 溶液叠氮化钠实验步骤1. 在培养皿中加入 1 mmol/L EDTA/1 mmol/L EGTA 的 PBS 溶液,轻摇,收获细胞。4℃ 1000 g 离心 5 分钟。2. 用 4 ml PBS+0.1% 叠氮化钠和 1
利用“无创”技术检测活细胞中荧光蛋白表达(一)
简介在过去的五年中,荧光蛋白在监测体内生物学研究中,起到越来越重要的作用。源于维多利亚多管发光水母中的绿色荧光蛋白(GFP)是最早被我们应用的荧光蛋白,但是随着时间的推移,现在我们可以使用的荧光蛋白种类也越加丰富,包括加强型的变异GFP蛋白、从其他种类水母中发现的荧光蛋白和珊瑚礁蛋白。它们都可以在众
共聚焦的三个合成图
描述了共聚焦的三个合成图(伪彩为红色和绿色),以及对应的散点图,三个样品荧光团共定位的程度不同。每个通道中强度很低的像素位于靠近散点图的( 0,0)处,而越亮的像素分散得越远。在连接红色通道和绿色通道的散点图中,纯的红色和绿色的像素点往往会团聚在轴位置。而共定位的像素(如果有的话)看起来是彩色的,具
关于中间纤维与肿瘤诊断的基本信息介绍
中间纤维形态相似,但具有严格的组织特异性,不同类型的中间纤维严格地分布在不同类型的细胞中,故可根据中间纤维的种类区分上皮细胞、肌肉细胞、间质细胞、胶质细胞和神经细胞。在这几种纤维类型的基础上,中间纤维还可进一步分出若干亚型。因绝大多数肿瘤细胞在生长时,继续保持其来源细胞的中间纤维的种类、超微结构
量子产率超过90%荧光标记的最强荧光——藻胆蛋白
藻胆蛋白是源自微藻和蓝细菌的光合作用光捕获蛋白家族。这些蛋白质具有共价连接的线性四吡咯基团,称为藻胆素,其在捕获光能中起关键作用。在微藻和蓝细菌中,由这些藻胆素吸收的能量通过荧光共振能量转移(FRET)有效地转移到叶绿素色素用于光合作用反应。与化学合成荧光染料相比,藻胆蛋白由于其相对高的荧光量子产率