中国药科大学柳军博士PNAS发表免疫研究新成果

来自威斯康星医学院、中国药科大学、Norris Cotton癌症中心等机构的研究人员证实,免疫检查点蛋白VISTA和PD-1非重复性调控了鼠类T细胞反应。这一重要的研究发现发布在5月11日的《美国国家科学院院刊》(PNAS)杂志上。 这篇论文的通讯作者是威斯康星医学院的助理教授Li Wang博士,中国药科大学的柳军(Jun Liu)博士是这篇论文的第一作者。柳军博士的主要研究向为代谢性疾病(糖尿病和肥胖)药物的机制研究、相关靶点寻找与确证、药物筛选模型和筛选新技术的建立以及新药开发。迄今已发表论文60余篇,其中SCI论文40多篇。 免疫检查点控制共刺激和共抑制信号的平衡,而共刺激和共抑制信号在维持自身耐受和调节T细胞应答的幅值与持续时间方面具有重要作用。以往的研究证实,程序性细胞死亡的蛋白1(PD-1)、LAG3和TIM3等多种免疫检查点蛋白共同表达于免疫细胞之上,彼此协同发挥功能。 VISTA是近期发现的一个免疫检......阅读全文

转基因小鼠的“三段进阶”

小鼠转基因的“三段进阶”。这里我们说的转基因小鼠是指:将一段外源基因随机插入到小鼠基因组中,获得过量表达目的基因的小鼠模型。转基因1.0 显微注射法构建完全随机插入转基因小鼠用显微注射针将线性化的外源DNA片段直接注入小鼠受精卵的原核中,使外源基因整合到小鼠基因组中,从而获得转基因小鼠。优点:过程较

CRISPR技术如何带火了基因编辑小鼠?

2013年,一种名为的“CRISPR”的基因编辑技术出现后,“基因编辑”这个词汇不经意间火了,传遍了整个学术圈、生活圈,甚至是朋友圈。它的出现让“编辑生命”变得触手可及,它似乎可以斗过癌症(白血病)和艾滋病,还有各种遗传病。我们知道,目前这些人类疾病都没有办法从根本上治疗,而它们几乎都和基因突变相关

基因激活疗法可抑制小鼠肝损伤

  洛杉矶加利福尼亚大学的化学家Hsian-Rong Tseng 说:“这是一项非常令人兴奋的工作,这将使转录因子传输到另一个不同的领域。”  我们的细胞产生超过一千个独特的转录因子,它们每一个都会结合到DNA的一个特定区域来提示基因的转录:从DNA创建 RNA模板来合成新的蛋白质。改变这些因子的活

转基因小鼠模型的建立(SOP)8

(1)  RNA的分离:根据实验者的需要从转基因小鼠组织或细胞中提取总RNA或mRNA。分离总RNA比较简单,且适合做基因做基因转录分析。实验操作参见第一章的第四节。(2)  Northern 印迹分析:该技术用于定性检测转基因动物组织或细胞中转基因转录的相对水平。其实验操作参见第一章的第九节。(3

基因编辑让早衰小鼠寿命延长25%

  年龄增长会增加很多疾病发生的风险,例如心脏病、癌症和阿尔兹海默症。所以,科学家们一直在试图找到延缓衰老的方法。  2019年2月18日,《Nature Medicine》期刊上发表一篇最新文章,揭示了一种新的基因疗法或有助于延缓衰老。  来自Salk研究所的科学家们利用CRISPR/Cas9基因

转基因小鼠模型的建立(SOP)3

(2)受体母鼠的准备输卵管转移的受体鼠应该为4-6周龄大小,体重在20-25克左右,严禁用低体重以及超重母鼠,若体重较低,其体能不足以维持妊娠,可能导致受精卵的重新吸收;若体重较重,麻醉剂被吸收入脂肪组织,降低麻醉效果,可能使手术困难,而且脂肪组织的存在意味着静脉的存在,所以手术时切掉脂肪组织可能导

转基因小鼠制备实验方法(protocol)

1、 选取7~8周龄雌性小鼠,阴道口封闭,作为供体,下午3:00左右,每只小鼠腹腔注射PMSG(10 IU)。2、 47~48小时后,每只小鼠腹腔注射HCG(0.8 IU),并与正常公鼠合笼;另取数只适龄母鼠(2月龄以上)作为受体,阴道口潮红,与结扎公鼠合笼。3、第二天上午9:00前观察供体、受体,

转基因小鼠模型的建立(SOP)2

[不足之处](1)外源基因随机整合;(2)个别原核不清晰,需进行特殊处理;(3)需大型精密仪器,费用昂贵;(4)操作周期相对较长。(二)实验器材的准备1.输精管切除术用器材:弯式有齿镊、直式有齿镊、显微镊、手术剪、自动小夹涂药器、自动小夹、带弯针4/0丝线及持针器、直径为10cm塑料 Petri氏培

小鼠多能ES细胞的增殖实验

            试剂、试剂盒 PBS 胰酶溶液 仪器、耗材 MEF 滋养板 巴斯德吸管 ES 生

细胞疗法成功控制小鼠癫痫发作

  据物理学家组织网5月6日(北京时间)报道,美国加州大学旧金山分校的科学家,通过向患有癫痫症小鼠的大脑海马区一次性移植内侧神经嵴细胞(即神经节隆起细胞),抑制了过度活跃的神经电路中的信号,从而成功控制了小鼠的癫痫发作。这是首次报告在患有癫痫症的成年小鼠模型中阻止癫痫发作,相关论文发表在5月5日《自

小鼠角质细胞的分离和培养

实验步骤1) 将 1~2 天龄新生裸鼠窒息后,置于培养皿中,用 1% 碘聚乙烯吡咯烷酮液洗净裸鼠, 流水彻底冲洗,然后用 70% 乙醇洗两次。2) 上除小鼠的四肢和尾巴。3) 将小鼠从尾巴至鼻子的皮肤作一简单切口,用大鼠牙齿镊轻轻将整个身体的皮肤剥下,用一把镊子夹住身体,另一把镊子拉开皮肤。4) 将

冻干体细胞克隆小鼠成功

英国《自然·通讯》杂志5日发表的一篇论文描述了一种新方法,可使用冷冻干燥体细胞克隆小鼠。这一成果是遗传物质存储研究方面取得的新进展。 整只动物克隆可用于保障生物多样性、挽救濒危物种。然而当下的生物样本储存方法依赖超低温存储,成本高昂而且易受断电故障等问题影响。此前的进展使人们能够存储来自冻干精细

小鼠肝细胞原代培养实验

胰酶消化法             实验方法原理 将小鼠的肝细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。 

小鼠角质细胞的分离和培养

实验步骤                                                         1) 将 1~2 天龄新生裸鼠窒息后,置于培养皿中,用 1% 碘聚乙烯吡咯烷酮液洗净裸鼠, 流水彻底冲洗,然后用 70% 乙醇洗两次。2) 上除小鼠的四肢和尾巴。3)

小鼠胚胎干细胞的培养

实验概要了解小鼠胚胎干细胞的培养方法。主要试剂1. 贮存液 DMEM(高糖) 胎牛血清 L-谷氨酰胺(200mM) MEM NEAA(10mM) HEPES(1M) β-巯基乙醇(55Mm) 转铁蛋白50mg/ml 胰岛素5mg/ml 亚硒酸钠300μM 黄体酮(20μM) 腐

小鼠腹腔巨噬细胞培养实验

细胞培养技术             实验方法原理 取小鼠腹腔巨噬细胞与乳胶颗粒在不同培养条件下混合后定量加入24孔板,37 ℃,5% CO2 培养箱中孵育后,荧光显微镜下计数吞噬百

小鼠腹腔巨噬细胞培养实验

小鼠腹腔巨噬细胞培可以:(1)吞噬与清除异物;(2)分泌生物活性物质;(3)对仿生全降解材料,降解后的无机产物与生命过程中有机物的合成作用。实验方法原理取小鼠腹腔巨噬细胞与乳胶颗粒在不同培养条件下混合后定量加入24孔板,37 ℃,5% CO2 培养箱中孵育后,荧光显微镜下计数吞噬百分率和吞噬指数。实

小鼠精原细胞的分离和纯化

【摘要】 目的 探讨小鼠精原细胞的分离纯化。 方法 用组合酶消化法制备7~8d小鼠的生殖细胞悬液;用Percoll不连续密度梯度法分离精原细胞。 结果 所获细胞悬液内活细胞、死细胞及细胞团的百分比分别为90.08%、9.92%及8.91%;平均每个睾丸可获得4.136×105个细胞;精原细胞主要分布

小鼠腹腔巨噬细胞培养实验

            实验方法原理 取小鼠腹腔巨噬细胞与乳胶颗粒在不同培养条件下混合后定量加入24孔板,37 ℃,5% CO2 培养箱中孵育后,荧光显微镜下计数吞噬百分率和吞噬指数。 实验材料

小鼠腹腔巨噬细胞原代培养

实验方法原理 巨噬细胞属免疫细胞,有多种功能,是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。巨噬细胞容易获得,便于培养,并可进行纯化。巨噬细胞属不繁殖细胞群,在条件适宜下可生活2-3周,多用做原代培养,难以长期生存。 巨噬细胞也建有无限细胞系,大多来自小鼠,如P331、S774A.1、RAW309

小鼠精原细胞的分离和纯化

【摘要】 目的 探讨小鼠精原细胞的分离纯化。 方法 用组合酶消化法制备7~8d小鼠的生殖细胞悬液;用Percoll不连续密度梯度法分离精原细胞。 结果 所获细胞悬液内活细胞、死细胞及细胞团的百分比分别为90.08%、9.92%及8.91%;平均每个睾丸可获得4.136×105个细胞;精原细胞主要分布

新药可让小鼠癌细胞永久“睡眠”

   前不久,澳大利亚科学家在癌症研究领域迈出了重大的一步,他们发现了一种新型药物,可以使小鼠体内癌细胞不再分裂和增殖,并将动物的癌细胞置于永久睡眠状态,进而有效阻止小鼠血液癌症和肝癌的进展以及延缓癌症复发。该研究成果主要来自于澳大利亚Walter和Eliza Hall医学研究所,并发表在《自然》期

小鼠单个核细胞的分离实验

实验步骤基 本 方 案 从 脾 脏 、胸腺和淋巴结制备细胞悬液材 料RPMI-5 或 DMEM-5 完全培养基新鲜分离的小鼠器官: < 6 周龄的小鼠胸腺; 6 周 至 6 个月龄的小鼠脾脏和淋巴结60 mmX 15 mm 培养皿剪 刀 和 镊 子(保 存 在 7 0 % 乙醇的烧杯中)装 有 19

小鼠肝细胞原代培养实验

胰酶消化法             实验方法原理 将小鼠的肝细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。 

小鼠精原细胞的分离和纯化

【摘要】 目的 探讨小鼠精原细胞的分离纯化。 方法 用组合酶消化法制备7~8d小鼠的生殖细胞悬液;用Percoll不连续密度梯度法分离精原细胞。 结果 所获细胞悬液内活细胞、死细胞及细胞团的百分比分别为90.08%、9.92%及8.91%;平均每个睾丸可获得4.136×105个细胞;精原细胞主要分布

小鼠角质细胞的分离和培养

实验概要本实验是根据Hennings等(1980)的方法改进而来的。该方案也适用于原代大鼠角质细胞的分离。主要试剂HBSS: NaCl 8g/L KCl 400mg/L KH2PO4 60mg/L 无水Na2PO4 47.86mg/L 无水葡萄糖 1000mg/L NaHCO3 350mg/L实验

小鼠多能ES细胞的增殖实验

试剂、试剂盒PBS胰酶溶液仪器、耗材MEF 滋养板巴斯德吸管ES 生长培养基实验步骤1. 准备下列试剂和材料:60 mm MEF 滋养板(接种不能超过 7 天)带棉塞无菌巴斯德吸管无 Ca2+ 和 Mg2+ PBSES 生长培养基胰酶溶液2. PBS 冲洗 ES 细胞,巴斯德吸管加胰酶溶液覆盖培养皿

小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬实验

目的要求1.了解小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象的原理 2.熟悉细胞吞噬作用的基本过程基本原理细胞的吞噬作用在单细胞动物是摄取营养物质的方式,在高等动物内的巨噬细胞、单核细胞和中性粒细胞等具有吞噬功能,是机体非特异性免疫功能的重要组成部分。巨噬细胞是由骨髓干细胞分化生成,当病原微生物或其他异物侵入机体时,巨

Cell:细胞重编程让小鼠“返老还童”

  众所周知,干细胞在一定条件下可以分化为各种类型的细胞,此外,它们还有一个惊人的能力——永葆青春。来自Salk研究所的研究人员利用干细胞的这种能力延长了早衰小鼠的寿命,并使它们的机体组织重获新生。这项发表于Cell期刊上的突破性研究虽然还不能让人类返老还童,但它的确有潜力让人类的身体在衰老之后保持

小鼠多能ES细胞的增殖实验

            试剂、试剂盒 PBS 胰酶溶液 仪器、耗材 MEF 滋养板 巴斯德吸管 ES 生