BioTechniques：无细胞表达究竟哪家强？
无细胞表达系统让研究人员能够快速生成蛋白质，从而受到人们的青睐。来自真核细胞的裂解物能够对蛋白质进行翻译后修饰，但不同翻译系统的细微差别也会导致蛋白生产的变化。无细胞表达究竟哪家强？亚利桑那州立大学的研究人员近日在《BioTechniques》上发表了他们的比较结果。 在目前的无细胞蛋白合成而言，大肠杆菌仍然是首选。不过，由于对人类和哺乳动物蛋白及其翻译后修饰的兴趣日益增加，真核系统也逐渐受到人们的欢迎。此外，对于某些技术，如mRNA展示和核酸可编程的蛋白芯片（NAPPA），研究人员倾向于使用真核表达系统来研究蛋白质互作。 在这项研究中，研究人员比较了市场上三种常用的真核无细胞表达系统：麦胚提取物（WGE，Promega）、兔网织红细胞裂解物（RRL，Promega）和HeLa细胞裂解物（HCL、赛默飞世尔）。 对于每个系统，研究人员定量了环状质粒和线性DNA所产生的萤光素酶蛋白的量。这些DNA模板的5’非翻译区（UT......阅读全文
研究揭示SAMHD1蛋白重要细胞学新功能
来自吉林大学第一医院的声音：让我们再一次领先于世界! 吉林大学白求恩第一医院艾滋病与病毒研究所再次传来喜讯：该团队在世界上首次证明人SAMHD1蛋白具有调控内源逆转录转座子活性的能力，成功揭示了SAMHD1蛋白在人体内的一大重要细胞学功能。这一重大发现已于九月十二日以在线发表的形式刊登在世
Cell－Biolabs细胞研究、细胞信号通路和蛋白质生物学简介
核心专业领域：1.细胞分析 特色CytoSelect™细胞分析试剂可用于血管生成、自噬、细胞粘附、细胞迁移、细胞转化、细胞活性、细胞吞噬等研究，无需人工进行细胞计数，分析方案操作简易，快速产生结果。此外，还有肿瘤细胞分离和敏感性分析产品。 2.氧化应激分析 抗氧化剂分析、脂质过氧
通过凝胶电泳测定λ噬菌体原种和裂解物中DNA
实验方法原理 本方案阐述了一种快速估计 λ 噬菌体原种中 DNA 含量的方法。该方法首先可用于发现原种和裂解物中的噬菌体颗粒的得率是否能满足大量纯化的需要，其次可用于检测纯化过程，以找到出问题步骤。
技术和方案18－染色质免疫沉淀
试剂、试剂盒甲醛甘氨酸TBS蛋白酶抑制剂裂解缓冲液免疫共沉淀洗脱液TESTE仪器、耗材超声波粉碎仪实验步骤1.培养要分析的细胞。每一个样品，需要在三角瓶中培养 50~100ml 细胞至 OD600 大约为 1。2.甲醛处理细胞交联蛋白质和 DNA。加甲醛到细胞中至终浓度为 1%(37% 的甲醛按 1
用于激酶分析的细胞裂解实验
基本方案 实验方法原理 实验材料 培养
用于激酶分析的细胞裂解实验
实验方法原理 实验材料 培养细胞（贴壁贴壁细胞在100 mm 组织培养板中约 70% 生长成片／悬浮细胞浓度 为 10^6 细胞／ml）试剂、试剂盒 PBS裂解缓冲液蛋白酶抑制剂储存液仪器、耗材 微量离心机实验步骤 1. 用预冷的 PBS 洗细胞 2 次，将最后的洗液尽可能吸尽。2. 加入 0.
用于激酶分析的细胞裂解实验
实验材料培养细胞（贴壁贴壁细胞在100 mm 组织培养板中约 70% 生长成片／悬浮细胞浓度 为 10^6 细胞／ml）试剂、试剂盒PBS裂解缓冲液蛋白酶抑制剂储存液仪器、耗材微量离心机实验步骤1. 用预冷的 PBS 洗细胞 2 次，将最后的洗液尽可能吸尽。2. 加入 0.75 ml 裂解缓冲液重悬
哺乳动物细胞抽提物中荧光素酶的测定实验
实验材料 用感兴趣的 DNA 转染的哺乳动物培养细胞试剂、试剂盒 细胞裂解缓冲液荧光素酶测定缓冲液荧光素溶液不含钙盐和镁盐的磷酸盐缓冲液仪器、耗材 荧光光度计和光度计测置管橡胶棒实验步骤 材料缓冲液和溶液贮存液稀释到适当浓度。细胞裂解缓冲液25 mmol/L 双甘氨肽（pH7.8)15 mmol/L
哺乳动物细胞抽提物中荧光素酶的测定
单细胞凝胶电泳实验可应用于： （1）快速检测单细胞DNA损伤； (2)遗传毒性生物监测; (3)确定精子细胞中DNA片段化的程度。实验方法原理萤光素酶是理想的报告基因，因为哺乳动物细胞中不含内源性萤光素酶，一旦转录完成立刻就生成功能性的萤光素酶，同时在所有的化学发光反应中，它的光产物具有最高的量子效
哺乳动物细胞抽提物中荧光素酶的测定
哺乳动物细胞抽提物中荧光素酶的测定实验 实验方法原理 萤光素酶是理想的报告基因，因为哺乳动物细胞中不含内源性萤光素酶，一旦转录完成立刻就生成功能性的萤光素酶，
王红阳院士研究发现关键蛋白影响肝癌细胞转移
肝癌是一种预后很差的常见癌症，我国是肝癌高发国家，每年约有11万人死于这种疾病。肝细胞癌（HCC）是原发性肝癌的主要类型，也是恶性程度最高的肿瘤之一，其最显著的特点是发生转移和形成门静脉癌栓（PVTT）。 第二军医大学、河南科技大学等机构的科学家们对HCC进行了深入研究。他们发现，蛋白Merl
百人博士两篇文章：如何研究细胞关键蛋白
来自中科院上海生科院生化与细胞所的研究人员利用多种细胞蛋白分析手段发现了两种关键细胞蛋白的作用机理，这两种蛋白分别是C末端Src激酶(C-terminal Src kinase，Csk)和细胞极性封闭蛋白Occludin。研究论文分别发表在《Proteomic》和《Developmental C
英国研究发现蛋白质“开关”可切断癌细胞供血
英国一项最新研究发现，通过调控一种信号蛋白，可阻止前列腺癌癌变组织周围的新血管形成，从而切断癌细胞的营养供给通路，抑制肿瘤生长及癌变扩散。 英国诺丁汉大学、布里斯托尔大学等机构的研究人员在10日出版的《致癌基因》杂志上报告说，他们对血管内皮生长因子进行了研究，这是一种信号蛋白，能以两种形式存在
研究显示一种蛋白可用来简单鉴别干细胞
美国研究人员发现，一种特定蛋白也许可用来区分干细胞和干细胞分化的细胞，从而使从各种组织中分离干细胞变得简单。 干细胞能分化成其他细胞，但并非一蹴而就，而是分多个阶段完成并在这个过程中逐渐失去干细胞的特性。干细胞第一阶段分化的是祖细胞。美国约翰斯·霍普金斯大学的尼古拉斯
《癌症细胞》－易庆等－骨髓瘤C反应蛋白研究
来自美国德克萨斯大学安德森癌症中心和复旦大学生科院遗传工程国家重点实验室的研究人员发现了骨髓瘤中CRP（C-反应蛋白）可以促进肿瘤细胞的生长和存活，从而证明CRP可以作为一种潜在的癌症治疗靶标，这一研究成果公布在癌症研究权威杂志《癌症细胞》（Cancer Cell）（Cell杂志出版社出版的10种期
JBC：脱氧血红蛋白研究助力红细胞疾病治疗
近日，刊登在国际杂志Journal of Biological Chemistry上的一篇研究论文中，来自维克森林大学（Wake Forest）的研究人员通过研究揭示，脱氧血红蛋白的确可以诱发亚硝酸盐转化为一氧化氮，该过程往往会影响血流和机体的凝血。 研究者Kim-Shapiro说道，红细胞中
定量质谱研究食管癌细胞异常蛋白表达和修饰
定量蛋白质组学技术已成为当前大规模蛋白质鉴定的重要手段。本研究以高侵袭性的食管癌细胞SHEEC和食管上皮细胞SHEE为目标，分别采用轻、重稳定同位素进行细胞蛋白氨基酸标记（SILAC），通过多维液相色谱分离结合高分辨质谱，鉴定了两种细胞蛋白质组。共鉴定了7000多个蛋白质，并对其中3000多个蛋白质
最新研究：线粒体蛋白OPA1可以促进脂肪细胞褐变
在哺乳动物中，白色脂肪组织储存能量，而棕色脂肪组织通过解偶联蛋白1介导的产热作用将能量转化为热量。意大利帕多瓦大学的研究团队发现，线粒体内膜中视神经萎缩症蛋白1（OPA1）可促进脂肪细胞自主褐变，这种促进作用是通过影响尿素循环产生的。该研究成果于近日发表在《Nature Metabolism》上
生化与细胞所研究发现TDP43蛋白积聚的机制
3月30日，美国The FASEB Journal在线发表了中科院上海生命科学研究院生化与细胞所胡红雨课题组的研究论文。该论文阐明了TDP-43蛋白的降解片段TDP-35是其在细胞质内形成包涵体的主要原因，并且包涵体的形成引起该蛋白质参与RNA加工功能的改变。 肌萎缩侧索硬化症(Amy
制备DNA测序模板实验——小量裂解物中制备λ噬菌体DNA
实验材料重组λ噬菌体试剂、试剂盒DNA酶ⅠRNA酶ⅠPEGSMSDSEDTA异丙醇乙酸钠TE仪器、耗材巴斯德吸管试管离心机实验步骤1. 在新鲜配制的λ顶层琼脂糖和λ琼脂糖平板上，通过在平板上裂解适于λ噬菌体生长的大肠杆菌菌株，制备重组λ噬菌体毒种原液。2. 取700 μl 毒种液加入无菌的1.5
细菌内毒素检测
实验方法原理 鲎是一种海洋节肢动物，血液中含有一种变形细胞，此细胞的裂解物可与微量细菌内毒素起凝胶反应，即细胞裂解物中的一种酶被内毒素激活，使细胞裂解物中蛋白质形成凝胶。鲎试验具有快速、简便、灵敏等优点。实验材料 鲎试剂试剂、试剂盒 生理盐水无菌水内毒素仪器、耗材 安瓶习惯水浴箱实验步骤 一、材料
细菌内毒素检测实验_鲎试验法
实验方法原理鲎是一种海洋节肢动物，血液中含有一种变形细胞，此细胞的裂解物可与微量细菌内毒素起凝胶反应，即细胞裂解物中的一种酶被内毒素激活，使细胞裂解物中蛋白质形成凝胶。鲎试验具有快速、简便、灵敏等优点。 实验材料鲎试剂试剂、试剂盒生理盐水无菌水内毒素仪器、耗材安瓶习惯水浴箱实验步骤一、材料 1.
4.5－体外转录与体外翻译耦联的快速反应系统
TNT 耦联网织红细胞裂解物系统乂可以分为：TNTT7 系统、TNTSP6 系统和 TN 下 PCR 系统。其屮，TNTT7 系统可以从线状和环状 DNA 中翻译蛋白质，SP6 系统只能使用环状 DNA 进行翻译，而 PCR 模板可使用 TNTPCR 系统迸行翻译实验材料质粒 DNA 模板试剂、试剂
透化细胞和退化细胞器中测定比活性实验1
从标记的细胞或者细胞裂解物中提取ATP实验步骤1.从标记细胞提取ATP1) 备下列材料：本实验用到的所有溶液必须用Mlli - Q纯化的水或它的等价物配制。冰冷的4%高氣酺（v/v)三-n-辛胺1,1,2-三氮三m乙烷32p标记的细胞带螺帽的聚丙烯离心管测量范围PH4~8的PH试纸小心：高氣酸■
细胞凋亡研究
前言:细胞凋亡是细胞程序性死亡中最具特征性的一种。它在生物发展，体内平衡，甚至在不同的疾病，例如：癌症，的发病机制都扮演着重要的角色。在过去的几十年里，科学家们对细胞凋亡进行了广泛的研究。细胞凋亡的过程中，细胞会有不同的形态变化。同时，细胞膜(plasma membrane)，线粒体(mitocho
血糖研究热门靶标：糖化白蛋白研究
白蛋白是一类球蛋白，最常见的是血清白蛋白。白蛋白家族的所有蛋白质都是水溶性的，在浓盐溶液中有一定的溶解性。白蛋白通常存在于血浆中，与其他血液蛋白的不同之处在于它们没有糖基化。含有白蛋白的物质，如蛋清，称为类白蛋白。许多血液转运蛋白是进化相关的，包括血清白蛋白，甲胎蛋白，维生素D结合蛋白等。糖化白蛋白
体外转录与体外翻译耦联的快速反应系统
实验材料 质粒 DNA 模板试剂、试剂盒 无核酸酶污染的水 [35S] 标记的甲硫氧酸 TNT 快速超级混合液 T7TNTPCR 增强液仪器、耗材 一 70°C 冰箱 冰浴 微量移液器 离心机 水浴槽 聚丙烯酰胺凝胶电泳装置实验步骤 ―、材料与设备1) 无核酸酶污染的水。2)[35S] 标记的甲硫氧
体外转录与体外翻译耦联的快速反应系统
实验材料 质粒 DNA 模板 试剂、试剂盒 无核酸酶污染的水 [35S] 标记的甲硫氧酸 TN
研究揭示了由人巨细胞病毒所表达的蛋白质
新的发现揭示了人类巨细胞病毒或HCMV的令人意外的、复杂的蛋白编码能力，且该发现是人们了解该病毒如何在感染中操纵人类细胞所迈出的第一步。HCMV的基因组是在20多年前首次被测序的，但研究人员如今还对这种常见病原体的蛋白质组――即一整套表达蛋白――进行了研究。人们已知HCMV是一种获得了惊人成功的
成都生物所在沼液生产单细胞蛋白饲料研究中获进展
厌氧消化是有机废弃物资源化利用的重要技术，而含有高浓度氨氮的沼液处理是沼气和生物天然气产业发展的难题。沼液利用和处理方式有作为肥料还田利用和当作废水达标处理排放。沼液中的氨氮来自于有机废弃物中的蛋白氮，蛋白氮来自于种植阶段使用的肥料氮，而肥料氮是合成氨厂花费大量天然气能源将空气中的氮气转化得到的