BioTechniques：无细胞表达究竟哪家强？
无细胞表达系统让研究人员能够快速生成蛋白质，从而受到人们的青睐。来自真核细胞的裂解物能够对蛋白质进行翻译后修饰，但不同翻译系统的细微差别也会导致蛋白生产的变化。无细胞表达究竟哪家强？亚利桑那州立大学的研究人员近日在《BioTechniques》上发表了他们的比较结果。 在目前的无细胞蛋白合成而言，大肠杆菌仍然是首选。不过，由于对人类和哺乳动物蛋白及其翻译后修饰的兴趣日益增加，真核系统也逐渐受到人们的欢迎。此外，对于某些技术，如mRNA展示和核酸可编程的蛋白芯片（NAPPA），研究人员倾向于使用真核表达系统来研究蛋白质互作。 在这项研究中，研究人员比较了市场上三种常用的真核无细胞表达系统：麦胚提取物（WGE，Promega）、兔网织红细胞裂解物（RRL，Promega）和HeLa细胞裂解物（HCL、赛默飞世尔）。 对于每个系统，研究人员定量了环状质粒和线性DNA所产生的萤光素酶蛋白的量。这些DNA模板的5’非翻译区（UT......阅读全文
研究揭示了由人巨细胞病毒所表达的蛋白质
新的发现揭示了人类巨细胞病毒或HCMV的令人意外的、复杂的蛋白编码能力，且该发现是人们了解该病毒如何在感染中操纵人类细胞所迈出的第一步。HCMV的基因组是在20多年前首次被测序的，但研究人员如今还对这种常见病原体的蛋白质组――即一整套表达蛋白――进行了研究。人们已知HCMV是一种获得了惊人成功的
研究揭示蛋白激酶PDK1调控Tfh细胞分化的机制
国农业大学生物学院于舒洋研究组题为该论文以PI3K下游蛋白激酶PDK1（serine/threonine kinase 3-phosphoinositide-dependent protein kinase 1）条件敲除小鼠为主，结合多种基因工程小鼠模型的免疫应答分析，阐明了PDK1在TFH细胞分化
糖尿病研究重大进展－肠道细菌蛋白BefA促进β细胞增殖
在一项新的研究中，来自美国俄勒冈大学的研究人员说，一种新发现的在斑马鱼肠道中产生的细菌蛋白在幼体发育早期诱导胰腺中产生胰岛素的β细胞发生增殖。相关研究结果发表于2016年12月13日在线发表在eLife期刊上，论文标题为“A conserved bacterial protein induces
成都生物所在沼液生产单细胞蛋白饲料研究中获进展
厌氧消化是有机废弃物资源化利用的重要技术，而含有高浓度氨氮的沼液处理是沼气和生物天然气产业发展的难题。沼液利用和处理方式有作为肥料还田利用和当作废水达标处理排放。沼液中的氨氮来自于有机废弃物中的蛋白氮，蛋白氮来自于种植阶段使用的肥料氮，而肥料氮是合成氨厂花费大量天然气能源将空气中的氮气转化得到的
成都生物所在沼液生产单细胞蛋白饲料研究中获进展
厌氧消化是有机废弃物资源化利用的重要技术，而含有高浓度氨氮的沼液处理是沼气和生物天然气产业发展的难题。沼液利用和处理方式有作为肥料还田利用和当作废水达标处理排放。沼液中的氨氮来自于有机废弃物中的蛋白氮，蛋白氮来自于种植阶段使用的肥料氮，而肥料氮是合成氨厂花费大量天然气能源将空气中的氮气转化得到的氮化
重点专项“细胞编程与重编程相关蛋白质机器研究”启动
9月23日，由中国科学院广州生物医药与健康研究院牵头承担的国家重点研发计划项目“蛋白质机器与生命过程调控”重点专项----“细胞编程与重编程相关蛋白质机器研究”项目实施启动会在广州生物院举行。 启动会上，广州生物院党委副书记、副院长段子渊代表项目承担单位致欢迎词，希望各位领导和专家能多提宝贵意
研究揭示细胞壁蛋白调控植物耐盐的新机制
12月5日，国际学术期刊《美国国家科学院院刊》（PNAS）在线发表了中国科学院分子植物科学卓越创新中心/植物生理生态研究所上海植物逆境生物学研究中心朱健康研究组题为Leucine-rich repeat extensin proteins regulate plant salt toleranc
细胞外囊泡中磷酸化蛋白质组学研究
蛋白磷酸化水平的变化可指针疾病的变化，但却鲜有磷酸化蛋白被开发成为疾病诊断标记物。细胞外囊泡是由膜封闭的微环境，不受外界蛋白酶和其他酶的影响。这使得细胞外囊泡在体液中高度稳定，为开发磷酸化蛋白应用于医学诊断提供了契机。今天为大家介绍一篇细胞外囊泡中磷酸化蛋白相关的文章：Phosphoproteins
青岛能源所在细胞内蛋白质折叠研究方面取得进展
蛋白质发挥功能的“原位”环境是细胞，因此在细胞内开展蛋白质的结构和动力学研究对蛋白质功能的解析至关重要。细胞内大分子的浓度可以达到300-450g/L，拥挤的细胞环境可能会影响蛋白质的折叠，进而影响其功能。但是细胞环境如何影响蛋白质折叠过程目前并不很清晰。 近日，中国科学院青岛生物能源与过程研
新研究发现：癌细胞会产生胶原蛋白，并保护免疫反应。
根据德克萨斯大学MD安德森癌症中心研究人员的一项新研究，癌细胞会产生少量自身形式的胶原蛋白，形成一种独特的细胞外基质，影响肿瘤微生物群，并保护免疫反应。这种异常的胶原蛋白结构与人体内生成的正常胶原蛋白有本质区别，为治疗提供了高度特异性的靶点。发表在《癌细胞》杂志上的这项研究，建立在Raghu Kal
Cell－Reports：研究揭示组蛋白伴侣调控神经干细胞机制
大脑皮层是哺乳动物大脑中高度发达的中枢区域，负责控制认知、记忆、情感行为等重要机体功能。正常胚胎大脑皮层发育对于维持皮层功能十分关键，全面深入了解胚胎大脑皮层发育机理及调控机制具有重要意义。 胚胎大脑皮层发育过程受到细胞内外多种信号分子的精准调控，以保证大脑正常发育的时序性。表观遗传调控是皮层
研究揭示蛋白质氧化折叠在干细胞衰老中的作用
长期以来，人们普遍认为线粒体是细胞活性氧的主要来源。然而，内质网中蛋白质二硫键形成过程会产生副产物H2O2。据估算，它约占蛋白质合成过程中产生总活性氧的25%。可见，内质网来源的活性氧不容忽视。 8月3日，中国科学院生物物理研究所王磊/王志珍课题组和动物研究所刘光慧课题组合作，在《欧洲分子生物
透化细胞和退化细胞器中测定比活性实验
从标记的细胞或者细胞裂解物中提取ATP 用发光分析定量测定ATP 用高效液相层析定量测定ATP 测定[γ-32P]ATP的比活性 实验步骤
透化细胞和退化细胞器中测定比活性实验
从标记的细胞或者细胞裂解物中提取ATP用发光分析定量测定ATP用高效液相层析定量测定ATP测定[γ-32P]ATP的比活性实验步骤1.从标记细胞提取ATP1) 备下列材料：本实验用到的所有溶液必须用Mlli - Q纯化的水或它的等价物配制。冰冷的4%高氣酺（v/v)三-n-辛胺1,1,2-三氮三m
细胞凋亡研究
前言:细胞凋亡是细胞程序性死亡中最具特征性的一种。它在生物发展，体内平衡，甚至在不同的疾病，例如：癌症，的发病机制都扮演着重要的角色。在过去的几十年里，科学家们对细胞凋亡进行了广泛的研究。细胞凋亡的过程中，细胞会有不同的形态变化。同时，细胞膜(plasma membrane)，线粒体(mitocho
关于兔网织红细胞系统的基本介绍
兔网织红细胞系统：网织红细胞无细胞核，其合成的蛋白质90%l 人上为珠蛋白。兔网织红细胞用活大白兔制备，通过纯化除去兔网织红细胞以外的污染细胞。网织红细胞裂解后，提取物用微球菌核酸酶破坏内源mRNA,最大限度地降低翻译背景。裂解物包含蛋白质合成所必须的细胞内组分(tRNA,核糖体，氨基酸，起始、
GST蛋白纯化步骤
制备细胞裂解物：1.每100ml培养物的细胞沉淀悬于4mlPBS；2.加入溶菌酶至终浓度1mg/ml，冰上放置30min；3.用针筒将10ml 0.2%Triton X-100强行注入细胞裂解物中，剧烈震动数次混匀；4.加入DNase和RNase至终浓度5μg/ml，4℃震动温育10min；5.4℃
尿红细胞（THP）蛋白
THP 是肾小管髓袢升支粗段和远曲小管近段上皮细胞分泌的一种大分子糖蛋白。已证明肾小球来源的尿红细胞表面被覆THP ，而非肾小球来源的红细胞则没有，应用THP 细胞化学技术亦可鉴别肾性或非肾性血尿。（一） 参考值尿细胞THP 细胞化学定位：阴性（二） 临床意义鉴别肾性和非肾性血尿。
细胞化学基础锌指蛋白
定义通常由一系列锌指组成。 具有重复结构的氨基酸模式，相隔特定距离的胱氨酸结合锌指，能与某些RNA/DNA 结合。作用锌指蛋白是一类具有手指状结构域的转录因子，对基因调控起重要的作用。根据其保守结构域的不同，可将锌指蛋白主要分为C2H2型、C4型和C6型。锌指通过与靶分子DNA、RNA、DNA－RN
血糖研究热门靶标：糖化白蛋白研究
白蛋白是一类球蛋白，最常见的是血清白蛋白。白蛋白家族的所有蛋白质都是水溶性的，在浓盐溶液中有一定的溶解性。白蛋白通常存在于血浆中，与其他血液蛋白的不同之处在于它们没有糖基化。含有白蛋白的物质，如蛋清，称为类白蛋白。许多血液转运蛋白是进化相关的，包括血清白蛋白，甲胎蛋白，维生素D结合蛋白等。糖化白蛋白
研究核蛋白的意义
因为核蛋白的核酸与生物遗传与蛋白质生物合成关系密切，所以有关核蛋白结构与功能的研究十分活跃。如烟草斑纹病毒与小儿麻痹症病毒、流行性感冒病毒等动植物病毒本身就是核蛋白，所以核蛋白的研究在动及植物病害的防治及临床医学上有十分重要意义。
透化细胞和退化细胞器中测定比活性实验
1.从标记细胞提取ATP1) 备下列材料：本实验用到的所有溶液必须用Mlli - Q纯化的水或它的等价物配制。冰冷的4%高氣酺（v/v)三-n-辛胺1,1,2-三氮三m乙烷32p标记的细胞带螺帽的聚丙烯离心管测量范围PH4~8的PH试纸小心：高氣酸■ 三-n -辛胺； U 1，2-三氯三氟乙烧；
人肿瘤抗原的识别与鉴定实验
实验材料 肿瘤细胞试剂、试剂盒 PBS生理盐水裂解液蛋白酶抑制剂仪器、耗材 培养瓶细胞刮棒离心管低温离心机-80℃冰箱探针型超声波恒温水浴锅实验步骤 一、 裂解细胞1. 方向刮取细胞。将细胞悬液转移到离心管，离心取沉淀，-80℃ 保存。（收集细胞要迅速，低温下进行，以减弱蛋白酶的作用）2. 裂解
单细胞研究指南：细胞分离
多细胞生物的每个细胞都携带着相同的遗传学信息。不过，近年来蓬勃发展的单细胞研究告诉我们，每一个细胞都是独一无二的。不同类型的细胞激活特定组合的机制，即使是同类型细胞，基因表达也会出现差异。 那么，细胞之间的哪些差异有生物学意义，哪些差异来自于技术偏好呢？要获得可靠的结果又需要研究多少细胞呢？这
λ噬菌体分离物的快速分析(从平板裂解物中纯化λDNA)实验
实验方法原理 对有希望的基因组或 cDNA 克隆的分析，通常开始于用限制酶消化 λ 噬菌体 DNA 的小量制备物，并对消化产物进行琼脂糖凝胶电泳分析。所获得的 DNA 可用作限制酶的底物、RNA 合成（由噬菌体 SP6、T3 和 T7
λ噬菌体分离物的快速分析(从平板裂解物中纯化λDNA)实验
实验方法原理 对有希望的基因组或 cDNA 克隆的分析，通常开始于用限制酶消化 λ 噬菌体 DNA 的小量制备物，并对消化产物进行琼脂糖凝胶电泳分析。所获得的 DNA 可用作限制酶的底物、RNA 合成（由噬菌体 SP6、T3 和 T7 编码的依赖于 DNA 的 RNA 聚合酶来完成）的模板以
λ噬菌体分离物的快速分析(从平板裂解物中纯化λDNA)实验
对有希望的基因组或 cDNA 克隆的分析，通常开始于用限制酶消化 λ 噬菌体 DNA 的小量制备物，并对消化产物进行琼脂糖凝胶电泳分析。所获得的 DNA 可用作限制酶的底物、RNA 合成（由噬菌体 SP6、T3 和 T7 编码的依赖于 DNA 的 RNA 聚合酶来完成）的模板以及 PCR 的模板。本
中间丝的分离方法实验——从培养的细胞中分离Ⅰ~Ⅲ型中间丝
实验材料细胞试剂、试剂盒蛋白酶抑制剂裂解缓冲液解聚缓冲液组装缓冲液仪器、耗材匀浆器实验步骤1. 从培养皿或瓶中吸去培养基并用 5 ml 含蛋白酶抑制剂的冰冷的 PBS 洗细胞。2. 每 75cm2 瓶或培养皿用 1 ml 冰冷的裂解缓冲液 5 分钟裂解细胞。裂解缓冲液：在 PBS 中加入：1% Tr
中间丝的分离方法实验
实验材料 细胞试剂、试剂盒 蛋白酶抑制剂裂解缓冲液解聚缓冲液组装缓冲液仪器、耗材 匀浆器实验步骤 1. 从培养皿或瓶中吸去培养基并用 5 ml 含蛋白酶抑制剂的冰冷的 PBS 洗细胞。2. 每 75cm2 瓶或培养皿用 1 ml 冰冷的裂解缓冲液 5 分钟裂解细胞。裂解缓冲液：在 PBS 中加入：1
免疫沉淀－(IP)
实验概要免疫沉淀是一种纯化蛋白质的方法。将我们感兴趣的一种蛋白质的抗体与细胞提取液孵育，以使抗体和蛋白质在溶液中结合。然后用protein A/G 耦合的琼脂糖凝胶，从样品中将抗体/抗原复合物提取出来。这种物理方法可将所需蛋白质从样品中分离。然后样品可以通过SDS-PAGE 进行分离并做 Wes