上海交通大学PNAS发表癌症新文章
来自上海交通大学、加州大学圣地亚哥分校的研究人员在新研究中证实，Shp2和Pten在骨髓增生中发挥相互拮抗作用，却协同作用促进了哺乳动物红细胞生成。这一重要的研究发现发布在10月12日的《美国国家科学院院刊》（PNAS）上。 上海交通大学的朱鹤（Helen He Zhu）副研究员及加州大学圣地亚哥分校的冯根生（Gen-Sheng Feng）教授是这篇论文的共同通讯作者。上海交大是论文的第一研究机构。冯根生教授在细胞信号传导及糖尿病与肥胖症的机理研究方面做出了世界领先的突出 贡献，被吴瑞先生列为1949年以来对生物化学领域做出突出贡献的84位旅美华人科学家之一。 骨髓增殖性肿瘤是一组起源于造血干细胞，骨髓一系或多系（如粒细胞系统、红细胞系统、巨核细胞系统和肥大细胞）过度增殖为特征的疾病。白血病俗 称血癌，其特征为白血病细胞在骨髓及其他造血组织中呈恶性、无限制性增生，浸润全身各组织和脏器，同时外周血中血细胞有量和质的变化（红......阅读全文
细胞碱性磷酸酶染色
实验概要细胞碱性磷酸酶染色实验原理胚胎干细胞中碱性磷酸酶的活性比较高， 5-溴-4-氯-3吲哚-磷酸盐（BCIP）能被碱性磷酸酶水解，形成一个中间体，这个中间体能与氯化硝基四氮唑蓝，也称氮蓝四唑（NBT）反应生成白色的中间二聚体和NBT-蓝紫色结晶物。通过染色结果可以相对得知碱性磷酸酶的活性，进
中性粒细胞碱性磷酸酶快速染色法的研究
中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)是一种胞内水解酶。测定其活性对于某些血液病的诊断、鉴别诊断和疗效观察有重要价值。目前国内推荐的改良Gomori钙钴法(简称改良法)，其孵育时间长达4 h，试剂配制繁琐，我们将生物化学中有关磷酸基受体缓冲液的原理应用于NAP染色，即在改良法的基础上，以2-氨基-2-甲
中性粒细胞碱性磷酸酶快速染色法的研究
中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)是一种胞内水解酶。测定其活性对于某些病的诊断、鉴别诊断和疗效观察有重要价值。目前国内推荐的改良Gomori钙钴法(简称改良法)，其孵育时间长达4 h，试剂配制繁琐，我们将生物化学中有关磷酸基受体缓冲液的原理应用于NAP染色，即在改良法的基础上，以2-氨基-2-
中性粒细胞碱性磷酸酶快速染色法的研究
中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)是一种胞内水解酶。测定其活性对于某些血液病的诊断、鉴别诊断和疗效观察有重要价值。目前国内推荐的改良Gomori钙钴法(简称改良法)，其孵育时间长达4 h，试剂配制繁琐，我们将生物化学中有关磷酸基受体缓冲液的原理应用于NAP染色，即在改良法的基础上，以2-氨基-2-甲
中性粒细胞碱性磷酸酶快速染色法的研究(2)
三、讨论 碱性磷酸酶(ALP)催化β-甘油磷酸钠生成甘油和无机磷酸根，AMP作为磷酸基受体，能不断结合磷酸根，加快正向反应速度。磷酸基受体在酶上有结合位点，且遵循Michatelis-Menten动力学，在ALP的催化机理中，转磷酸反应比磷酸水解反应拥有更高的Vmax，因此ALP更易将磷酸根转
正常细胞碱性磷酸酶染色的反应
1）碱性磷酸酶主要存在于成熟中性粒细胞，除巨噬细胞可呈阳性反应外，其他血细胞均呈阴性反应。2）成熟中性粒细胞碱性磷酸酶积分值的计算：在油镜下，计数100个成熟中性粒细胞（包括中性分叶核粒细胞和中性杆状核粒细胞）。分别记录其分级情况，全部阳性反应的细胞之和即为阳性率，将所有阳性反应细胞均以“+”级表示
中性粒细胞碱性磷酸酶（NAP）染色
一、原理：细胞内碱性磷酸酶能分解磷酸萘酚AS-BI为磷酸和芳基萘酰胺，后者与重氮盐（固兰BB）偶联，形成不溶性的兰色沉淀物。二、结果判定：正常血细胞的染色反应碱性磷酸酶主要存在于中性粒细胞，除巨噬细胞可呈阳性反应外，其他血细胞均呈阴性反应。结果应根据成熟中性粒细胞胞浆内兰色颗粒所占胞浆面积，颗粒大小
中性粒细胞碱性磷酸酶染色（NAP）
实验原理偶氮偶联法（Kaplow法）：中性粒细胞胞浆中的碱性磷酸酶在pH 9.2-9.8缓冲液中，能水解磷酸萘酚钠，并释放出磷酸与萘酚。再以重氮盐与萘酚偶联成不溶性有色偶氮染料沉淀于胞浆中。实验方法材料：1. 10%甲醛甲醇固定液甲醛 10 ml甲醇 90 ml20C ~80C避光保存。2. 丙二醇
中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)染色
（1）参考值：成人N AP阳性率为10%～40%；积分值为40～80（分）。（2）临床意义1）感染性疾病：急性化脓菌感染时NAP活性明显增高，病毒性感染时其活性在正常范围或略减低。2）慢性粒细胞白血病时NAP活性明显减低，积分值常为0。类白血病反应时N AP活性极度增高，故可作为与慢性粒细胞白血病鉴
中性粒细胞碱性磷酸酶的基本介绍
中性粒细胞碱性磷酸酶（NAP）是其胞质特殊颗粒释放的一种在碱性条件（pH9.3～9.6）能催化各种醇和酚的单磷酸酯水解的非特异性水解酶。NAP主要存在于成熟阶段的中性粒细胞，其他成分如嗜酸、嗜碱、淋巴、单核以及巨核细胞，血小板，浆细胞等均为阴性反应。NAP活力可反映成熟粒细胞的成熟程度和功能，随
关于蛋白酪氨酸磷酸酶的研究方法介绍
以5 mmol/L 对硝基苯磷酸二钠(pNPP)为反应底物, 在0.01 mol/L NaAc-HAc pH5.0, 1 mmol/L EDTA钠盐体系中, 加入不同量的PTP1Bc蛋白, 37°C反应10 min, 加 0.2 mol/L NaOH终止反应, 用分光光度计测A405。同时做含P
细胞增殖的检验方法：酸性磷酸酶法
酸性磷酸酶法1．96孔细胞培养板中培养细胞，去培养液。用0.01mol/L PBS洗涤1次（如为悬浮细胞则用离心洗涤）。2．去洗涤液后加入磷酸酶底物100μl/孔。3．37℃，孵育1～4h。4．加入0.1mol/L氢氧化钠10μl/孔。5．在多孔酶标仪上405nm处测光吸收度，将细胞培养板其中不含细
中性粒细胞碱性磷酸酶染色（偶氮偶联法）
1. 实验原理在PH9.2-9.8的缓冲溶液中，细胞中的碱性磷酸酶能将底物磷酸苯酚钠水解，生成 α-苯酚和磷酸钠，再以稳定的重氮盐与酚偶联成不溶性有色偶氮染料沉淀于胞浆中。2. 标本采集2.1 病人准备：了解病人是否对局麻药有过敏史，凝血因子严重缺陷引起的出血性疾病，穿刺部位有炎症或有畸形，晚期妊娠
细胞增殖的检验方法——酸性磷酸酶法
1、96孔细胞培养板中培养细胞，去培养液。用0.01mol/L PBS洗涤1次（如为悬浮细胞则用离心洗涤）。2、去洗涤液后加入磷酸酶底物100μl/孔。3、37℃，孵育1～4h。4、加入0.1mol/L氢氧化钠10μl/孔。5、在多孔酶标仪上405nm处测光吸收度，将细胞培养板其中不含细胞，同样处理
中性粒细胞碱性磷酸酶染色临床意义
中性粒细胞碱性磷酸酶活性增高可见于细菌性感染、类白血病反应、再生障碍性贫血、急慢性淋巴细胞白血病、多发性骨髓瘤等；活性下降见于慢性粒细胞白细胞、阵发性睡眠性血红蛋白尿症、骨髓增生异常综合征等。可用于慢性粒细胞白血病和类白血病反应的鉴别、细菌性感染与病毒性感染的鉴别、再生障碍性贫血与阵发性睡眠性血
蛋白酪氨酸磷酸酶参与干细胞分化的作用
捷克马萨利克大学医学院科学家在《细胞 干细胞》上载文认为，PTP-1B与一些重要的细胞过程有关，PTP-1B与此前认为对干细胞分化有关的两种分子一样，参与决定干细胞的分化方向，并可能是关键的一种分子。在胚胎发育初期干细胞分化过程中，PTP-1B活跃的地方，干细胞将发育为内脏器官，活性低的地方，干
磷酸酶在免疫学研究方面的应用介绍
在免疫学研究方面, 已广泛应用AP 标记抗体进行酶联免疫荧光反应(E LISA)和Western 印迹分析, 即将A P 与显色剂或去磷酸化后能发光的底物相互作用来揭示靶与检测酶复合物的存在, 与辣根过氧化物酶相比, AP 用作标记酶的优点是稳定性高、灵敏度高, 缺点是成本高、标记困难。在生物化
中性粒细胞碱性磷酸酶染色标准操作规程
1. 实验原理在PH9.2-9.8的缓冲溶液中，细胞中的碱性磷酸酶能将底物磷酸苯酚钠水解，生成 α-苯酚和磷酸钠，再以稳定的重氮盐与酚偶联成不溶性有色偶氮染料沉淀于胞浆中。2. 标本采集2.1 病人准备：了解病人是否对局麻药有过敏史，凝血因子严重缺陷引起的出血性疾病，穿刺部位有炎症或有畸形，晚期妊娠
参与淋巴细胞激活的蛋白磷酸酶主要是？
蛋白磷酸酶的作用和蛋白激酶相反。根据脱磷酸化的氨基酸残基的不同，蛋白磷酸酶也分成蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP，PTPase)和丝氨酸/苏氨酸磷酸酶。参与淋巴细胞激活的蛋白磷酸酶主要有：①CD45：该分子胞内段的两个结构域发挥PTP的作用，因而CD45属于受体型蛋白酪氨酸磷酸酶，在对抗瓢kPTK的作用和启
中性粒细胞碱性磷酸酶积分及临床意义
人体有多种细胞内含有一种叫做碱性磷酸酶的物质。血细胞内也含有这种物质，但多数不表现出活性，即处于“沉睡”状态，只有中性粒细胞的成熟阶段表现出碱性磷酸酶活性，我们称之为中性粒细胞碱性磷酸酶(简称N—ALP)。中性粒细胞碱性磷酸酶存在于成熟中性粒细胞的胞浆内，可以通过钙—钴方法使之着色来显示。然后计算
细胞生长检测7：碱性磷酸酶检测法（AKP法）
碱性磷酸酶检测法（AKP法）1．按MTT法用细胞因子处理靶细胞适当时间，用PBS洗去死亡细胞，洗两次。2．向96孔细胞培养板各孔中加0.2ml新鲜配制的底物液（0.2mol/L 硼酸，1mmol/L MgCl2，1.2mmol/L甲伞基磷酸）。在37℃ 5％ CO2的饱和水汽二氧化碳培养箱中培养3小
简述中性粒细胞碱性磷酸酶的临床表现
增高：细菌性感染、急淋、中性粒细胞白血病、免疫性疾病等。 降低：慢粒白血病、病毒感染、急性白血病等。 NAP可用于细菌和病毒感染的鉴别：急性化脓性感染时NAP活性明显升高，病毒性感染时其活性在正常范围或略低。 NAP可用于慢性粒细胞白血病与类白血病反应的鉴别：慢性粒细胞白血病的NAP活性明
细胞生长检测方法：碱性磷酸酶检测法（AKP法）
1、按MTT法用细胞因子处理靶细胞适当时间，用PBS洗去死亡细胞，洗两次。2、向96孔细胞培养板各孔中加0.2ml新鲜配制的底物液（0.2mol/L 硼酸，1mmol/L MgCl2 ，1.2mmol/L甲伞基磷酸）。在37℃ 5％ CO2 的饱和水汽CO2 培养箱中培养3小时。3、在荧光计数仪上测
磷酸酶制备实验——膜蛋白酪氨酸磷酸酶（PTP）
试剂、试剂盒提取缓冲液仪器、耗材微型离心机Superose 6 柱子实验步骤1. 用 1 ml 含有 1% NP-40 去污剂的提取缓冲液提取颗粒部分（按照上面组织/细胞的制备和提取所述方法准备）15 分钟，用一个小匀浆器固定在微型离心管里匀浆或者通过微量移液器吸头尖反复吸入和排出悬浮液以确保沉淀分
磷酸酶－a－的测定
实验方法原理 4-α-D-葡聚糖：正磷酸-α-D-葡萄糖基转移酶。酶断裂多糖的α-1，4-糖苷键：（葡萄糖）n＋Pi →（葡萄糖）n-1＋葡萄糖-1-P实验中反应与葡萄糖磷酸变位酶偶联：葡萄糖-1-P → 葡萄糖-6-P并且 6-磷酸葡萄糖脱氢酶催化：葡萄糖-6-P＋NADP＋ → 葡萄糖酸-6-P
磷酸酶制备实验
蛋白丝/苏氨酸磷酸酶,1型和2A型(PP-1和PP-2A) 膜蛋白酪氨酸磷酸酶（PTP） 实验材料 细胞
磷酸酶制备实验
蛋白丝/苏氨酸磷酸酶,1型和2A型(PP-1和PP-2A)膜蛋白酪氨酸磷酸酶（PTP）实验材料细胞 试剂、试剂盒缓冲盐清洗液
磷酸酶制备实验
实验材料 细胞试剂、试剂盒 缓冲盐清洗液抽提缓冲液实验步骤 一、组织/细胞制备和提取1. 配制下列溶液：(1) 缓冲盐清洗液：20 mmol/L 的 MOPS 缓冲液，pH 7.5（配成 100 ml）5 mmol/L 的 EDTA5 mmol/L 的 EGTA120 mmol/L 的 NaCl(2
碱性磷酸酶的测定实验_细菌碱性磷酸酶
实验材料酶样品试剂、试剂盒Tris-HCl磷酸硝基苯仪器、耗材分光光度计实验步骤实验混合物25℃ 时，于 405 nm 处吸收值降低，ε405＝18.5×103 l/（mol·cm）。
中性粒细胞碱性磷酸酶（NAP）染色及临床意义
病情分析：白血病不能单纯凭白细胞脂酶诊断的主要是要做骨髓穿刺检查。白细胞脂酶是鉴别白血病的类型。指导意见：建议你要做血液细胞形态检查要做骨髓穿刺检查。