磷酸酶制备实验
实验材料 细胞试剂、试剂盒 缓冲盐清洗液抽提缓冲液实验步骤 一、组织/细胞制备和提取1. 配制下列溶液：(1) 缓冲盐清洗液：20 mmol/L 的 MOPS 缓冲液，pH 7.5（配成 100 ml）5 mmol/L 的 EDTA5 mmol/L 的 EGTA120 mmol/L 的 NaCl(2) 抽提缓冲液20 mmol/L 的 MOPS，pH 7.5（配成 10 ml）5 mmol/L EDTA5 mmol/L EGTA60 mmol/L 的 β-巯基乙醇 (1:250 原液）10% 甘油加新鲜加入的 1 mmol/L PMSF，PMSF 在异丙醇中制成 100 mmol/L 的储存液。2. 准备细胞或组织(1) 对于培养细胞① 除去绝大部分的培养基，直接把培养容器（培养皿或培养瓶）放在冰上以冷却组织培养细胞。② 用 5 ml 冰冷的缓冲盐洗涤液冲洗培养容器两次，倒掉洗液，加入 1 ml 洗液用橡皮细胞刮把细胞收集到 1......阅读全文
磷酸酶制备实验
蛋白丝/苏氨酸磷酸酶,1型和2A型(PP-1和PP-2A) 膜蛋白酪氨酸磷酸酶（PTP） 实验材料 细胞 试剂、试剂盒 缓冲盐清洗液
磷酸酶制备实验
蛋白丝/苏氨酸磷酸酶,1型和2A型(PP-1和PP-2A) 膜蛋白酪氨酸磷酸酶（PTP） 实验材料
磷酸酶制备实验
实验材料 细胞试剂、试剂盒 缓冲盐清洗液抽提缓冲液实验步骤 一、组织/细胞制备和提取1. 配制下列溶液：(1) 缓冲盐清洗液：20 mmol/L 的 MOPS 缓冲液，pH 7.5（配成 100 ml）5 mmol/L 的 EDTA5 mmol/L 的 EGTA120 mmol/L 的 NaCl(2
磷酸酶制备实验——膜蛋白酪氨酸磷酸酶（PTP）
试剂、试剂盒提取缓冲液仪器、耗材微型离心机Superose 6 柱子实验步骤1. 用 1 ml 含有 1% NP-40 去污剂的提取缓冲液提取颗粒部分（按照上面组织/细胞的制备和提取所述方法准备）15 分钟，用一个小匀浆器固定在微型离心管里匀浆或者通过微量移液器吸头尖反复吸入和排出悬浮液以确保沉淀分
磷酸酶 a 的测定实验
基本方案 实验方法原理 4-α-D-葡聚糖：正磷酸-α-D-葡萄糖基转移酶。 酶断裂多糖的α-1，4-糖苷键： （
磷酸酶 a 的测定实验
实验方法原理 4-α-D-葡聚糖：正磷酸-α-D-葡萄糖基转移酶。 酶断裂多糖的α-1，4-糖苷键： （葡萄糖）n＋Pi →（葡萄糖）n-1＋葡萄糖-1-P 实验中反应与葡萄糖磷酸变位酶偶联： 葡萄糖-1-P → 葡萄糖-6-P 并且 6-磷酸葡萄糖脱氢酶催化
碱性磷酸酶染色实验
实验方法原理 细胞组织中的碱性磷酸酶在碱性（PH9.0－9.6）环境下使作用液中的底物（a一磷酸萘酚钠）水解，产生出a萘酚，然后再与偶氮盐偶联，生成不溶性的耐晒染料（最终产物的颜色因所用偶氮盐的品种不同而有所不同）．试剂、试剂盒 磷酸萘酚钠偶氮盐丙二醇实验步骤 一、实验试剂：底物作用液的配制：α－磷
碱性磷酸酶染色实验
实验方法原理细胞组织中的碱性磷酸酶在碱性（PH9.0－9.6）环境下使作用液中的底物（a一磷酸萘酚钠）水解，产生出a萘酚，然后再与偶氮盐偶联，生成不溶性的耐晒染料（最终产物的颜色因所用偶氮盐的品种不同而有所不同）．试剂、试剂盒磷酸萘酚钠偶氮盐丙二醇实验步骤一、实验试剂：底物作用液的配制：α－磷酸萘酚
碱性磷酸酶的测定实验_细菌碱性磷酸酶
实验材料酶样品试剂、试剂盒Tris-HCl磷酸硝基苯仪器、耗材分光光度计实验步骤实验混合物25℃ 时，于 405 nm 处吸收值降低，ε405＝18.5×103 l/（mol·cm）。
腺苷三磷酸酶的测定实验
基本方案 实验方法原理 ATP → ADP＋Pi 很多 ATP 酶是与膜组分联系在一起的酶，比如氧化磷