检测致畸物的gfp基因工程菌的构建
摘 要 RecA与UvrA是细胞SOS系统中重要的修复蛋白,在细胞DNA损伤后诱导表达. 将报告基因绿色荧光蛋白基因( gfpmut3a)分别置于recA和uvrA启动子调控下,构建成质粒pRecAgfp和pUvrAgfp,并转化E. coli DH5α,构建成检测菌株ERS101和EUS101. 试验发现,菌株ERS101和EUS101在致畸物吖啶橙处理后, GFP的表达量增高,菌悬液经507 nm的蓝光激发后产生的绿色荧光明显增强,且与吖啶橙的浓度具有一定的相关性,即使在0. 5μg mL - 1的吖啶橙诱导下也能检测到荧光增强效应. 对硝基酚等多种致畸物处理后的检测菌株均有荧光增强效应。点击这里进入下载页面：进入下载页面......阅读全文
人工构建酵母工程菌能够自动合成内酯化合物
愈创木烷型内酯具有诸多药用活性，很多这类化合物具有较强抗癌功效，此类化合物分子结构中的内酯基团是其活性基团。中国科学院武汉植物园科研人员近日揭开了内酯基团形成的神秘面纱，发现人工构建的酵母工程菌能够自动化合成内酯化合物。 愈创木烷型内酯类化合物在植物中通常只有万分之几的含量，如此低含量的合成限
产1,3丙二醇新型基因工程菌的构建
摘 要 以甘油为底物转化生产1,3-丙二醇的生物合成途径中，往往由于还原力NADH的不足，限制了1,3-丙二醇的合成，引起中间代谢产物3-羟基丙醛累积，进而抑制甘油脱水酶的活性，阻碍菌体的生长，严重影响1,3-丙二醇的合成途径. 为了解决合成途径中还原力不足这一主要矛盾，本文以大肠杆菌和克雷伯氏菌染
真核表达载体pcDNA3.1GFP的构建
【原理】引物中设计入限制酶位点：由于PCR引物的5'末端可以增加一些非互补碱基，因此可以在两引物的5'末端设计单限制酶或双限制酶切位点。这样得到的PCR产物用限制酶消化产生粘性末端，即可与有互补粘端的载体DNA重组。这种克隆方法效率较高，且当两引物中设计不同酶切位点时，可有效地定向克
农科院饲料所构建新型羽毛降解工程菌
近日，记者从中国农业科学院饲料研究所获悉，由该所姚斌研究员领衔的饲用酶工程创新团队通过筛选获得野生型快速羽毛降解菌株——解淀粉芽孢杆菌K11 （Bacillus amyloliquefaciens K11），该菌株能在24小时内，有效将羽毛降解，其降解效率是目前普遍使用的地衣芽孢杆菌的3倍以上。
六六六与甲基对硫磷生物降解技术取得新进展
中科院动物所专家在六六六与甲基对硫磷生物降解技术方面的研究于日前取得新进展。 六六六(HCH)是一种广谱性有机氯杀虫剂，我国在上世纪六、七十年代曾大量施用。由于六六六是一种“持久性有机污染物”，已对人类健康和环境构成日趋严重的威胁。2001年5月22日至23日，联合国环境署在斯德哥尔摩组织
关于基因工程菌的基本介绍
基因工程菌，是指将目的基因导入细菌体内使其表达，产生所需要的蛋白的细菌。如大肠杆菌。基因工程的核心技术是DNA的重组技术。重组即利用供体生物的遗传物质或人工合成的基因，经过体外或离体的限制酶切割后与适当的载体连接起来形成重组DNA分子，然后再将重组DNA分子导入到受体细胞或受体生物构建转基因生物
基因工程菌株的培养与观察
[实验原理]大肠杆菌是含有长约3000Kb的环状染色体的棒状细菌，它能在仅含碳水化合物（如葡萄糖，提供碳源和能量）和提供氮、磷、微量元素的无机盐的极限培养基上快速生长。如果用含氨基酸、核苷酸前体、维生素以及其它一些细菌不能合成的代谢成分的丰富培养基来培养，那么大肠杆菌会生长的更快。大多数应用于DNA
GFP抗体|GFP抗体检测GFP、EGFP、YFP、EYFP、CFP抗体
检测GFP、EGFP、YFP、EYFP、CFP的GFP抗体GFP是绿色萤光蛋白（Green Fluorescent Protein）的简称，由238个氨基酸残基组成。GFP蛋白质最早是由下村脩等人在1962年在一种学名Aequorea victoria的水母中发现。其基因所产生的蛋白质，在蓝色波长范
中科院“先进生物制造工程菌株的构建与应用”通过验收
11月24日至25日，中国科学院重点部署项目“先进生物制造工程菌株的构建与应用”验收会在山东寿光召开。来自国内高校、企业、院内研究所的9位专家组成验收专家组。 24日下午，专家组及与会人员现场考察了山东兰典生物科技股份有限公司、山东寿光巨能金玉米有限公司的丁二酸、D-乳酸工业规模生产线及两家企
扁枝衣霉素的生物合成及工程菌株构建研究获进展
原文地址：http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/5/499758.shtm
T克隆绿色荧光蛋白（GFP）基因实验
【原理】经TaqDNA聚合酶扩增后的PCR产物末端都带有单个A。正是基于这一原理，pGEM-T质粒经EcoRV切成平端后，在开口端加上一个T制成T载体，一方面避免了自身环化，另一方面由于T-A互补，从而提高了T载体与PCR产物之间的连接效率。由于T-A克隆只需纯化PCR产物，因而操作较为简便。pGE
基因构建策略
基因构建策略下面我们介绍一下转基因和基因打靶载体构建策略的一般原则。转基因转基因是线性化的DN**段，通常包含一个启动子（promoter），一个cDNA，一个内含子和一个多聚腺苷酸信号，常常克隆到一个质粒载体上。当注射到小鼠受精卵的前核内时，它们整合到随机的位点，通常是包含不同的拷贝数从头到尾的多
中科院团队构建高效工程菌株－助力高盐废水处理
高盐废水作为工业废水中的一种特定类型，主要来自化工厂及石油和天然气的采集加工等，包含悬浮物、有机物、重金属、有害化学物质和营养盐等污染物，对环境和生态系统造成了巨大的影响。因此，去除高盐废水中的有机污染物对生态环境可持续发展至关重要。5月7日，中国科学院深圳先进技术研究院客座研究员戴俊彪与上海交通大
关于基因工程菌的主要作用的介绍
糖尿病是患者胰脏的胰岛细胞不能分泌胰岛素，血糖过高而致。糖尿病患者的死亡率仅次于癌症和心脏病。全世界约有6000万糖尿病患者。 从1921年到目前为止，医学上一直采用能降低人体内血糖含量的胰岛素治疗糖尿病。但胰岛素以往主要靠从牛、猪等大牲畜的胰腺中提取，一头牛或一头猪的胰脏只能产生300个单位
基因工程菌－海洋线虫系统的生物测定
实验概要本实验在成功构建了表达Cip蛋白的重组酿酒酵母的基础上，对其应用于Panagrellus redivivus线虫的生物测定进行了探讨，并与重组大肠杆菌比对。主要试剂1. 主要试剂 1) 蛋白胨（Peptone)，广州环凯微生物科技有限公司； 2) 尿嘧啶（Uracil)，AMRESC
基因工程菌用于肠道疾病无创检测
肠道微生物在调节和反映人体身体功能方面非常重要，微生物组的突然变化可能成为疾病检测的参考指标。将合成生物学研究用于设计构建特定化学物质的细菌传感器，能够帮助发现某些肠道疾病的微小信号。 例如，肠道中硫代硫酸盐和连四硫酸盐含量的变化通常被认为与结肠炎的发展相关，如果能够利用细菌传感器对其进行体内
维生素A致畸作用介绍
13-顺-视黄酸具有致畸作用，因而担心人类大剂量补充维生素A可能会有致畸作用。大量动物实验证实，过量维生素A可致胚胎畸形。流行病学资料显示，过量摄入预先形成的维生素A可导致出生缺陷。最敏感的时期为胚胎生成期（孕早期），维生素A过量引起的出生缺陷主要发生于由脑神经靖演变的器官，如颅面畸形、中枢神经系统
基因枪轰击洋葱表皮观察GFP瞬时表达
实验概要本实验在构建了OsAGAP瞬时表达载体的基础上，采用基因枪轰击洋葱表皮观察了GFP的瞬时表达。主要试剂高渗培养液(MS无机盐、40g/L甘露醇)，高渗固体培养基(MS无机盐、40g/L甘露醇、0.7% agar)，无水乙醇，无菌去离子水，12.5 M CaCl2，0.1 M亚精胺，等渗培养基
基因枪轰击洋葱表皮观察GFP瞬时表达
实验试剂高渗培养液(MS无机盐、40g/L甘露醇)，高渗固体培养基(MS无机盐、40g/L甘露醇、0.7% agar)，无水乙醇，无菌去离子水，12.5 M CaCl2 ，0.1 M亚精胺，等渗培养基(MS培养基)实验设备高速离心机，1.5 ml Ep管，涡旋器，超净台，基因枪，气瓶，激光共聚焦显微
高通量筛选在基因工程菌培养的应用
高通量筛选基因工程菌（如E.coli）时，如果先从固体培养基中挑取单菌落、在含有抗生素的液体培养基中放大培养，多少也要等上4-6个小时才能够获得适合检测的菌体量。现在，IKA 帮您大大缩短工作时间——使用恒温摇床KS 4000 ic的通用夹具，您即可固定8块深孔板，而无需单独购买其它夹具。 KS 4
研究称大雾中含多种致癌和致畸物－汽车尾气所致
昨日，大学城，清洁工在晨雾中工作。 继本月16日一场大面积雨雾天气笼罩山城后，山城宣告进入多雾的季节。昨早，我市北碚、长寿等地气象局陆续发布“大雾黄色预警”信号。气象专家预测，今天，山城天气还将以多云为主，局部地区还将出现轻雾天气。到了明天，随着降雨的到来，将冲走雾
GFP(绿色荧光蛋白基因)的免疫印迹1
[实验原理]免疫印迹（Western blotting 或 Immunoblotting）一般由凝胶电泳、样品的印迹和免疫学检测三个部分组成。第一步是做SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳，使待测样品中的蛋白质按分子量大小在凝胶中分成带。第二步把凝胶中已分成条带的蛋白质转移到一种固相支持物上，用得最多的材料
GFP(绿色荧光蛋白基因)的免疫印迹2
第二部分：免疫印迹染色[仪器、材料与试剂](一)仪器与器具1．电泳仪(要求为大电流低电压)2．电泳转移槽及转移夹3．水平摇床4．小塑料盒5．镊子6．搪瓷盘(二)材料1．醋酸纤维膜2．滤纸3．一次性塑料手套(三)试剂1．转移电泳缓冲液25mmo1／L Tris，192mmo1／L 甘氨酸，20％甲醇，
简述异维A酸的致畸作用
动物实验证明口服异维A酸能导致发育畸形、流产和死胎。在胎儿器官形成的早期给药，可导致中枢神经系统和心血管系统的发育异常；孕晚期给药可导致胎儿肢体短缺、泌尿系统缺陷。因此临床上使用异维A酸时，应要求育龄妇女在治疗前1月及治疗期间要采取有效避孕措施，在治疗结束半年后才能生育。
GFP单抗的概述
GFP单抗，又叫GFP单克隆抗体，或维多利亚水母绿色荧光蛋白单抗，是蛋白质研究过程中非常重要的工具，尤其是在鉴定重组的带有GFP标签的蛋白质是否表达或者表达的相对丰度时有着极重要的作用。
iRNA干扰GFP表达实验
【原理】RNA沉默是发生在植物（转录后基因沉默或共抑制）、动物（RNA干扰，RNAi）和真菌（消除作用）等真核生物细胞中的的特异性和高效率的mRNA降解机制。在哺乳动物细胞中，RNAi通常用于阻断特定基因的表达从而研究基因的功能。将靶向特定基因的大约21碱基长短的双链siRNAs(smallinte
iRNA干扰GFP表达实验
实验概要本文介绍了iRNA干扰GFP表达实验的原理及方法步骤。实验原理RNA沉默是发生在植物（转录后基因沉默或共抑制）、动物（RNA干扰，RNAi）和真菌（消除作用）等真核生物细胞中的的特异性和高效率的mRNA降解机制。在哺乳动物细胞中，RNAi通常用于阻断特定基因的表达从而研究基因的功能。将靶向特
基因置换实验——构建融合蛋白
实验材料菌株BY4741质粒PDB118试剂、试剂盒磷酸盐缓冲液仪器、耗材YPD 平板YPD 液体培养基血球计数板SC-his平板实验步骤YPD 平板 第 1 天将菌株 7-3 在 YPD 平板上划单克隆，30°C 下培养两天。第 3 天挑取单克隆，在 5 mlYPD 液体培养基中培养，30°C 过
转基因斑马鱼的构建
实验概要本实验对斑马鱼导入含 EGFP的质粒，观察其在动物体内的表达情况，在斑马鱼体内，绿色荧光蛋白从原肠胚到出苗期均能在荧光显微镜下观察到绿色荧光。主要试剂EGFP、绿色荧光蛋白基因、pEGFP-N2载体、E.coli主要设备试管、试管架、可调式微量加样器、电泳仪、电泳槽、染色缸、42℃恒温水浴箱
工程菌高密度发酵
实验方法原理发酵工业是既古老又崭新的工业，它的形成经历了漫长的岁月。随着科学技术的发展，发酵工业不断地得到发展和充实。现代发酵工业就是传统的发酵技术与现代DNA重组、细胞融合等新技术相结合，而发展起来的现代生物技术，并通过现代化学工程技术生产有用物质或直接用于工业化生产的一种大工业体系，是生物技术的