杆状病毒衣壳蛋白可以组装为柔性纳米管
近日,中国科学院武汉病毒研究所曹晟课题组在杆状病毒衣壳蛋白组装体结构及应用方面取得新进展。研究发现杆状病毒衣壳蛋白可以在体外条件下可控地组装为柔性纳米管,该纳米管具有两种明显不同的组装形式,可以作为纳米平台高密度地展示多种外源蛋白。相关工作在线发表于美国化学会《应用材料与界面》(ACS Applied Materials & Interfaces)。HaCP纳米管的两种组装形式 具有丝状形态的病毒,如烟草花叶病毒(TMV)和M13噬菌体,长期以来被研究作为纳米材料支架用于装载功能分子。但是,有两个主要原因限制了它们的应用范围:一是丝状病毒的衣壳蛋白(CP)在组装时通常需要DNA或RNA分子的参与;二是以融合蛋白的形式直接对CP进行修饰,常会因融合蛋白带来的空间位阻,破坏病毒衣壳的正常组装。为了克服这些限制,研究人员通过建立一种可控的组装策略,成功将杆状病毒衣壳蛋白在体外条件下组装为柔性的生物纳米管。HaCP纳米管能......阅读全文
杆状病毒衣壳蛋白可以组装为柔性纳米管
近日,中国科学院武汉病毒研究所曹晟课题组在杆状病毒衣壳蛋白组装体结构及应用方面取得新进展。研究发现杆状病毒衣壳蛋白可以在体外条件下可控地组装为柔性纳米管,该纳米管具有两种明显不同的组装形式,可以作为纳米平台高密度地展示多种外源蛋白。相关工作在线发表于美国化学会《应用材料与界面》(ACS Appl
变异AAV衣壳蛋白
腺相关病毒(AAV)载体是治疗多种人类疾病基因传递的主要平台。最近在开发临床所需的AAV衣壳、优化基因组设计和利用革命性生物技术方面的进展对基因治疗领域的发展作出了重大贡献。在AAV介导的基因替换、基因沉默和基因编辑方面的临床和临床上的成功帮助AAV作为理想的治疗载体获得了广泛的应用。 腺相关
武汉病毒所病毒双特异性荧光标记研究取得进展
近日,中科院武汉病毒研究所王汉中领导的研究团队在利用纳米材料标记病毒以用于病毒与宿主细胞相互作用的可视化相关研究中继续取得研究进展,相关文章发表于生物材料领域的专业期刊Biomaterials上。 病毒的单颗粒标记和示踪技术为我们揭示病毒和宿主细胞间的相互作用过程提供新的视野和平台。标记了
杆状病毒系统蛋白质表达实验
实验方法原理 分析方案依赖于表达蛋白的天然特性。实验材料 草地夜蛾(Sf9)细胞高滴度的重组杆状病毒储液试剂、试剂盒 PBS1×SDS样品缓冲液仪器、耗材 含 10% 胎牛血清(FBS)的TNM-FH昆虫培养基60 mm 组织培养皿27℃ 培养箱(湿度可选)15 ml 聚丙烯离心管带有 GH-3.7
杆状病毒系统蛋白质表达实验
基本方案 小规模表达 辅助方案1 蛋白质生产高峰期的确定 辅助方案2重组蛋白的代谢标记 基本方案2 重组蛋白大规模生产 实验方法原理
PNAS论文揭示风疹病毒的衣壳蛋白结构
风疹病毒(Rubella virus, RV)是RNA病毒,属于披膜病毒科(Togavirus),是限于人类的病毒。电镜下多呈不规则球形,直径50~70nm的核心,风疹病毒的抗原结构相当稳定,现知只有一个血清型。风疹病毒易发生垂直感染,孕妇妊娠早期初次感染风疹病毒后,病毒可通过胎盘屏障进入胎
温和噬菌体衣壳蛋白防御超感染研究获进展
近日,中国科学院南海海洋研究所热带海洋生物资源与生态重点实验室研究员王晓雪团队解析了丝状噬菌体编码的衣壳蛋白在细菌宿主超感染排除和噬菌体防御方面的作用。相关研究发表于《环境微生物学》。噬菌体是一种侵染细菌的病毒。烈性噬菌体在侵染细菌宿主后会迅速繁殖,以裂解细胞的方式从细菌宿主中释放。温和噬菌体在侵染
武汉病毒所杆状病毒核心基因ha72功能研究取得进展
近期,中科院武汉病毒研究所系统病毒学研究组在杆状病毒ODV特异性囊膜蛋白HA72的功能研究方面取得重要进展。相关结果发表在国际病毒学杂志Journal of Virology上。 杆状病毒包含37个核心基因,它们在病毒生活史中发挥着重要的作用。其中棉铃虫核型多角体病毒(Helicove
中国学者J.-Virol解析杆状病毒核心基因ha72
近期,中科院武汉病毒研究所系统病毒学研究组在杆状病毒ODV特异性囊膜蛋白HA72的功能研究方面取得重要进展。相关结果发表在国际病毒学杂志Journal of Virology上。 杆状病毒包含37个核心基因,它们在病毒生活史中发挥着重要的作用。其中棉铃虫核型多角体病毒(Helicove
高通量筛选技术揭示AAV衣壳蛋白是如何演化的?
在最近一项研究中,研究人员使用腺相关病毒(AAV)载体衣壳库的高通量筛选来最大程度地获得具有所需特性的AAV变异体的可能性。这些实验的结果使他们获得了一些意想不到的知识,相关结果发表在最近一期的《Human Gene Therapy》杂志上。(图片来源:www.pixabay.com) 文章作
杆状病毒系统蛋白质表达实验——重组蛋白的代谢标记
实验方法原理由于重组蛋白表达的时候,宿主蛋白质的合成基本终止,因此体内代谢标记是检测重组蛋白的敏感方法。所有的标记氨基酸都掺入到晚期病毒特异的蛋白质(包括目的蛋白)的合成。35S 标记的甲硫氨酸和半胱氨酸是常用的放射标记的氨基酸。为了获得更好的结果,在标记之前细胞内的这两种氨基酸应当被清除:将细胞在
杆状病毒系统蛋白质表达实验——重组蛋白大规模生产
实验材料草地夜蛾细胞(Sf 9)高滴度重组病毒仪器、耗材无血清昆虫细胞培养基1~10 L 旋转培养瓶10.16 cm 管索张力器多旋转瓶揽拌台27℃ 培养箱供气泵实验步骤1. 在悬浮培养液中培养 Sf 9 细胞,并使之适应无血清培养液(基本方案 1)。2. 准备旋转培养瓶,用于按比例扩增 Sf 9
概述杆状病毒表达系统的生物特性
杆状病毒(又称多角体病毒或颗粒体病毒)有两类病毒体[1],芽殖病毒体(buded virion,BV)和多角体源性病毒体(polyhedron derived virion,PDV)。在病毒复制过程中,首先产生BV,BV核壳产生后通过芽生方式从细胞中释放出来,再感染其它细胞,复制后期产生PDV,
杆状病毒介绍
状病毒是一类在自然界中专一性感染节肢动物的DNA病毒,病毒粒子呈杆状,基因组为双链环状DNA分子,DNA以超螺旋形式压缩包装在杆状衣壳内,大小在90~180 Kb之间。目前杆状病毒作为高效、安全的无公害生物虫剂广泛应用于害虫防治。 杆状病毒只来源于无脊椎动物,虽然已发现600多种杆状病毒,但进行
杆状病毒系统蛋白质表达实验——小规模表达
实验方法原理分析方案依赖于表达蛋白的天然特性。实验材料草地夜蛾(Sf9)细胞高滴度的重组杆状病毒储液试剂、试剂盒PBS1×SDS样品缓冲液仪器、耗材含 10% 胎牛血清(FBS)的TNM-FH昆虫培养基60 mm 组织培养皿27℃ 培养箱(湿度可选)15 ml 聚丙烯离心管带有 GH-3.7 水平转
Science:HIV衣壳蛋白惊现水结构,抗艾药物新思路
全球约有35万HIV感染者,而HIV一直在不断地适应并发生变异。为了应对这一情况,科学家们试图找到清晰的HIV关键蛋白质,并解释其在病毒生命周期至关重要的作用。有了蛋白质的清晰图像,科学家们能够更好地了解身体如何对抗病毒,以帮助未来生产新的,更有效的抗病毒药物。在最近几年,科学家已经使用各种技术
关于衣壳的组成介绍
与病毒相比,壳微粒是单纯的蛋白质分子,有的是由本身数个结构单位聚集而成。作为衣壳的基本形态,有的由壳微粒呈螺旋状排列的圆柱状(烟草花叶病毒等)有的由壳微粒排列成等轴状的正二十面体(腺病毒等)。 衣壳是包围在病毒核酸外的一层蛋白质,是由一定数量的壳粒组成。壳粒是衣壳的形态学亚单位。由于病毒核酸的
RNA衣壳化的概念
中文名称RNA衣壳化英文名称RNA encapsidation定 义RNA被蛋白质衣壳包裹生成RNA病毒的过程。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
关于衣壳的功能简介
1、保护病毒核酸,使之免遭环境中的核酸酶和其它理化因素破坏。 2、参与病毒的感染过程。因病毒引起感染首先需要特异地吸附于易感细胞表面,而无包膜病毒是依靠衣壳吸附于细胞表面的。 3、具有良好的抗原性,诱发机体的体液免疫与细胞免疫,这些免疫应答不仅有免疫防御作用,而且可引起免疫病理损害,与病毒的
杆状病毒表达系统用于表达融合型蛋白的转染质粒
是一类早期构建的转染质粒,它包括pAC系列[4],如pAC101、pAC311、pAC360等。在每个载体中,多角体蛋白基因启动子下游ATG启始密码后含有一个单一的BamHⅠ酶切位点,当外源基因和多角体基因的读码框架正确时,就可以获得含1个或几个多角体蛋白N端氨基酸的融合型外源基因。
杆状病毒表达系统的影响蛋白质表达的因素
在杆状病毒系统中,要获得蛋白质的有效表达,首先要选择合适的转染载体。依据表达的蛋白质属融合型或非融合型,选择单启动子型或多启动子型。另外目的基因的选择要注意以下因素:①该目的基因应不含内含子;②去除其mRNA 5′端非编码区的异源序列;③翻译启始密码子AUG应处于适当的序列之间(如Kozak 序列)
M13-噬菌体衣壳蛋白改造在改良噬菌体展示技
M13 噬菌体衣壳蛋白改造在改良噬菌体展示技术中的应用 实验材料 羧苄青霉素 氯霉素 大肠杆菌 CJ2
病毒的特征
病毒是颗粒很小、以纳米为测量单位、结构简单、寄生性严格,以复制进行繁殖的一类非细胞型微生物。病毒是比细菌还小、没有细胞结构、只能在细胞中增殖的微生物。由蛋白质和核酸组成。大部分要用电子显微镜才能观察到。 原指一种动物来源的毒素。“病毒”一词源于拉丁文。病毒能增殖、遗传和演化,因而具有生命最基本
杆状病毒系统蛋白质表达实验——蛋白质生产高峰期的确定
实验方法原理因为重组蛋白的表达受多角体启动子的调节,而多角体启动子在病毒裂解循环的晚期才被激活,所以重组蛋白在感染后期才表达。重组蛋白通常在感染后 15~24 h之间即可检测到,并可积累至感染后 40 h 左右,然后积累水平下降。由于不同的蛋白质在昆虫细胞中有不同的稳定性,推荐用这个系统测定蛋白质积
杆状病毒表达系统用于表达多个非融合蛋白的转染载体
这种载体的主要特征是含有2个或2个以上相同的启动子,可表达2条或2条以上多肽链的蛋白。 如Emery和Bishop[8]等构建的pAcVC2转染质粒,含有两个方向相反的多角体基因启动子。重组病毒可同时表达多角体蛋白和淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒(LCMV) N蛋白。Takehara[9]等构
细胞化学词汇RNA衣壳化
中文名称:RNA衣壳化英文名称:RNA encapsidation定 义:RNA被蛋白质衣壳包裹生成RNA病毒的过程。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
关于衣壳的类型的介绍
衣壳的类型大致是按它们的形态来分类的。不同的病毒可以具有不同形态的衣壳,大多数病毒的衣壳为二十面体形和螺旋形。但也有少量病毒,如噬菌体的衣壳具有较为复杂的结构,其衣壳类型为复合型。 二十面体形:二十面体形衣壳是由二十个三角形面组成的接近于球状的结构,如腺病毒。二十面体呈现5-3-2对称,即每个
《细胞》:科学家首次绘出艾滋病病毒衣壳蛋白结构图
《细胞》杂志6月11日网络版刊发文章称,美国科学家采用X光晶体照相术,首次精确描绘出构成人类艾滋病病毒(HIV)衣壳的CA蛋白六聚物结构图,为人类寻找艾滋病治疗新法带来了曙光。 自1981年艾滋病首次发现以来,所有的治疗药物都瞄准了艾滋病病毒生命周期的关键步骤,如利用蛋白酶抑制剂阻断蛋白分
杆状病毒滴度检测
实验概要本实验介绍了检测病毒滴度的方法。实验原理根据噬菌斑数计算病毒滴度。主要试剂1. 4% agarose gel:2g agrose 50ml 水,高压灭菌2. 2×Grace(unsupplemented):9.14g粉末(invitrogen) 0.07gNaHCO3 H2O,调PH6.
杆状病毒表达系统用于表达单一非融合蛋白的转染质粒
由于外加的多角体蛋白或其它的氨基酸可能对外源蛋白的生物活性或细胞定位产生影响,所以用于表达非融合型蛋白的转移载体被广泛应用。几种不同的策略被用于设计高水平表达非融合蛋白的转移载体: (1)如pAcRP[5]系列等,都在多角体基因启动子启始密码ATG上游引入一个单一的限制性多克隆位点; (2)