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磷酸化位点分析实验磷酸肽的质谱分析

实验方法原理用于确定磷酸肽中磷酸化位点的压谱方法有两种不同的基本原理。第一种方法依赖于在质谱仪条件下,如在 ESI 质谱仪的碰撞室或离子源中,或MALDI-MS 的 PSD 过程中,磷酸酯键的化学稳定性。因此,磷酸肽可通过磷酸酯键断裂产生的诊断离子鉴定。第二种方式依靠检测磷酸酯基团使肽段增加的质量数。通常,在蛋白质磷酸化研究中所研究的蛋白质序列是已知的,因此,从理论上可以通过对磷酸基团加合在丝氨酸、苏氨酸或酪氨酸残基上引起的 8011 的质量数差的分析而检测蛋白产生的磷酸肽。因此,得到磷酸化蛋白质的酶切肽质量启通常由 MALDI-MS 分析,如果质量测定值与预期值一致,就可鉴定混合物中的磷酸肽。这两种方法不能鉴定出肽内的磷酸化位点。磷酸化位点的确定要靠能够有效测序的串联质谱的产物离子扫描技术。但是,在肽序列中只有一个可能的磷酸化位点情况下,如果能确实证明此肽段为磷酸肽磷酸化残基也能有效定位。如果磷酸化氨基酸类型已确定,无须离子扫......阅读全文

生物质谱技术在蛋白质组学中的应用

  一、 前言[1,2]   基因工程已令人难以置信的扩展了我们关于有机体DNA序列的认识。但是仍有许多新识别的基因的功能还不知道,也不知道基因产物是如何相互作用从而产生活的有机体的。功能基因组试图通过大规模实验方法来回答这些问题。但由于仅从DNA序列尚不能回答某基因的表达时间、表达量

磷酸化蛋白鉴定实验

实验材料测序级膜蛋白酶                                        

翻译后修饰蛋白质的定性和定量实验

翻译后修饰蛋白质的定性和定量实验             实验步骤

磷酸化位点分析实验-磷酸肽的分离

            实验方法原理 磷酸化分析的原理研究的最常见的磷酸化类型是丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸的磷酸酯化。已知发生的磷酸化还有精氨酸、组氨酸和赖氨酸的亚酰胺化,以及天冬氨酸和谷氨酸的酰化。这些修饰中

磷酸化蛋白鉴定实验

实验材料 测序级膜蛋白酶试剂、试剂盒 二硫苏糖醇碘代乙酰胺乙酸溶液甲酸乙酰氯仪器、耗材 螯合琼脂糖凝胶层析介质实验步骤 这里所述的方法概括为下列几个步骤:胰蛋白酶水解消化膜和可溶性组分中的蛋白质(见 24. 3.1 );固相金属螯合亲和层析(IMAC) 富集磷酸肽(见 24. 3. 2 );用串

磷酸化蛋白鉴定实验

实验材料测序级膜蛋白酶试剂、试剂盒二硫苏糖醇碘代乙酰胺乙酸溶液甲酸乙酰氯仪器、耗材螯合琼脂糖凝胶层析介质实验步骤这里所述的方法概括为下列几个步骤:胰蛋白酶水解消化膜和可溶性组分中的蛋白质(见 24. 3.1 );固相金属螯合亲和层析(IMAC) 富集磷酸肽(见 24. 3. 2 );用串联质谱对磷酸

磷酸化位点分析实验-磷酸肽的分离

实验方法原理磷酸化分析的原理研究的最常见的磷酸化类型是丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸的磷酸酯化。已知发生的磷酸化还有精氨酸、组氨酸和赖氨酸的亚酰胺化,以及天冬氨酸和谷氨酸的酰化。这些修饰中的其中一些是化学不稳定的,通常观察不到,除非采取特殊的保护措施防止他们在蛋内质分离过程中消失。举例来说,组氨酸磷酸化是一

磷酸化位点分析实验-磷酸化位点的确定

磷酸肽的化学测序 磷酸肽的质谱分析 源后衰变 用酶和化学方法去磷酸化             实

磷酸化位点分析实验-磷酸化位点的确定

实验方法原理 磷酸化位点的确定也使用一些通用方法;磷酸化蛋白质被纯化,如果可能蛋白质要均一;磷蛋白被特异性的化学或酶反应切断、产生肽混合物,其中含有一到两个磷酸肽不同之处在干其分离磷酸肽的策略是为了确定氨基酸序列,定位肽段内磷酸化的残基。上面所述的分离方法, 2D-PP 作图、 HPLC 或 l

2018中国质谱大会生命科学与医学集锦

  分析测试百科网讯 2018年11月24日-26日,2018年中国质谱学术大会在广州东方宾馆盛大召开。本次大会包括一个报告主论坛,21个主题分论坛,共300余场演讲报告。在“生命科学与医学”分论坛上,数十位业内专家学者带来精彩的演讲报告,吸引参会人员驻足聆听。分析测试百科网作为本次活动的合作媒体,

磷酸化位点分析实验-磷酸肽的分离

实验方法原理 即使纳喷 MS/MS 技术已经成功用于直接分析蛋白酶解产生的磷酸肽但是出于以下一些原因,通常建议在质谱分析前作一些分离:(1) 磷酸肽在蛋白酶切产物中通常只占少数因此容易淹没在低率度离子产生的总背景中,肽分离技术可浓缩分析物,因此会提高信噪比。(2) 如果磷酸肽被放射性标记并具有相同比

磷酸化位点分析实验-磷酸肽的分离

2D-PP 分离磷酸肽 RP-HPLC 分离磷酸肽 高分辨凝胶电泳分离磷酸肽 IMAC 分离/富集磷酸肽           &

磷酸化位点分析实验_磷酸肽的化学测序

实验方法原理磷酸化位点的确定也使用一些通用方法;磷酸化蛋白质被纯化,如果可能蛋白质要均一;磷蛋白被特异性的化学或酶反应切断、产生肽混合物,其中含有一到两个磷酸肽不同之处在干其分离磷酸肽的策略是为了确定氨基酸序列,定位肽段内磷酸化的残基。上面所述的分离方法, 2D-PP 作图、 HPLC 或 lMAC

磷酸化位点分析实验_磷酸肽的化学测序

实验方法原理磷酸化位点的确定也使用一些通用方法;磷酸化蛋白质被纯化,如果可能蛋白质要均一;磷蛋白被特异性的化学或酶反应切断、产生肽混合物,其中含有一到两个磷酸肽不同之处在干其分离磷酸肽的策略是为了确定氨基酸序列,定位肽段内磷酸化的残基。上面所述的分离方法, 2D-PP 作图、 HPLC 或 lMAC

磷酸化位点分析实验-磷酸肽的分离——2D-PP 分离磷酸肽

实验方法原理即使纳喷 MS/MS 技术已经成功用于直接分析蛋白酶解产生的磷酸肽但是出于以下一些原因,通常建议在质谱分析前作一些分离:(1) 磷酸肽在蛋白酶切产物中通常只占少数因此容易淹没在低率度离子产生的总背景中,肽分离技术可浓缩分析物,因此会提高信噪比。(2) 如果磷酸肽被放射性标记并具有相同比活

蛋白质凝胶染色法实验

实验步骤 总蛋白质的检测 1. 总蛋白质色度法染色 简便的目视检测、相对简单的使用及广大熟悉方法的用户基础群,使得考马斯亮蓝(C B B )—直是最普遍使用的总蛋白质凝胶染色剂。如需要比考马斯亮蓝染色更高的检测敏感度,那么银

张玉奎院士等专家在2012年北京色谱年会上作大会报告

  2012年12月07日,北京,2012年北京色谱年会热烈召开。促进了北京地区色谱以及色谱相关领域的技术应用与交流。围绕“色谱新技术及其应用”的主题,展开多场报告,内容包括蛋白质组学、色谱技术、色谱与质谱、色谱与核磁共振、金属组学、代谢组学、生物气味研究、环境分析等。中国科学院大连化学物理研究所张

第三届全国生物质谱学术交流会圆满闭幕

朱云平研究员 军事医学科学院放射与辐射医学研究所 题目:蛋白质/翻译后修饰鉴定的数据质量控制 孙瑞祥副研究员 中国科学院计算技术研究所 题目:电子转运裂解(ETD)质谱的特征发现及其在pFind搜索引擎中的利用   国防科技大学机电工程与自动化学院 谢红卫教授   来自国

赛默飞世尔科技“蛋白质组学解决方案”网络视频讲座

  3月30日下午,赛默飞世尔科技蛋白质组学市场专员唐佳向大家作了题为《蛋白质组学研究方法和Thermo蛋白质组学解决方案》的报告

中国学者最新PNAS文章

  3月21日,《美国科学院院刊》(PNAS)在线发表了中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所张鹏研究组题为Structural basis of rifampin inactivation by rifampin phosphotransferase 的研究论文。该研究通过解析利福平磷酸转

上海生科院揭示细菌磷酸化利福平产生耐药性的分子机制

  3月21日,《美国科学院院刊》(PNAS)在线发表了中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所张鹏研究组题为Structural basis of rifampin inactivation by rifampin phosphotransferase 的研究论文。该研究通过解析利福平磷酸转

第19届全国色谱大会特邀报告(一)

  2013年4月1日,第19届全国色谱学术报告会及仪器展览会在福州西湖宾馆召开,来自中国科学院大连化学物理研究所的张玉奎院士、南京大学陈洪渊院士、中国科学院生态环境研究中心的江桂斌院士和国家自然科学基金委员会化学科学部庄乾坤主任等多名色谱界专家分别做了特邀报告。各专家

高通量蛋白质组和磷酸化组分析揭示化疗药物耐药性

  靶向药物具有特异性好、毒副作用少的特点,在对癌症的治疗中发挥了重要作用。然而,肿瘤对靶向药物耐药性的产生却是临床实践中遇到的一大难题。在此背景下,如何全面系统地理解耐药性产生的机理是当前癌症研究的热点之一。最近,德国慕尼黑理工大学的研究者在国际著名期刊Cancer Research发表论文,综合

质谱沙龙第十九期活动报道

  2009年5月23日,质谱沙龙第十九期活动在清华大学生物医学测试中心举行。此次到会者除了来自二炮总医院、西苑医院、清华大学医学院、发酵研究院、中科院微生物研究所、空军总医院、天津博纳艾杰尔科技、AB公司等老朋友外,还有来自戴安公司、东西电子的新朋友。报告后的讨论一直洋溢着热烈的气氛。   

2016北京质谱年会召开 张新荣任新理事长

  分析测试百科网讯 2016年3月25日,2016年度北京质谱年会在北京蟹岛会议中心召开,本次会议由北京理化分析测试技术学会北京质谱学会主办,旨在加强学术交流,了解质谱新技术和交叉学科的最新进展,推进质谱技术及其色谱与质谱联用技术在分析科学中的发展与应用,会议吸引了行业内专家学者300余人参加。 

蛋白质组学在植物科学研究中的应用

1 植物群体遗传蛋白质组学 1.l 遗传多样性蛋白质研究基于基因组学的一些遗传标记,如RAPD(Random Amplified Polymorphic DNA)、RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism)、SSR(Simple Sequen

见所未见:OptiMS拓展您的质谱潜能

鉴定翻译后修饰的位点  奥地利Innsbruck医学院生物中心临床生物化学部的Bettina Sarg博士  题目:Application of CESI-MS for the Analysis of Site-specific Protein Modifications   Betti

第六届世界华人质谱会在美举办 共享质谱学术盛宴

  分析测试百科网讯 2016年6月4日,第六届世界华人质谱会在美国德克萨斯州圣安东尼奥举行,这是自第一届世界华人质谱会以来第一次在海外举办的华人质谱会,并恰逢距2006年在新疆举办的第一届世界华人质谱会10周年。会议由美国华人质谱协会(C

水生所蛋白质翻译后修饰组学研究获进展

  蛋白质的翻译后修饰,如磷酸化、乙酰化等,是调节蛋白质生物学功能的关键步骤,是蛋白质动态反应和相互作用的一个重要分子基础,也是细胞信号网络调控的重要靶点。由于翻译后修饰蛋白质在样本中含量低且动态范围广,其研究极具挑战性。近期,中国科学院水生生物研究所葛峰研究员学科组在蛋白质翻译后修饰组学及其功能方

罗元明副研究员:生物质谱与蛋白翻译后修饰研究方法学

  2013年12月8日,由首都医科大学附属北京朝阳医院、AB SCIEX公司主办的第四十期质谱沙龙活动在北京朝阳医院顺利举办,来自北京师范大学、北京朝阳医院、中科院微生物所、空军总医院的百余名专家学者齐聚一堂共同参加了此次沙龙活动,分析测试百科