从植物组织中分离高尔基体

实验材料新鲜组织试剂、试剂盒匀浆介质仪器、耗材研钵和杵离心机实验步骤1. 先用剪刀大致剪切叶片或茎杆,然后在少量的介质中用刀片切成碎片。2. 对于 1 g 新鲜组织,在 1 ml 介质中用研钵和杵捣碎使组织匀浆化。匀浆介质:50 mmol/L FiEPES10 mmol/L KCI1 mmol/L EDTA10 mmol/L 抗坏血酸0.1% BSA5 mmol/L DTT,pH 7.50.4 蔗糖3. 用单层的 Miracloth 挤压浓缩的匀浆液以除去没有破碎的细胞、细胞壁和细胞碎片。4. 将匀浆液转移至 35 ml 或 50 ml 的离心管中。5. 用吊桶式转头以 1000 g 离心 10 分钟来除去细胞核、淀粉和完整的叶绿体。6. 将 1000 g (10分钟)的离心上清铺到不连续的蔗糖梯度上,梯度是在 35 ml 的管中用含有 4 ml 的 37% (w/v) 的蔗糖和 8 ml 21.5% 的蔗糖制备的。7. 以 2......阅读全文

从植物组织中分离高尔基体

实验材料新鲜组织试剂、试剂盒匀浆介质仪器、耗材研钵和杵离心机实验步骤1. 先用剪刀大致剪切叶片或茎杆,然后在少量的介质中用刀片切成碎片。2. 对于 1 g 新鲜组织,在 1 ml 介质中用研钵和杵捣碎使组织匀浆化。匀浆介质:50 mmol/L FiEPES10 mmol/L KCI1 mmol/L

利用-Trizol-从植物组织中制备-RNA-实验

实验材料 植物组织试剂、试剂盒 Trizol氯仿异丙醇乙醇DEPC处理过的水液态N2NaCl柠檬酸钠仪器、耗材 转子-定子均化器研钵和杵圆锥形管实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂Trizol(Invitrogen)氯仿异丙醇乙醇,70%,用焦碳酸二乙酯(DEPC) 处理过的水配制DEPC 处

利用-ConcertPlant-试剂从植物组织中纯化-RNA

            实验材料 植物组织 试剂、试剂盒 Concert Plant RNA试剂 NaCl 氯仿

利用-Trizol-从植物组织中制备-RNA-实验

下述方案是经修改过的 Trizol 方案,用于从植物组织中分离 RNA,其中增加了一个高盐异丙酵沉淀步骤,以选择性地沉淀 RNA,而将多聚糖和蛋白多糖留在溶液里。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。实验材料植物组织试剂、试剂盒Trizol氯仿异丙醇乙醇DEPC处理过的水液态

利用-Trizol-从植物组织中制备-RNA-实验

            实验材料 植物组织 试剂、试剂盒 Trizol 氯仿 异丙醇 乙醇

从豌豆组织分离叶绿体实验_叶绿体分离

实验材料叶子组织试剂、试剂盒PBF-Percoll 溶液山梨醇BSAHEPES-KOHEDTA仪器、耗材聚碳酸酯离心管实验步骤1. 制备 Percoll 梯度(1) 两个 50 ml 的聚碳酸酯离心管中分别加入 25 ml 50% 的 PBF-Percoll 溶液。50% PBF-Percoll0.

利用-ConcertPlant-试剂从植物组织中纯化-RNA-实验

以下概述的是 ConcertPlant 试剂(Invitrogen) 所附带的方案。该方案不是以酚为基础的,但需要加氯仿。该试剂用于多种植物的组织中分离 RNA, 包括蓝叶云杉针、马铃薯块茎、玉米种子和棉花叶。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。实验材料植物组织试剂、试剂盒

利用-ConcertPlant-试剂从植物组织中纯化-RNA-实验

实验材料 植物组织试剂、试剂盒 Concert Plant RNA试剂NaCl氯仿异丙醇乙醇DEPC处理过的水实验步骤 一、材料1.缓冲液、溶液和试剂ConcertPlantRNA试剂(Invitrogen),4°C预冷NaCl,5mol/L(无RNA酶)氯仿异丙醇乙醇,75%,用DEPC处理过的水

从豌豆组织分离叶绿体实验

叶绿体分离实验材料叶子组织                                                          试剂、试剂盒PBF-Percoll 溶液                                                          

从豌豆组织分离叶绿体实验

叶绿体分离             实验材料 叶子组织 试剂、试剂盒

线粒体分离实验—从组织中分离线粒体

实验材料肝脏试剂、试剂盒MS仪器、耗材匀浆器实验步骤1. 取出肝脏,注意不要弄破胆囊。放进一置于冰上的烧杯中,剪去任何结缔组织。称其质量后放回烧杯中。用锋利的剪刀、手术刀或剃须刀片将之切成 1~2 mmol/L 的薄片,用匀浆缓冲液(1x MS) 冲洗两次以去除大部分的血。转移至匀浆器中。加入足够的

高尔基体的分离实验_从大鼠肝脏中分离高尔基复合体

实验材料雄大鼠试剂、试剂盒匀浆缓冲液仪器、耗材Polytron 匀浆器实验步骤1. 将按要求进用标准食物和饮水的雄大鼠(约 250 g) ,用断头和放血的方法处死。2. 切下肝脏(10~13 g ) 并用刀片切碎。3. 用一只 Polytron 匀浆器(20 ST 或 10 ST;Brinkman

从培养的哺乳动物细胞中分离高尔基体

实验材料细胞试剂、试剂盒粗匀浆液仪器、耗材塑料离心管实验步骤1. 向 6 ml 的粗匀浆液中(细胞收获后以大约 5X105 /ml 悬于 0.25 mol/L 蔗糖,10 mmol/L pH 7.4 的 Tris-HCl 中),加入 6 ml 含有 10  mmol/L pH 7.4 Tris-HC

高尔基体的分离实验

实验材料 雄大鼠试剂、试剂盒 匀浆缓冲液仪器、耗材 Polytron 匀浆器实验步骤 1. 将按要求进用标准食物和饮水的雄大鼠(约 250 g) ,用断头和放血的方法处死。2. 切下肝脏(10~13 g ) 并用刀片切碎。3. 用一只 Polytron 匀浆器(20 ST 或 10 ST;Brink

高尔基体的分离实验

从大鼠肝脏中分离高尔基复合体从培养的哺乳动物细胞中分离高尔基体从植物组织中分离高尔基体实验材料雄大鼠                                                          试剂、试剂盒匀浆缓冲液                              

高尔基体的分离实验

从大鼠肝脏中分离高尔基复合体 从培养的哺乳动物细胞中分离高尔基体 从植物组织中分离高尔基体             实验材料 雄大鼠

中间丝的分离方法实验——从组织中分离中间丝

实验材料牛舌试剂、试剂盒解聚缓冲液组装缓冲液匀浆缓冲液抽提缓冲液柱缓冲液PEM 缓冲液仪器、耗材离心机实验步骤一、从牛舌上皮分离角蛋白中间丝1. 从当地屠宰场拿到新鲜牛舌。一条舌头通常可以产出几十毫克纯化了的角蛋白中间丝。2. 用刀片切刮,把舌中的肌肉和黏膜分开。舌黏膜片(大约 1cmx1 cm )

线粒体分离实验—从组织培养细胞中分离线粒体

实验材料细胞试剂、试剂盒RSBMS 缓冲液仪器、耗材Dounce 匀浆器实验步骤1. 用 11 ml 冰上预冷过的 RSB 重新悬浮细胞,转移到一个 15 ml 的 Dounce 匀浆器中RSB(使组织培养细胞膨胀的低渗缓冲液)10 mmol/L NaCl2.5 mol/L MgCl210 mmol

分离核仁实验—从人肝脏或胎盘组织中分离核仁

实验材料组织试剂、试剂盒NKM仪器、耗材粗孔滤纸Teflon-玻璃匀浆器实验步骤1. 准备溶液:NKM:0.13 mol/L NaCl,5 mmol/L KCl,8 mmol/L 乙酸镁2.2 mol/L 蔗糖,10 mmol/L MgCl20.88 mol/L 蔗糖0.34 mol/L 蔗糖,含

概述从植物器官分离单细胞的内容

  分离单细胞的最佳材料是叶组织,因为叶片中的细胞近似于一个同质细胞群体,较适合于特定和调控的大规模细胞培养。用机械法或酶解法可以从这种完整植物体器官(如叶细胞)分离出单细胞。  1、机械法  指通过机械磨碎、切割植物体从而获得游离的单细胞。用机械法可大规模地对薄壁组织细胞进行分离。  2、酶解法 

从植物器官分离单细胞的方法介绍

分离单细胞的最佳材料是叶组织,因为叶片中的细胞近似于一个同质细胞群体,较适合于特定和调控的大规模细胞培养。用机械法或酶解法可以从这种完整植物体器官(如叶细胞)分离出单细胞。1 机械法指通过机械磨碎、切割植物体从而获得游离的单细胞。用机械法可大规模地对薄壁组织细胞进行分离。2 酶解法指用专一的水解酶(

关于从培养组织中分离单细胞的介绍

  从培养组织中分离单细胞指将愈伤组织反复继代培养,再转移至液体培养基振荡培养。这是获得单细胞使用最广泛的一种方法。将表面消毒后的植物器官新鲜切片放置在培养基(固体)上,培养基含适当比例的生长素和细胞分裂素,以保证组织培养的顺利进行。外植体切口处形成愈伤组织,逐渐生长扩展到外植体组织的整个表面。将愈

从培养组织中分离单细胞的方法介绍

从培养组织中分离单细胞指将愈伤组织反复继代培养,再转移至液体培养基振荡培养。这是获得单细胞使用最广泛的一种方法。将表面消毒后的植物器官新鲜切片放置在培养基(固体)上,培养基含适当比例的生长素和细胞分裂素,以保证组织培养的顺利进行。外植体切口处形成愈伤组织,逐渐生长扩展到外植体组织的整个表面。将愈伤组

从哺乳动物细胞或组织分离DNA

1. 根据样品类型,从下列方法中选一个作为步骤 1 进行操作。(1) 细胞样品① 单层培养的细胞以用冰预冷的 TBS 将单层细胞洗涤 2 次,用刮棒把细胞刮入约 0.5 ml 的 TBS 中,将细胞悬液转移到冰浴的离心管中,用 1 mlTBS 冲洗培养皿,并入离心管中的细胞悬液。于 4℃ 以

植物组织中氨基转移反应及氨基酸的层析分离

一、目的 转氨基作用是植物  界普遍存在的一种生化反应,它使蛋白质、氨基酸代谢 与碳水化合物、脂肪等代谢沟通起来,在一定程度上起平衡蛋白质、脂肪等代 谢的作用。研究植物体转氨基作用,可以使我们了解植物体不同发育阶段代谢 动态的一个侧面,从而探索控制其代谢的途径。 二、原理 通过转氨基作用,α—氨基酸

植物组织中氨基转移反应及氨基酸的层析分离

一、目的转氨基作用是植物界普遍存在的一种生化反应,它使蛋白质、氨基酸代谢与碳水化合物、脂肪等代谢沟通起来,在一定程度上起平衡蛋白质、脂肪等代谢的作用。研究植物体转氨基作用,可以使我们了解植物体不同发育阶段代谢动态的一个侧面,从而探索控制其代谢的途径。二、原理通过转氨基作用,α—氨基酸上的氨基可能转移

从植物中提取药物的萃取分离方法

植物产品是药物最古老的来源,仍然广泛地应用于医疗方面,药用植物与发酵相比较,生长较慢,要经历一段生长期,因此具有较高的生化稳定性。除了从果浆或树浆中提取以外,大多要从坚硬的组织中提取,因此药料一般须经干燥,并适当粉碎,以利增大与溶剂的接触表面,提高萃取效率。植物药材的化学成分十分复杂,有些成分是植物

植物组织和细胞显微化学染色_植物组织中酶检测方法

实验步骤植物组织中酶的组织化学鉴定,其基本原理是以某些物质为基屈,在专一酶的作用下,产生 种有颜色的化合物来表示某种酶的存在。为保持酶的活性,通常要采用冰冻切片法来得到切片,有时也可用徒手切片法。(1)细胞色素氧化酶:将切片放人磷酸缓冲液 (pH 值 5.8) 中,室温下放置 5-10min, 然后

植物组织中淀粉含量的测定

【原理】 淀粉是由葡萄糖残基组成的多糖,在酸性条件下加热使其水解成葡萄糖,然后在浓硫酸的作用下,使单糖脱水生成糠醛类化合物,利用苯酚或蒽酮试剂与糠醛化合物的显色反应,即可进行比色测定。 【 仪器 与用具】 电子天平;容量瓶:100ml×4,50ml×2;漏斗;小

植物组织渗透势测定质壁分离法

实验概要本实验介绍了植物组织渗透势(osmotic potential)测定-质壁分离法的原理及操作步骤等。实验原理将植物组织置于对其无毒害的一系列不同浓度的溶液里处理一定时间,然后镜检发生质壁分离的细胞数,通常视野中有50%的细胞发生质壁分离时定为初始质壁分离,细胞初始质壁分离时压力势为零,因而可