DPBSA的配制与灭菌
实验方法原理不断地搅拌将干粉溶解，调整至终体积，检测 pH 和传导率，按预订量分装进行高压灭菌。I>PBS 干粉实验材料D-PBS 干粉超纯水试剂、试剂盒搅拌粒仪器、耗材容器抽吸器硼硅酸盐玻璃器皿传导率测量仪或渗透压计pH 计高压灭菌器高压灭菌胶带或无菌指示标签实验步骤1. 在容器中加入1L 超纯水。2. 将容器放到磁力搅拌器上，转速设定为20 r/min 左右。3 . 打开 D-PBS 干粉的包装或取 10 个药片，慢慢地加人容器中边加入边搅拌。4. 一直搅拌到干粉完全溶解。5. 检测样品的 pH 和传导率，并做记录。(a) pH 的变化不应超过 0.1 个单位（不同的配方 pH 可能不同）。(b)传导率的变化不应超过 15 μS/cm 的 5% 。也可选择测定渗透压（或都测），每批之间应该显示类似的传导率。(c)丢弃测量用样品，注意不要加回到原液中。6. 将容器中的液体分装到有刻度的瓶子中。7 . 盖好瓶盖，密封。用带......阅读全文
表皮角质形成细胞模型构建实验
实验方法原理 用酶消化法将表皮与真皮分开，然后分离角质形成细胞，用无血清培养液培养或在生长停止的饲养层细胞上培养。 实验材料 皮肤组织
富集活细胞
实验方法原理 在 25 ml 缧口盖离心管中加人6 ml Ficoll-Hypaque溶液，将 9 ml 含 2×107 个细胞的培养基加在上面，离心，从交界部位收集活细胞。 实验材料
富集活细胞实验
实验方法原理 在 25 ml 缧口盖离心管中加人6 ml Ficoll-Hypaque溶液，将 9 ml 含 2×107 个细胞的培养基加在上面，离心，从交界部位收集活细胞。实验材料 细胞悬液D-PBSA试剂、试剂盒 Ficoll-Hypaque溶液或其他类似物仪器、耗材 离心管或常规容器生长培养基
富集活细胞
实验方法原理在 25 ml 缧口盖离心管中加人6 ml Ficoll-Hypaque溶液，将 9 ml 含 2×107 个细胞的培养基加在上面，离心，从交界部位收集活细胞。实验材料细胞悬液
富集活细胞
实验方法原理在 25 ml 缧口盖离心管中加人6 ml Ficoll-Hypaque溶液，将 9 ml 含 2×107 个细胞的培养基加在上面，离心，从交界部位收集活细胞。实验材料细胞悬液D-PBSA试剂、试剂盒Ficoll-Hypaque溶液或其他类似物仪器、耗材离心管或常规容器生长培养基注射器移
方案22.5－姐妹染色单体交换实验
实验方法原理 用胰蛋白酶消化 BUdR 标记了的两个细胞周期并停留在分裂中期的细胞，在低张缓冲液中孵育细胞，然后固定。用 Hoechst 33258 处理细胞后制备载有细胞的载玻片，光降解染色体。用姬姆萨进行染色体染色，在光学显微镜的油镜下
姐妹染色单体交换实验
实验方法原理 用胰蛋白酶消化 BUdR 标记了的两个细胞周期并停留在分裂中期的细胞，在低张缓冲液中孵育细胞，然后固定。用 Hoechst 33258 处理细胞后制备载有细胞的载玻片，光降解染色体。用姬姆萨进行染色体染色，在光学显微镜的油镜下进行观察。试剂、试剂盒D-PBSA PE
藻酸盐包被
盐溶液，含有：(a)NaCl，8.0 g(b)D-葡萄糖，1.0 g(c)用 UPW 配制1 L(d)用 HCl 或 NaOH 调整 pH 为 7.2~7.4(e)高压灭菌0.1 mol/L CaCl2，含有：(a)盐溶液，500 ml(b)CaCl2
同工酶分析
实验方法原理收集细胞，用 D-PBSA 洗涤，重新制成 5×107个/ml 的细胞悬液，制备细胞抽提物并置于 -70°C 保存。准备凝胶装置，取 1~2 μl的细胞抽提物、标准品及对照点样于琼脂糖凝胶。槽内充满液体，将琼脂糖凝胶置于其中，电泳 25 min，加入酶反应试剂，孵育 5~20 m
同工酶分析
实验方法原理 收集细胞，用 D-PBSA 洗涤，重新制成 5×107个/ml 的细胞悬液，制备细胞抽提物并置于 -70°C 保存。准备凝胶装置，取 1~2 μl的细胞抽提物、标准品及对照点样于琼脂糖凝胶。槽内充满液体，将琼脂糖凝胶置于其中
氯霉素乙酰基转移酶（CAT）测定实验
实验方法原理 氯霉素乙酰转移酶报告基因(chloramphenicol acetyltransferase, CAT)能将乙酰基从乙酰辅酶A转移到氯霉素上。本试剂盒采用荧光测定的方法，检测CAT活性，它的灵敏度接近同位素测定方法，而操作极
氯霉素乙酰基转移酶（CAT）测定实验
实验方法原理 氯霉素乙酰转移酶报告基因(chloramphenicol acetyltransferase, CAT)能将乙酰基从乙酰辅酶A转移到氯霉素上。本试剂盒采用荧光测定的方法，检测CAT活性，它的灵敏度接近同位素测定方法，而操作极
同工酶分析
收集细胞，用 D-PBSA 洗涤，重新制成 5×107个/ml 的细胞悬液，制备细胞抽提物并置于 -70°C 保存。准备凝胶装置，取 1~2 μl的细胞抽提物、标准品及对照点样于琼脂糖凝胶。槽内充满液体，将琼脂糖凝胶置于其中，电泳 25 min，加入酶反应试剂，孵育 5~20 min 后，冲洗凝胶，
黑素细胞的培养
实验方法原理胰蛋白酶消化后，用 EDTA 分散从皮肤片分离的表皮片，然后用添加 bFGF（FGF-2）的无血清培养液培养。实验材料D-PBSA胎牛血清大豆胰蛋白酶抑制剂试剂、试剂盒添加激素的黑素细胞培养液胰蛋白酶和EDTA混合液仪器、耗材组织培养皿吸管离心管湿润的培养箱水浴箱电子细胞计数仪或血细胞计
黑素细胞的培养
实验方法原理胰蛋白酶消化后，用 EDTA 分散从皮肤片分离的表皮片，然后用添加 bFGF（FGF-2）的无血清培养液培养。实验材料D-PBSA 胎牛血清
羊膜细胞的培养（一）
实验方法原理 在标准培养箱（37°C ) 中用 Leighton 塑料管培养细胞，然后用胰蛋白酶悬浮法收集细胞。实验材料 羊水标本D-PBSA秋水仙酰胺胸腺嘧啶核苷溴脱氧尿核苷胰蛋白酶EDTA Histopaque-l077试剂、试剂盒 完全培养液胰蛋白酶和EDTA混合液消毒剂如Virkon氯化钾低
表皮角质形成细胞模型构建实验
培养的表皮角质形成细胞可用作：（1）分化模型、器官型培养的理想组织构建物和细胞间相互作用的研究；（2）烧伤或外伤修复的移植物。实验方法原理用酶消化法将表皮与真皮分开，然后分离角质形成细胞，用无血清培养液培养或在生长停止的饲养层细胞上培养。 实验材料皮肤组织试剂、试剂盒热解素胰蛋白酶SKDM角质形成细
培养瓶中单层培养细胞生长曲线的绘制实验
实验方法原理开始一系列的培养，每天在一定的时间计数细胞直至它们到达平台期。实验步骤材料无菌单层细胞培养，A549,Vem 或 HeLa-S3, 75 cm2 培养瓶，晚对数期 1 瓶0.25% 粗制胰蛋白酶，混合有 lOmmol/L EDTA 5 ml生长液，含 2 mmol/LNaHC03 200
蛋白质合成实验
实验步骤 材料无菌细胞培养，如 1X104～ 1X106 个细胞，24 孔板3H-亮氨酸。无血淸培养基中 2 MBq /ml (～50uCi/ml) (特异活性并不重要，因为它将由培养基中的亮氨酸浓度决定）非无菌SLS 或 SDS，1% (35m mol/L ) 溶于 0 .3 mol/L NaOH
斑马鱼胚胎细胞的培养——细胞系
实验材料链酶蛋白酶E用D-PBSA配制1%胰蛋白酶和1mmol L EDTAZEM-2细胞（或等同物）试剂、试剂盒LDF基础培养液LDF原代培养液LDF维持培养液D培养液Holtfreter缓冲液实验步骤鳟鱼胚胎提取物：(a)收集胚胎（受精后 28 天的 Shasta Rainbow 或其他鳟鱼种系
蛋白质合成实验
实验步骤材料无菌细胞培养，如 1X104～ 1X106 个细胞，24 孔板3H-亮氨酸。无血淸培养基中 2 MBq /ml (～50uCi/ml) (特异活性并不重要，因为它将由培养基中的亮氨酸浓度决定）非无菌SLS 或 SDS，1% (35m mol/L ) 溶于 0 .3 mol/L NaOH三
蛋白质合成实验
实验步骤 材料 无菌 细胞培养，如 1X104～ 1X106 个细胞，24 孔板 3H-亮氨酸。无血淸培养基中 2 MBq /ml (～50uCi/ml) (特异活性并不重要，因为它将由培养基中的亮氨酸浓度决定） 非无菌 SLS 或
蛋白质合成实验
实验步骤 材料 无菌 细胞培养，如 1X104～ 1X106 个细胞，24 孔板 3H-亮氨酸。无血淸培养基中 2 MBq /ml (～50uCi/ml) (特异活性并不重要
染色体制备
实验方法原理固定阻滞于分裂中期的细胞，在低渗液中膨胀，将细胞滴在载玻片上，染色，观察 [ Rothfels and Siminovitch，1958；Rooney and Czepulkowski，1986 ] 。实验材料D-PBS0.25%胰蛋白酶对数期的培养细胞秋水仙酰胺试剂、试剂盒低渗溶液醋酸
细胞增殖的密度限制实验
实验方法原理细胞在无限制培养基中培养，生长至包和密度。用放射自显影测定 3 H-胸腺嘧啶脱氧核苷标记细胞的百分比。实验材料传代用的细胞试剂、试剂盒生长培养基维持培养基D-PBSA胰蛋白酶仪器、耗材24 孔培养板培养皿实验步骤一、材料无菌1. 准备用于传代的细胞 2. 生长培养基 3. 维持培养基（无
染色体制备
实验方法原理固定阻滞于分裂中期的细胞，在低渗液中膨胀，将细胞滴在载玻片上，染色，观察 [ Rothfels and Siminovitch，1958；Rooney and Czepulkowski，1986 ] 。实验材料D-PBS
细胞增殖的密度限制实验
实验方法原理 细胞在无限制培养基中培养，生长至包和密度。用放射自显影测定 3 H-胸腺嘧啶脱氧核苷标记细胞的百分比。实验材料 传代用的细胞试剂、试剂盒 生长培养基维持培养基D-PBSA胰蛋白酶仪器、耗材 24 孔培养板培养皿实验步骤 一、材料无菌1. 准备用于传代的细胞 2. 生长培养基 3. 维持
染色体制备
实验方法原理 固定阻滞于分裂中期的细胞，在低渗液中膨胀，将细胞滴在载玻片上，染色，观察 [ Rothfels and Siminovitch，1958；Rooney and Czepulkowski，1986 ] 。
氯霉素乙酰基转移酶（CAT）测定
试剂、试剂盒 Tris-缓冲液 Tris 三硝基甲苯（Triton） CAT 稀释缓冲液CAT 酶标准物闪烁液 聚丙烯闪烁杯仪器、耗材 微量离心管微量离心机实验步骤 一、材料灭菌物品1. D-PBSA2. 多孔培养板：6 孔，35 mm非消毒物品1. Tris-缓冲液：Tris-HCl，0.1mol
染色体制备
实验方法原理 固定阻滞于分裂中期的细胞，在低渗液中膨胀，将细胞滴在载玻片上，染色，观察 [ Rothfels and Siminovitch，1958；Rooney and Czepulkowski，1986 ] 。实验材料 D-PBS0.25%胰蛋白酶对数期的培养细胞秋水仙酰胺试剂、试剂盒 低渗溶