非洲粟酒裂殖酵母的转化实验_LiAc转化法
实验材料细胞试剂、试剂盒腺嘌呤亮氨酸LiAc仪器、耗材YEA 平板实验步骤1. 在 YEA 平板上培养细胞直到长成可见单菌落。2. 接种单菌落到添加有 150 mg/L 腺嘌呤、亮氨酸和/或尿嘧啶等营养缺陷互补物的 YEA 或 PM 培养基中，于允许温度以 200 r/min 振荡培养防止酵母菌沉积，使细胞滴度达到每毫升 5X106 到 1X107 个细胞。3. 1000~2000 g 离心 5 分钟，用灭菌蒸馏水洗一遍。4. 用过滤除菌的 0.1 mol/L CH3COOLi，pH 4.9 洗一遍。5. 重悬于 0.1 mol/L 的 LiAc 使细胞滴度为每毫升 109 个细胞，取 100 μl 等份转移到微量离心管中，在允许温度孵育 60 分钟。6. 加 1 μg 溶于 15 μl TE 中的质粒 DNA，轻轻旋转混匀，于允许温度孵育 60 分钟。7. 加 290 μl 预热到允许温度的 50......阅读全文
非洲粟酒裂殖酵母的转化实验_LiAc转化法
实验材料细胞试剂、试剂盒腺嘌呤亮氨酸LiAc仪器、耗材YEA 平板实验步骤1. 在 YEA 平板上培养细胞直到长成可见单菌落。2. 接种单菌落到添加有 150 mg/L 腺嘌呤、亮氨酸和/或尿嘧啶等营养缺陷互补物的 YEA 或 PM 培养基中，于允许温度以 200 r/min 振荡培养防止酵母菌沉积
非洲粟酒裂殖酵母的转化实验_电穿孔转化法
实验材料细胞试剂、试剂盒三梨糖醇仪器、耗材PM 或 YE 培养基实验步骤1. 用 PM 或 YE 培养基培养细胞，至滴度到每毫升 1X107 个细胞。2. 用冰冷的过滤除菌的 1.2 mol/L 三梨糖醇洗细胞 3 遍，以降低细胞的导电性。3. 用冰冷的 1.2 mol/L 三梨糖醇重悬细胞，使滴度
非洲粟酒裂殖酵母的转化实验
非洲粟酒裂殖酵母的LiAc转化法 非洲粟酒裂殖酵母的电穿孔转化法 实验材料 细胞
非洲粟酒裂殖酵母的转化实验
实验材料 细胞试剂、试剂盒 腺嘌呤亮氨酸LiAc仪器、耗材 YEA 平板实验步骤 1. 在 YEA 平板上培养细胞直到长成可见单菌落。2. 接种单菌落到添加有 150 mg/L 腺嘌呤、亮氨酸和/或尿嘧啶等营养缺陷互补物的 YEA 或 PM 培养基中，于允许温度以 200 r/min 振荡培养防止酵
非洲粟酒裂殖酵母的转化实验
非洲粟酒裂殖酵母的LiAc转化法非洲粟酒裂殖酵母的电穿孔转化法实验材料细胞 试剂、试剂盒腺嘌呤
非洲粟酒裂殖酵母的培养基实验
PM基本培养基的制备丰富培养基YE和YEA的制备试剂、试剂盒维生素 矿物质
非洲粟酒裂殖酵母的培养基实验
基本培养基的制备 丰富培养基YE和YEA的制备 试剂、试剂盒 维生素 矿物质 盐类储存液
酿酒酵母的LiAc/ssDNA/PEG高效转化法实验_高效转化法
实验材料细胞试剂、试剂盒LiAc仪器、耗材YPAD 平板YPAD 液体培养基实验步骤1. 取 10 μl 细胞在 YPAD 平板上涂布 2 cm2，培养过夜；或者接种 5 ml 的 YPAD 液体培养基，于 30℃ 震荡培养过夜。2. 将一瓶 YPAD 培养基于 30℃ 平衡过夜。3. 去 50 m
酿酒酵母的LiAc/ssDNA/PEG高效转化法实验_转化材料的制备
实验材料DNA试剂、试剂盒TE 缓冲液双蒸水仪器、耗材磁力搅拌器玻璃烧杯实验步骤一、单链载体 DNA 的制备1. 在 100 ml 灭菌 TE 缓冲液中溶解 200 mg 高分子量 DNA，置于磁力搅拌器上剧烈搅拌 2~3 个小时以混匀。2. 将载体 DNA 溶液分装成 9 个 10 ml 和 10
酿酒(芽殖)酵母和非洲粟酒裂殖酵母细胞的培养
实验概要本实验主要进行了了酿酒(芽殖)酵母和非洲粟酒裂殖酵母的培养，目的是掌握酵母细胞的培养方法及学会使用相差和微分干涉显微镜。实验原理酿酒(芽殖)酵母的培养在许多方面可以与大肠杆菌相比较。这种酵母可以用标准的微生物学技术在液体和固体培养基中进行培养。大多数酵母菌株在复合液体培养基中的倍增时间为90
酿酒酵母的LiAc/ssDNA/PEG高效转化法实验_快速简便的转化法
实验材料酵母菌试剂、试剂盒LiAc仪器、耗材YPAD 平板YPAD 液体培养基实验步骤1. 将 10 μl 接种物在 YPAD 平板上涂布 2.0 cm2，培养过夜。2. 对一个转化来说，在微量离心管中用 1.0 ml 灭菌水悬浮一接种环酵母菌。3. 离心沉淀细胞，将水去掉。4. 用 500 μl
酿酒酵母的LiAc/ssDNA/PEG高效转化法实验_转化含有质粒菌株
实验材料细胞试剂、试剂盒YPAD仪器、耗材培养瓶SC 减样选择培养基实验步骤1. 在一个 250 ml 的培养瓶中，接种该菌株到 25 ml 相应的 SC 减样选择培养基中，200 r/min 培养过夜。2. 检测每毫升细胞数，按 2.5X108 个细胞计算所需培养物体积。3. 将该体积的培养物加到
酿酒酵母的LiAc/ssDNA/PEG高效转化法实验
转化材料的制备 高效转化法 转化含有质粒的菌株 快速简便的转化法 实验材料 DNA
酿酒酵母的LiAc/ssDNA/PEG高效转化法实验
转化材料的制备 高效转化法 转化含有质粒的菌株 快速简便的转化法 实验材料 DNA
酿酒酵母的LiAc/ssDNA/PEG高效转化法实验
实验材料 DNA试剂、试剂盒 TE 缓冲液双蒸水仪器、耗材 磁力搅拌器玻璃烧杯实验步骤 一、单链载体 DNA 的制备1. 在 100 ml 灭菌 TE 缓冲液中溶解 200 mg 高分子量 DNA，置于磁力搅拌器上剧烈搅拌 2~3 个小时以混匀。2. 将载体 DNA 溶液分装成 9 个 10 ml
非洲粟酒裂殖酵母的培养基实验——PM基本培养基的制备
试剂、试剂盒维生素矿物质盐类储存液实验步骤1. 将下述试剂用水溶解，制备高浓度的维生素、矿物质和盐类储存液，调整终体积到 1 L，过滤除菌。2. 将下述组分溶解于 800 ml 水中以制备 PM，按要求加入维生素、矿物质、盐溶液，用 NaOH 调节 pH 到 5.6，定容到 1 L，高压灭菌。展开
非洲粟酒裂殖酵母的培养基实验—丰富培养基YE和YEA的制备
试剂、试剂盒酵母提取物葡萄糖Bacto 琼脂实验步骤1. YE酵母提取物 5 g，葡萄糖 30 g，Bacto 琼脂 20 g，蒸馏水溶解至体积为 1 L。2. YEAYEA 配方中含有 150 mg/L 的腺嘌呤。3. YEA+Megdala Red 平板向 1 L 冷却后的 YEA 中加 4 m
质粒的转化及转化子的鉴定实验——电转化法
实验方法原理电转化法：外加于细胞膜上的电场造成细胞膜的不稳定，形成电穿孔，不仅有利于离子和水进入细菌细胞，也有利于孔DNA等大分子进入。同时DNA在电场中形成的极性对于它运输进细胞也是非常重要的。实验材料外源片段与载体的连接产物大肠杆菌感受态细胞试剂、试剂盒X-galAmpLA培养基水抗生素仪器、耗
酿酒酵母的电穿孔转化法实验_电穿孔转化法
实验材料细胞试剂、试剂盒PEG3350仪器、耗材YPAD 液体培养基涡旋振荡器实验步骤1. 将菌株接种 100 ml 的 YPAD 液体培养基，30℃ 振荡培养过夜，使细胞滴度达到每毫升 1X108 到 2X108 个细胞。2. 3000 g 离心 5 分钟沉淀细胞，用 100 ml 灭菌水洗两遍，
质粒的转化及转化子的鉴定实验——热激法
质粒的转化是指将质粒或以它为载体构建的重组子导入细菌的过程。将连接产物转化到感受态细胞中，实现重组克隆的增殖，便于后续分子操作（1）用于基因的克隆增殖；（2）筛选目的细胞。实验方法原理热激法：大肠杆菌在0 ℃ CaCl2低渗溶液中，菌细胞膨胀成球形，转化混合物中的DNA形成抗DNase的羟基－钙磷酸
大肠杆菌转化实验——高效率电转化法
实验材料大肠杆菌试剂、试剂盒LBSOC仪器、耗材电转化仪离心机分光光度计实验步骤1. 接种一个单菌落于5 ml LB培养液，37℃温和振摇培养5 h 或过夜。2. 将2.5 ml 培养物加人到盛有500 ml LB培养液的2 L 烧瓶中，37℃摇匀振荡培养至OD600为0.5~0.6。 3.
大肠杆菌转化实验——CaCl2转化法
实验方法原理细菌处于0℃，CaCl2的低渗溶液中，菌细胞膨胀成球形，质粒DNA或重组DNA粘附在细菌细胞表面，经过42°C短时间的热击处理，促进吸收DNA，然后在非选择培养基中培养一代，待质粒上所带的抗菌素基因表达，就可以在含抗菌素的培养基中生长。实验材料大肠杆菌试剂、试剂盒CaCl2氨苄青霉素LB
酵母转化实验_乙酸锂转化
实验材料酵母试剂、试剂盒YPDYPAD腺嘌呤半硫酸TE乙酸锂仪器、耗材摇床水浴锅转子离心机培养箱实验步骤1. 在开始实验前2天，接种待转化的酵母菌株的单菌落于5 ml YPD培养基中，于30℃恒温摇床，培养过夜。 2. 转化的前一天晚上，往1 L 无菌烧瓶中加入300 ml YPAD培养基，然后
酵母转化实验_电穿孔转化
实验材料酵母试剂、试剂盒二硫苏糖醇山梨醇仪器、耗材电穿孔仪器电击池水浴锅实验步骤1. 实验前两天，将转化用酵母菌株的单菌落接种于5 ml YPD培养基中，30℃过夜培养至饱和。 2. 转化前一天晚上，在装有500 ml YPD培养基的2 L 无菌烧瓶中接种适量的过夜培养液，于30℃剧烈摇动培养过
酿酒酵母的电穿孔转化法实验
材料的准备 电穿孔转化法 实验材料 高分子量 DNA 试剂、试剂
酿酒酵母的电穿孔转化法实验
材料的准备 电穿孔转化法 实验材料 高分子量 DNA 试剂、试剂
酵母转化实验_原生质体转化
实验材料酵母试剂、试剂盒YPD山梨醇CaCl2-MEPEG选择性再生琼脂仪器、耗材水浴锅离心机分光光度计培养箱实验步骤1. 在实验前2天，将转化用酵母菌株的单菌落接种到5 ml YPD培养基中，于30℃培养过夜（如果酵母菌株是温度敏感的应在低温下培养）。2. 转化前一天晚上，从5 ml 过夜培养
质粒的转化及转化子的鉴定实验
实验方法原理 热激法：大肠杆菌在0 ℃ CaCl2低渗溶液中，菌细胞膨胀成球形，转化混合物中的DNA形成抗DNase的羟基－钙磷酸复合物粘附于细胞表面，经42 ℃短时间热冲击处理，促进细胞吸收DNA复合物，在丰富培养基上生长数小时后，球状细胞复原并分裂增殖。在被转化的细胞中，重组子基因得到表
大肠杆菌转化实验——热击法
大肠杆菌转化可以：（1）将重组DNA分子导入大肠杆菌受体细胞进行复制，增殖和表达，以获得目的基因；（2）验证大肠杆菌感受态细胞效果；（3）用于分子生物学其他研究。实验方法原理质粒DNA或重组DNA粘附在细菌细胞表面，经过42摄氏度短时间的热击处理，促进吸收DNA.然后在非选择培养基中培养一代，待质粒
酵母转化实验
实验材料酵母菌株质粒仪器、耗材YPD 平板SC-ura平板产孢子平板实验步骤展开