转运反应成分的制备实验——制备藻胆色素蛋白标志物
试剂、试剂盒APC 悬浮液HEPESNaClSMCC仪器、耗材微量离心管Sephadex G50 脱盐柱实验步骤1. 在一微量离心管中，4℃，10000 g 离心 APC 悬浮液 5~10 分钟，吸走上清。2. 用 0.1 mol/L HEPES（pH 7.4），0.1 mol/L NaCl 重悬浮沉淀至浓度为 5 mg/ml。用这种缓冲液透析几次去除残留的硫酸铵。3. 临用前用透析液溶解硫代 SMCC，浓度为 10 mg/ml。4. 按 0.1 mg 硫代-SMCC/1 mg APC 的比例将硫代-SMCC 加到蛋白质中，冰上孵育 45 分钟。5. 将修饰后的 APC 过一 5 ml 的 Sephadex G50 脱盐柱，柱子预先用 0.1 mol/L HEPES，(pH 7.4)，0.1 mol/L NaCl 和 1 mmol/L EDTA 平衡。6. 通过真空透析或用一离心浓缩装置将 APC 浓缩为 5 mg/ml。7. ......阅读全文
制备电泳实验
实验方法原理 严格来说洗脱不能达到制备的目的，它只能得到微克到毫克级的样品。通常是用其他方法分离的粗样品通过某种电泳方法进一步分离纯化后，再用扩散洗脱或电泳洗脱收集纯样品，继而用作其他分析的需要。实验材料 凝胶切片仪器、耗材 解剖刀匀浆器实验步骤 1. 扩散洗脱扩散洗脱是用解剖刀或匀浆器将凝胶切片捣
制备克隆实验
试剂、试剂盒ATP-巯基乙醇IPTGX-gal平末端限制酶连接缓冲液T4DNA 连接酶平末端插入物克隆载体培养基仪器、耗材FALCON 2059 多聚丙烯试管37°C 恒温箱水浴箱实验步骤一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂ATP(10 mmol/L)β-巯基乙醇（可选择）IPTG(100 mmol/L
制备克隆实验
试剂、试剂盒 ATP-巯基乙醇IPTGX-gal平末端限制酶连接缓冲液T4DNA 连接酶平末端插入物克隆载体培养基仪器、耗材 FALCON 2059 多聚丙烯试管37°C 恒温箱 水浴箱实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂ATP(10 mmol/L)β-巯基乙醇（可选择）IPTG(100 mm
制备克隆实验
试剂、试剂盒 ATP -巯基乙醇 IPTG X-gal 平末端限制酶 连接缓冲液 T4DNA 连接酶 平末
融合蛋白的制备方法
基于重复结构的融合蛋白大多为短肽，不具有复杂的空间结构，因此只需简单的多肽合成过程即可获得目标蛋白。由单个氨基酸合成多肽主要通过两个氨基酸之间脱水形成肽键来实现，主要包括以下基本步骤:：首先对两性离子结构的氨基酸进行相应的氨基或羧基保护，其次将羧基活化为活性中间体，待耦合过程结束后，对肽链上氨基酸的
融合蛋白的制备步骤
具体步骤为：1、进行目的基因的克隆：根据基因序列互补原则，设计合适的引物序列，以cDNA为模板，利用PCR技术扩增不同的目的DNA片段。2、在载体中进行重组：通过限制内切酶将两个DNA片段进行酶切并回收，然后通过连接酶将两个具有相同末端酶切位点的基因片段进行体外连接，并克隆到高表达质粒载体中，构建重
融合蛋白的制备方法
基于重复结构的融合蛋白大多为短肽，不具有复杂的空间结构，因此只需简单的多肽合成过程即可获得目标蛋白。由单个氨基酸合成多肽主要通过两个氨基酸之间脱水形成肽键来实现，主要包括以下基本步骤:：首先对两性离子结构的氨基酸进行相应的氨基或羧基保护，其次将羧基活化为活性中间体，待耦合过程结束后，对肽链上氨基酸的
酪蛋白的制备方法
(1)新鲜牛奶脱脂，加酸(乳酸、乙酸、盐酸或硫酸)，将pH调至4.8，使干酪素微胶粒失去电荷而凝固沉淀。用这种方法得到的干酪素称为酸酪蛋白，加酸的种类不同得到的酸酪蛋白却几乎毫无区别。酸酪蛋白是白色至淡黄色粉末或颗粒，稍有奶臭和酸味。在水中只是溶胀，若加入氨、碱及其盐时，则可分散溶解于水中。可溶于强
细菌细胞的制备实验实验——细胞抽提物的制备
实验材料细胞试剂、试剂盒弗氏破碎缓冲液匀浆缓冲液仪器、耗材弗氏破碎器实验步骤1. 将 5~10 g 新鲜或冻存的细胞沉淀物垂悬于弗氏破碎缓冲液中或者适当的匀浆缓冲液中。通常 4L 的大肠杆菌培养物可以获得大约 7.5 g 的细胞沉淀。2. 悬液中加入无 RNase 的 DNase 至终浓度为 2 μ
蛋白制备方法介绍
胶体金对蛋白的吸附主要取决于pH值，在接近蛋白质的等电点或偏碱的条件下，二者容易形成牢固的结合物。如果胶体金的pH值低于蛋白质的等电点时，则会聚集而失去结合能力。除此以外胶体金颗粒的大小、离子强度、蛋白质的分子量等都影响胶体金与蛋白质的结合。1．待标记蛋白溶液的制备 将待标记蛋白预先对0.005Mo
制备电泳实验——等电聚焦制备电泳
实验方法原理等电聚焦制备电泳是一种非变性制备技术。由于等电聚焦电泳技术的特点，因而是一种理想的制备方法。试剂、试剂盒电极液两性电解质Ultrodex实验步骤一、液体介质垂直柱状蔗糖密度梯度等电聚焦是原瑞典 LKB 公司早期用于制备和分析目的的等电聚焦方法。载体两性电解质在蔗糖密度梯度柱中形成 pH
盐的制备反应举例
盐可以通过化学反应而制备，包括有：盐基与酸，例如NH3+HCl→NH4Cl金属与酸，例如Mg+H2SO4→MgSO4+H2金属与非金属，例如Ca+Cl2→CaCl2碱与酸性氧化物，例如2NaOH+Cl2O→ 2NaClO+H2O酸与碱性氧化物，例如2HNO3+Na2O→ 2NaNO3+H2O盐也可以
免疫胶体金技术的颗粒制备及蛋白制备
颗粒制备 根据不同的还原剂可以制备大小不同的胶体金颗粒。常用来制备胶体金颗粒的方法如下。 1．枸橼酸三钠还原法 （1）10nm胶体金粒的制备：取0.01%HAuCl4水溶液100ml，加入1%枸橼酸三钠水溶液3ml，加热煮沸30min，冷却至4℃，溶液呈红色。 （2）15nm胶体金颗粒的
细菌细胞的制备实验实验
细胞抽提物的制备 核糖体及多核糖体的分离 70S核糖体的纯化 多核糖体的纯化 将核糖体解离为大亚基和小亚基 实验材料
细菌细胞的制备实验实验
实验材料 细胞试剂、试剂盒 弗氏破碎缓冲液匀浆缓冲液仪器、耗材 弗氏破碎器实验步骤 1. 将 5~10 g 新鲜或冻存的细胞沉淀物垂悬于弗氏破碎缓冲液中或者适当的匀浆缓冲液中。通常 4L 的大肠杆菌培养物可以获得大约 7.5 g 的细胞沉淀。2. 悬液中加入无 RNase 的 DNase 至终浓度为
细菌细胞的制备实验实验
细胞抽提物的制备核糖体及多核糖体的分离70S核糖体的纯化多核糖体的纯化将核糖体解离为大亚基和小亚基实验材料细胞 试剂、试剂盒弗氏破碎缓冲液
质粒DNA的小量制备实验——煮沸小量制备法
实验方法原理当菌体在NaOH和 SDS溶液中裂解时，蛋白质与DNA发生变性，当加入中和液后，质粒DNA分子能够迅速复性，呈溶解状态，离心时留在上清中；蛋白质与染色体DNA不变性而呈絮状，离心时可沉淀下来。推荐采用本方案从1-24个菌落培养液中制备少量的质粒DNA，尽管该方案十分快捷，但制备的DNA的
单克隆抗体上清制备实验——大量制备
实验材料目的杂交瘤试剂、试剂盒完全 DMEM-10 培养液（含 5～10 mmol／L HEPES pH 7.2～7.4）仪器、耗材250 ml 无菌锥形离心管转瓶培养装置850 cm2 旋转培养瓶175 cm2 组织培养瓶实验步骤1. 重复基本方案 1 步骤 1，并按 1:10 分传到终体积为 1
血涂片的制备实验
实验材料 血液试剂、试剂盒 消毒酒精瑞特染色液蒸馏水仪器、耗材 载玻片盖玻片脱脂棉刺血针油镜用油显微镜实验步骤 一、血涂片的制备按以下各步骤进行操作。（一）采血采血之前先揉搓需要采血的部位，如耳垂或手指尖，使血流旺盛。用酒精消毒皮肤，待干。以左手拇指及食指夹持局部，再用消毒过的刺血针刺之，血液自然流
植物RNA的制备实验
酚/SDS法 实验材料 RNA 试剂、试剂盒
poly（A）+－RNA的制备实验
实验材料 RNA试剂、试剂盒 NaOH寡聚脱氧胸苷纤维素poly（A）样品缓冲液LiClEDTATE乙酸钠仪器、耗材 离心机分光光度计摇床实验步骤 1. 先用10 ml 5 mol/l NaOH清洗硅化的层析柱，然后用水冲洗。2. 取0.5 g oligo（dT）纤维素干粉加1 ml 0.1 m
反义RNA的制备实验
实验材料 限制性内切核酸酶酶水解 模板 DNA 大肠杆菌 DNA 多聚酶 胰 DNaseⅠ 试剂、试剂盒
金相试样的制备实验
一、实验目的 1. 学会金相试样的制备方法。 2. 熟悉常用化学浸蚀试剂及其使用方法。 二、实验内容 按照金相试样的制备方法，每人制备出碳钢金相试样一块，用金相显微镜观察自己制备的试样，要求试样在显微镜下观察应没有磨痕、组织清晰。 三、实验原理 要对金属材料的显微组织进行观察，首先就
血涂片的制备实验
实验材料血液试剂、试剂盒消毒酒精瑞特染色液蒸馏水仪器、耗材载玻片盖玻片脱脂棉刺血针油镜用油显微镜实验步骤一、血涂片的制备按以下各步骤进行操作。（一）采血采血之前先揉搓需要采血的部位，如耳垂或手指尖，使血流旺盛。用酒精消毒皮肤，待干。以左手拇指及食指夹持局部，再用消毒过的刺血针刺之，血液自然流出。如血
反义RNA的制备实验
RNA 也可以由线状 DNA 为模板，通过 RNA 聚合酶（如T3、T7 或 SP6 ) 在体外合成。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编：郑晓飞。实验材料限制性内切核酸酶酶水解模板 DNA大肠杆菌 DNA 多聚酶胰 DNaseⅠ试剂、试剂盒氯仿苯酚乙醇DTTrNTP溶液转录缓冲液Tris-Cl盐
poly（A）+－RNA的制备实验
利用cND A微阵列技术可用于：（1）并行分析检测成千上万个基因的表达情况；（2）在新基因的发现、基因组功能的研究、疾病的预测和诊断、药物靶标的确定和药物毒性预测等多方面发挥着重要的作用。实验方法原理大多数的信使RNA（mRNA）都带有poly（A）尾，而结构RNA没有。使用本工作方案，可以将带po
poly（A）+－RNA的制备实验
实验方法原理 大多数的信使RNA（mRNA）都带有poly（A）尾，而结构RNA没有。使用本工作方案，可以将带poly（A）的RNA从rRNA和tRNA中分离出来。 实验材料
腺苷的实验制备方法
1、对照品溶液的制备精密称取腺苷对照品适量，加甲醇配制成1mL含40μg的对照品溶液。2、供试品溶液的制备取供试品20mL置100mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀超声处理5分钟，放置待沉淀完全，滤过，取许滤液50mL蒸干，残渣加水20mL溶解，以水饱和的正丁醇提取4次，合并正丁醇提取液蒸干，残渣加50
植物RNA的制备实验
实验材料 RNA试剂、试剂盒 TELiCl无水乙醇乙酸钠氯仿仪器、耗材 匀浆器离心管离心机水浴锅实验步骤 1. 研钵和研棒先用液氮冷却，称出15 g 冻结植物组织于研钵中（加液氮保持冻结）。2. 用研棒磨成粉末，立即转移到一个盛有150 ml，研磨缓冲液和50 ml TLE缓冲液平衡酚的500
反义RNA的制备实验
实验材料 限制性内切核酸酶酶水解模板 DNA大肠杆菌 DNA 多聚酶胰 DNaseⅠ试剂、试剂盒 氯仿苯酚乙醇DTTrNTP溶液转录缓冲液Tris-Cl盐酸亚精胺NaCl胎盘RNase抑制物牛血清白蛋白RNA聚合酶DEPC仪器、耗材 DNA合成仪琼脂糖凝胶电泳微量离心管实验步骤 一、化学合成的 RN