研究实现活细胞及线虫体内DNA和RNA的同步荧光成像
近期,中国科学院合肥物质科学研究院智能机械研究所智能微纳器件研究室研究员张忠平和王振洋领导的团队在生物体核酸结构的同步原位影像分析方面取得新进展,合成了一种具有高效生物膜穿透能力的阳离子碳量子点,实现了对活细胞及线虫体内DNA和RNA的同步荧光成像。相关研究成果发表在国际化学期刊《德国应用化学》(Angew. Chem. Int. Ed.)上。这是继该团队两个月前在该杂志发表细胞及生物体多通道荧光影像分析研究成果后的又一进展。 核酸是生命的最基本物质之一,分为核糖核酸(RNA)和脱氧核糖核酸(DNA)。DNA是储存、复制和传递遗传信息的主要物质基础。RNA在蛋白质合成过程中起着重要作用。因此,实时原位的观察DNA和RNA结构的动态变化对理解核酸转录、蛋白表达、细胞凋亡等细胞行为和研究遗传性疾病具有重要意义。但是,由于目前的成像探针存在生物膜穿透能力弱、无法同步区分DNA和RNA、自身光稳定性差等局限性,实时原位监测活细胞及......阅读全文
新研究“点亮”荧光RNA成像的结构机制
5月17日,中国科学院生物物理研究所方显杨研究组与动物研究所李幸研究组合作在《自然-通讯》上发表研究论文,揭示荧光点亮RNA适配体RhoBAST结合与激活荧光团TMR-DN的机制,为理性设计和优化这一重要的FLAP系统提供了机制见解。 在活细胞中对生物大分子如蛋白质和RNA等进行时空定位和追踪
原代细胞DNA与RNA的吖啶橙荧光染色法
基本原理:吖啶橙(acridine orange,AO)是一种常用荧光染料,吖啶橙与原代细胞内的DNA、RNA都有亲和力,但有一定的特异性,即结合后发不同颜色的荧光,DNA呈亮绿色,而RNA呈橘红色至火红色。此法简便快捷,既可染活原代细胞又可染固定原代细胞。用于直接染色观察活原代细胞或固定染色观
原代细胞DNA与RNA的吖啶橙荧光染色法
基本原理:吖啶橙(acridine orange,AO)是一种常用荧光染料,吖啶橙与原代细胞内的DNA、RNA都有亲和力,但有一定的特异性,即结合后发不同颜色的荧光,DNA呈亮绿色,而RNA呈橘红色至火红色。此法简便快捷,既可染活原代细胞又可染固定原代细胞。用于直接染色观察活原代细胞或固定染色观
活细胞成像要求在成像过程中的知识
活细胞成像要求在成像过程中始终保持镜台上细胞的存活.应注愈使用zui小强度的激光,因为激光束造成的光损伤在多次扫描时可以录加起来。抗氧化剂(如维生素C)加人培养液可减少来自激发的荧光分子产生的权.因为级可引起自由基形成并杀死细胞。对于一些荧光标记实验.需评价光基礴对标本的影响.一般应进行成像后组织活
PNAS:新型荧光cAMP指示器有助于神经元活细胞成像
环磷酸腺苷(cAMP)是一种胞内信使分子,负责包括神经元在内的许多细胞的功能,促进轴突的生长,维持神经元间的通信。cAMP的分子途径已得到充分研究,已知它在调节突触功能中发挥重要作用;然而,能够精确监测其细胞内活动的指标还有待开发。现在,Naoto Saitoh带领的研究团队通过开发一种新型绿色荧光
突破!研究团队攻克荧光蛋白和染料在活细胞成像中的局限
近日,我所生物技术研究部分子探针与荧光成像研究组(1818组)徐兆超研究员、苗露副研究员团队通过调控荧光蛋白与荧光染料之间的荧光共振能量转移(Fluorescence resonance energy transfer,FRET),提高了荧光蛋白的光稳定性,并基于化学遗传学策略赋予外源荧光染料遗传编
活细胞RNA检测-一步轻松实现
一提到RNA的检测,大家的脑海中可能会立即浮现出:RT-PCR、FISH、Northern blot等。的确,这些都是检测RNA的经典方法,但它们需要裂解、固定、RNA抽提等,颇为繁琐。其实,RNA的检测完全可以更smart。默克密理博最新推出的SmartFlare™ RNA“灵光”技术
我所发展细胞膜缓冲荧光探针实现活细胞质膜形态动力学的超分辨荧光成像
近日,我所生物技术研究部分子探针与荧光成像研究组(1818组)乔庆龙副研究员和徐兆超研究员团队发展了组装介导的细胞膜缓冲荧光探针,实现了对细胞质膜的长时间稳定标记和超分辨动态荧光成像,观察到了质膜丝状伪足的动态运动和细胞外囊泡的分泌过程,发现了两种细胞外囊泡的融合模式,为细胞质膜的超分辨动态成像提供
诺奖团队最新论文:利用CRISPR系统,实现活细胞内单分子RNA成像
要了解单细胞中单个 RNA 分子的多种动态行为,就需要实时以高分辨率对其进行可视化。然而,目前还没有能够以通用的方式实现对未经修饰的内源性 RNA 进行单分子活细胞成像。2025年2月18日,诺贝尔化学奖得主、CRISPR 基因编辑技术先驱 Jennifer Doudna 教授团队在 Nature
RNA“缓冲荧光探针”用于细胞核核仁成像和核仁应激试剂筛选
近日,我所生物技术研究部分子探针与荧光成像研究组(1818组)乔庆龙副研究员和徐兆超研究员团队发展了能够与RNA特异性可逆结合,在活细胞内对细胞核核仁稳定成像的“缓冲荧光探针”Nu-AN,实现了对核仁动态轮廓的成像,并通过活细胞内药物诱导下核仁特定形态的可视化,为核仁应激试剂的筛选提供可视化的工具。
新型DNA结构的荧光张力探针于活细胞机械力可视化研究
电学、化学和力学是细胞内最常见的三大信号系统,它们相互协调,共同维持着细胞的生命活动。前两者已被人们广泛研究,而细胞的机械力信号传递过程因缺少有效的研究方法,人们一直对其认识有限。研究表明,细胞在体内拥挤的环境中不仅通过挤来挤去以获得足够的生存空间,同时,细胞的生命过程也不断的受到挤压、拉伸、弯
活细胞间接免疫荧光法
一.实验器材:1. 器材:40孔塑料板、40孔板离心机、微量加样器、振荡器、盖玻片、荧光显微镜等2. 试剂:单抗隆抗体(单抗)、荧光标记抗鼠免疫球蛋白、PBS(pH7.2-7.4)、甘油、叠氮钠(NaN3)等二.方法(微量法)1. 将分离好的单个核细胞用PBS洗2次,1000rpm每次10分钟
荧光染料CFSE活细胞标记的特点
荧光染料CFSE(CFDA-SE),是一种可对活细胞进行荧光标记的新型染料,可以标记活体细胞。其基本原理如下:CFSE能够轻易穿透细胞膜,在活细胞内与胞内蛋白共价结合,水解后释放出绿色荧光。在细胞分裂增殖过程中,它的荧光强度会随着细胞的分裂而逐级递减,标记荧光可平均分配至两个子代细胞中,因此其荧光强
荧光染料CFSE活细胞标记的特点
荧光染料CFSE(CFDA-SE),是一种可对活细胞进行荧光标记的新型染料,可以标记活体细胞。其基本原理如下:CFSE能够轻易穿透细胞膜,在活细胞内与胞内蛋白共价结合,水解后释放出绿色荧光。在细胞分裂增殖过程中,它的荧光强度会随着细胞的分裂而逐级递减,标记荧光可平均分配至两个子代细胞中,因此其荧光强
日本开发出观测活细胞RNA的新技术
日本研究人员日前开发出一种人造核酸,它能够标识拥有特定碱基序列的核酸。借助这样的人造核酸,研究人员观测到了活细胞中RNA(核糖核酸)的活动情况。 为探索细胞的机能,人类迄今开发了种类众多的荧光蛋白质。如果要观测某一细胞,荧光蛋白质可以和这一细胞内部的分子结合,然后发出荧光信号,从而使人们能
显微镜对于活细胞成像有什么作用
使用现在已开发的各种荧光蛋白和多色探针几乎可以标记任何分子。 对囊泡、细胞器、细胞和组织中的蛋白质动力学成像的能力为了解细胞在健康和疾病状态下如何工作提供了新的洞察力。 这些包括有丝分裂、胚胎发育和细胞骨架变化等过程的时空动态。研究活细胞时,常见的障碍包括光毒性和光损伤。 要捕捉快速的生物过程,关键
显微镜对于活细胞成像有什么作用
使用现在已开发的各种荧光蛋白和多色探针几乎可以标记任何分子。 对囊泡、细胞器、细胞和组织中的蛋白质动力学成像的能力为了解细胞在健康和疾病状态下如何工作提供了新的洞察力。 这些包括有丝分裂、胚胎发育和细胞骨架变化等过程的时空动态。研究活细胞时,常见的障碍包括光毒性和光损伤。 要捕捉快速的生物过程,关键
量子点活细胞成像应用的实验方案
量子点(Quantum dot, QD)是一种新型荧光纳米材料,又称半导体纳米晶,呈近似球形,三维尺寸在2-10nm,具有明显的量子效应,其物理、光学、电学特性优于传统有机荧光染料,是新一代荧光标记探针的优质选择。Chan等将量子点与传统有机荧光染料进行了光学特性的比较,发现量子点的荧光亮度是传统荧
zenCELL-owl活细胞动态成像及分析系统介绍
研究背景诸多科研院所的医学院、药学院,药企研发部门、CRO企业每天进行大量的药化实验、细胞增殖抑制实验等,筛选匹配细胞株、检测或验证药化效果、各种药化浓度组、细胞实验组、对比组等造成工作量巨大。现有的实验方法多为终点法,包含有LDH乳酸脱氢酶释放、Caspase酶法、代谢活性检测、胞内ATP浓度检测
用于活细胞分析的DNA纳米结构|JACS
基于DNA的探针由于能够识别核酸和非核酸靶点、易于合成和化学修饰、易于与信号放大方案接口以及固有的生物相容性,构成了一个多功能的生物测量平台。在这里,美国西北大学Chad A. Mirkin教授等人提供了从线性DNA结构到结构更复杂的纳米结构的转变如何彻底改变活细胞分析的演变视角。调节结构产生的
荧光定量pcr仪是怎样测试dna,rna的
荧光定量pcr仪是怎样测试dna,rna的普通的基因扩增仪(PCR仪)只能够定性地分析是否存在目标片段。但是价格要低很多,而且运行成本也要低很多。不过不能直接得到扩增结果,还需要做电泳检测。实际中检测遗传疾病,品种分子标记筛选,甚至亲自鉴定等都可以由普通PCR仪完成。但是,某些需要定量的实验就必须用
细胞RNA实时成像或将“成为可能”?!
结合并激活荧光染料的适体荧光 RNA(FR)已用于对丰富的细胞 RNA 种类进行成像。然而,诸如低亮度和具有不同光谱特性的染料 / 适体组合的有限可用性的局限性,限制了这些工具在活的哺乳动物细胞和体内的使用。 2019 年 9 月 23 日,华东理工大学朱麟勇及杨弋共同通讯在 Nature B
分子细胞卓越中心开发出活细胞DNA成像新工具
7月4日,《自然-方法》(Nature Methods)在线发表了中国科学院分子细胞科学卓越创新中心陈玲玲研究组关于CRISPR-dCas12a应用于DNA活细胞标记的研究成果(CRISPR array-mediated imaging of non-repetitive and multipl
教科书改写!人类细胞可将RNA写入DNA!
现代生命科学的基本定律“中心法则”,指明了遗传信息的流动方向,除了极少数的逆转录病毒外,遗传信息从 DNA 到 RNA ,RNA 再到蛋白质。负责这种遗传信息单向流动的 DNA 聚合酶无法将 RNA 逆向写回 DNA ,然而,一项最新研究首次发现了人类 DNA 聚合酶将 RNA 逆向写回 DNA
核酸适配体应用于细胞成像
荧光标记适配体或适配体复合物是适配体应用于细胞成像的基础。流式细胞仪、荧光分光光度计常被用于测定荧光标记适配体与靶细胞结合力的大小,荧光显微镜能够呈现复合物的直观图像。Wang 等基于FISH技术和荧光标记的特异性DNA 适配体构建了绿脓假单胞菌的成像检测系统。荧光适配体探针还可以用于细胞内部的显微
活细胞成像2012最新进展及产品
目前生物成像领域已经可以采用各种显微技术和共聚焦等技术了,这提高了图像的精确度,但是要观察到深层组织活动并不容易,因此在一些活体成像,组织深部观察等方面还需要更多的技术进步。2012年活体显微技术,荧光显微技术,以及活细胞成像方面都涌现出了不少重要的技术成果。 活体动物成像技术主
活细胞蛋白质标记与成像研究获进展
原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/7/504935.shtm近日,华东理工大学光遗传学与合成生物学交叉学科研究中心杨弋、朱麟勇、陈显军团队在活细胞蛋白质标记与成像研究中取得重要进展,相关研究在《细胞发现》发表。 ?人造荧光蛋白及荧光
如何使用高内涵进行长时间活细胞成像
活细胞成像技术是最近几年兴起的一项技术,能够在细胞接近生理的状态下观察细胞形态改变和蛋白的表达,该技术能够避免传统采用固定细胞或组织的研究方法中,固定细胞过程中造成的细胞形态的改变和结构改变,能够更加真实的反映出细胞的特性,因而广受推崇。MD ImageXpress Micor高内涵系统具有多种特性
活细胞成像系统在实际应用上有哪些功能?
活细胞成像系统是用于活细胞长时间、高清晰度、高灵敏度成像的设备。当用活细胞染料标记细胞内特定生物大分子,或者使用荧光蛋白标记体内特定蛋白时,使用该荧光染料或者荧光分子特定的激发光线激发,通过探测其特用的发射光线即可探测到该生物大分子。活细胞成像系统一方面控制细胞生存的外部环境,提供合适的温度、适度
量子点活细胞成像应用的实验方案建议
量子点(Quantum dot, QD)是一种新型荧光纳米材料,又称半导体纳米晶,呈近似球形,三维尺寸在2-10nm,具有明显的量子效应,其物理、光学、电学特性优于传统有机荧光染料,是新一代荧光标记探针的优质选择。 Chan等将量子点与传统有机荧光染料进行了光学特性的比较,发现量子点的