活细胞蛋白质标记与成像研究获进展
原文地址：http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/7/504935.shtm近日，华东理工大学光遗传学与合成生物学交叉学科研究中心杨弋、朱麟勇、陈显军团队在活细胞蛋白质标记与成像研究中取得重要进展，相关研究在《细胞发现》发表。 ?人造荧光蛋白及荧光探针。华东理工供图生物过程可视化一直吸引着科学家的好奇心。不同类型的荧光成像工具可以帮助科学家观察生命体中多种生物事件的发生过程，其中最著名的是荧光蛋白标记技术。荧光蛋白及其衍生技术经历了近30年的飞速发展，为生物学各个领域的研究作出了极大贡献，但伴随着显微镜技术的飞速发展，现有荧光蛋白的性质已经难以适应新型仪器的成像要求。相比之下，基于蛋白质标签和激活型荧光团的荧光标记工具凭借其理化性质成为新的研究热点。该团队针对自催化蛋白质标签SNAP-tag，设计开发了高信噪比的青色人造荧光蛋白SmFP485。SmFP485......阅读全文
活细胞蛋白质标记与成像研究获进展
原文地址：http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/7/504935.shtm近日，华东理工大学光遗传学与合成生物学交叉学科研究中心杨弋、朱麟勇、陈显军团队在活细胞蛋白质标记与成像研究中取得重要进展，相关研究在《细胞发现》发表。 ?人造荧光蛋白及荧光
蛋白质标记
Biosynthetic labeling (Sefton Lab)Biotinylation of Antibody (Contributed by Nanci Donacki)125I Labeling of Protein using ICl (ScienceXchange)Protein (
不同标记与非标记蛋白质组学定量准确性分析研究
通过质谱法进行定量蛋白质组分析为生物医学探索研究提供非常重要的途径。 然而，了解生物样品中的定量限制对于准确判断结果非常重要。通过使用加入已知浓度的蛋白质标准品的复杂样本，科学家们研究了无标记（label free）和基于标记（TMT和iTRAQ）的肽定量的定量限制，包括前体混合的评估及其对同重
科学家首次实现活细胞RNA标记与无背景成像
图为《自然—生物技术》11月期封面图片。它显示了利用荧光RNA可对单细胞中mRNA的翻译过程进行定量研究。癌细胞中mRNA水平与其编码蛋白质水平之间存在较低相关性，提示癌细胞的翻译调控显著失调，这为癌症的诊疗提供一种全新的思路。 华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室的杨弋、朱麟勇等教授历经7年
Nature子刊：首次实现活细胞RNA标记与无背景成像
生物大分子标记技术是生物分子成像的关键。在科学历史上，人们利用荧光蛋白“点亮”细胞内蛋白质, 实现了生命动态过程中蛋白质分子的可视化。荧光蛋白技术是当代生物科学研究中最重要的研究工具之一；在短短十余年内，其研究即被授予诺贝尔奖。RNA同样具有独特的结构、种类繁多的生物学功能以及复杂的时间空间分
我所发展了相变蛋白质的共价键标记和成像方法
近日，我所蛋白质折叠化学生物学创新特区研究组（02T5组）刘宇研究员团队和生物分子高效分离与表征研究组（1810组）张丽华研究员团队合作，通过发展新型仿生荧光共价键探针和质谱表征方法，发现了蛋白质聚集态界面具有化学反应活性，可用于相变蛋白质的标记与成像。 蛋白质在人体内的相变过程会诱发多种退行
国际首次|我国学者实现活细胞RNA标记与无背景成像
华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室的杨弋、朱麟勇等教授历经7年合作研究，在荧光RNA及活细胞RNA成像领域获突破性进展。他们原创的系列高性能荧光RNA，在国际上首次实现了不同种类RNA在动物细胞内的荧光标记与无背景成像。11月5日，该成果以封面论文形式发表于《自然—生物技术》。 荧光蛋白
肿瘤细胞的标记及活体荧光成像
摘要 以绿色荧光蛋白( GFP) 作为标记基因转入人类肺癌细胞系(ASTC2a21) , 经800 mg/ L G418 筛选, 获得5 株高表达细胞系. 利用流式细胞仪对GFP 表达的稳定性进行了初步研究, 结果表明本实验中有些细胞株间GFP 表达稳定性有显著差异( P < 0101) . 将稳定
蛋白质的胶体金标记
当蛋白质的最适稳定量及标记的最佳pH值被确定以后，便可进行标记。具体步骤如下。（1）根据标记所用胶体金的总量计算出所需要待标记蛋白质的总量。（2）边搅拌边将蛋白质溶液加入胶体金溶液中，逐渐加入，lmg的蛋白质量大约需5min,或在搅拌下将胶体金逐渐加入到蛋白质溶液中，大约需5~10min。（3）继续
蛋白质的胶体金标记
当蛋白质的最适稳定量及标记的最佳pH值被确定以后，便可进行标记。具体步骤如下。（1）根据标记所用胶体金的总量计算出所需要待标记蛋白质的总量。（2）边搅拌边将蛋白质溶液加入胶体金溶液中，逐渐加入，lmg的蛋白质量大约需5min,或在搅拌下将胶体金逐渐加入到蛋白质溶液中，大约需 5~10min。（3）继
Nanolive实现无标记活细胞骨架与微丝3D成像分析
间充质干细胞（MSC)是多能干细胞，可从脐带组织，脂肪组织，牙髓或羊水中获得，主要来源于人骨髓，能够分化成各种间充组织如软骨、脂肪、骨头、肌肉、肌腱和基质组织。其特性使其成为非常有前途的医学治疗手段，是挑战治疗器官和组织修复的研究热点，并且已经在一些如炎症性肠病和其他免疫紊乱，或缺血性心脏病的应用中
荧光成像与高光成像区别
荧光成像与高光成像区别如下：1、原理：荧光成像是利用荧光标记的分子在激发后发出特定波长的光来成像，而高光成像是基于样本的反射或透射光强度的差异来成像。2、样本处理：荧光成像需要在样本中引入荧光标记物，通常是通过染色或基因工程技术来实现，而高光成像则不需要对样本进行特殊处理，直接观察样本的自然反射或透
胶体金标记蛋白质的纯化
标记好的免疫金探针必须经过纯化处理才能用于IHC染色，尤其是免疫电镜的染色。纯化的目的就是除去其中未标记的蛋白质，未充分标记的胶体金及在标记过程可能形成的各种聚合物。其纯化方法有超速离心法、色谱柱法以及以上二者相结合应用。（一）超迷离心法根据胶体金颗粒大小不同及蛋白质种类不同，离心的转速和时间也不同
蛋白质的生物合成标记实验
实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 甲硫氨酸PBS仪器、耗材 培养箱离心管实验步骤 1. 培养悬浮细胞至对数增长期，室温300 g 离心5 min。回收107~108细胞。 2. 每2×107细胞用约10 ml 37℃的短时间标记培养基在圆锥型试管中洗涤，于室温300 g 离心5 min 回收细胞，小
蛋白质的生物合成标记实验
甲硫氨酸短时间标记悬液中的细胞 甲硫氨酸短时间标记贴壁培养细胞 甲硫氨酸对细胞进行脉冲追踪标记 实验材料 蛋白质
蛋白质的生物合成标记实验
甲硫氨酸短时间标记悬液中的细胞 甲硫氨酸短时间标记贴壁培养细胞 甲硫氨酸对细胞进行脉冲追踪标记 实验材料 蛋白质
活体成像中荧光色素标记细胞的方法
实验概要本实验以研究干细胞活体移植后的存活率为例，简介了一两种内源性荧光色素标记的实验方法。实验原理活体光学成像(Optical in vivo Imaging)主要采用生物发光（bioluminescence）技术与荧光（fluorescence）技术。生物发光是用荧光素酶(Lucifer
光学成像与光声成像对比
小动光学活体成像主要采用生物发光（bioluminescence）与荧光（fluorescence）两种技术。生物发光是用荧光素酶（Luciferase）基因标记细胞或DNA，而荧光技术则采用荧光报告基团（GFP、RFP, Cyt及dyes等）进行标记。利用一套非常灵敏的光学检测仪器，让研究
靶蛋白的放射标记实验—酵母和细菌蛋白质代谢放射标记
实验材料 细胞 仪器、耗材 基本培养基 实验步骤 1. 接种细胞于只含有必需氨基酸和辅因子的已知成分的基本培养基，于合适温度中度振荡培养过夜。 2. 用新鲜的基本培养基稀释培养物，继续温育至 107 细胞/ml （酵母）或对数期中期（细菌）。 3. 5000
重组蛋白质的代谢标记实验
实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 胎牛血清甲硫氨酸半胱氨酸仪器、耗材 培养瓶离心机转子实验步骤 1. 接种2.5×106细胞于盛有4 ml 含10%胎牛血清的完全培养液的60 mm 肌组织培养皿中。对每一假定重组病毒分别准备一个平皿供感染用，并准备一个对照平皿供野生型杆状病毒感染。于27℃温育
重组蛋白质的代谢标记实验
基本方案 实验材料 蛋白质 试剂、试剂盒
头发中独特蛋白质标记可识别身份
DNA检测技术已在寻找罪犯方面发挥很大威力。但DNA检测是找到犯罪分子的唯一手段吗？美国一项最新研究称，头发中的独特蛋白质标记同样可以用于身份识别，让那些犯罪分子无所遁形。 每个人的DNA都是独一无二的，这是DNA检测常用于犯罪调查或考古研究的原因所在。但这一手段也存在不足，因为随着时
重组蛋白质的代谢标记实验
由于重组蛋白质表达的时候，宿主蛋白质的合成基本终止，因此体内代谢标记是检测重组蛋白质的敏感方法。实验材料蛋白质试剂、试剂盒胎牛血清甲硫氨酸半胱氨酸仪器、耗材培养瓶离心机转子实验步骤1. 接种2.5×106细胞于盛有4 ml 含10%胎牛血清的完全培养液的60 mm 肌组织培养皿中。对每一假定重组病
蛋白质的生物合成标记实验（二）
实验材料细胞试剂、试剂盒PBS甲硫氨酸仪器、耗材培养箱离心机实验步骤1. 在100 mm 直径的培养皿上培养贴壁细胞（0.5~2×107）至70%~90%汇片，吸去培养液，用10 ml 于37℃短时间标记培养基轻轻搖晃冼两次细胞。2. 加入5 ml 于37℃短时间标记培养基，在5%CO2的加湿培
头发中独特蛋白质标记可识别身份
DNA检测技术已在寻找罪犯方面发挥很大威力。但DNA检测是找到犯罪分子的唯一手段吗？美国一项最新研究称，头发中的独特蛋白质标记同样可以用于身份识别，让那些犯罪分子无所遁形。 每个人的DNA都是独一无二的，这是DNA检测常用于犯罪调查或考古研究的原因所在。但这一手段也存在不足，因为随着时间的流
蛋白质的生物合成标记实验（一）
甲硫氨酸短时间标记悬液中的细胞生物按照从脱氧核糖核酸 (DNA)转录得到的信使核糖核酸（mRNA）上的遗传信息合成蛋白质的过程。由于mRNA上的遗传信息是以密码（见遗传密码）形式存在的，只有合成为蛋白质才能表达出生物性状，因此将蛋白质生物合成比拟为转译或翻译。实验材料蛋白质试剂、试剂盒甲硫氨酸PBS
蛋白质的生物合成标记实验（三）
实验材料细胞试剂、试剂盒甲硫氨酸PBS仪器、耗材离心机培养箱实验步骤1. 准备和用［35S］甲硫氨酸标记细胞，用0.2~1 mCi/ml 的［35S］甲疏氨酸脉冲标记细胞5~30 min。 2. 脉冲标记后，除去［35S］甲硫氨酸培养基，用10 ml 于37℃追加培养基冼细胞1次，加入10 ml
多光子显微镜成像：无标记成像在发育生物学中的应用
光学成像可用于发育生物学，从而了解生物体的形成、揭示组织再生机制、认识并管理先天性缺陷和胚胎衰竭等。其中最受关注的两个问题：一是心脏在早期发育中会发生剧烈的形态变化，其潜在功能和生物力学方面仍有待研究；二是中枢神经系统发育异常会导致先天性的疾病，所以需要从动力学、功能和生物力学等方面对大脑发
活体成像中荧光染料的选择与成像
Cy5.5（Ex/Em：678/701 nm）和Cy7（Ex/Em：749/776 nm）是对分子标记的最优选择之一；DiD（Ex/Em：644/663 nm）、DiR（Ex/Em：748/780）染料则常用于活体成像实验中对细胞进行标记。 一、Cy5.5 、Cy7 Cy5.5 、Cy7避开了可见
活体成像中荧光色素标记细胞的方法举例
活体成像中荧光色素标记细胞的方法举例 活体光学成像(Optical in vivo Imaging)主要采用生物发光（bioluminescence）技术与荧光（fluorescence）技术。生物发光是用荧光素酶(Luciferase)基因标记细胞或DNA，今天，生物发光标记物可以标记到任何