脱落细胞单细胞悬液的制备——冲洗液细胞样品的制备

实验方法原理在临床工作中,可以收集到大量自然脱落细胞,这些细胞标本经过简单处理,便可成为较好的单细胞悬液供流式细胞术分析。主要包括脱落细胞、胸腹水细胞、尿液、内镜刷检细胞等。实验材料膀胱试剂、试剂盒生理盐水PBS仪器、耗材尼龙网实验步骤1. 用 300~500 ml 生理盐水冲洗膀胱,冲洗一定时间后,吸出冲洗液放入容器中于冰箱内置 6~12 h。2. 取沉淀液 20~40 ml,离心沉淀并以生理盐水洗 2 次,吸上清。3. 加 10 ml PBS 液,混匀;以 300 目尼龙滤网过滤,离心沉淀去上清。4. 过滤后 1000 r/min,10 min,离心沉淀,去上清;加固定液或低温保存备用。......阅读全文

流式细胞术的样品制备(七种样品的制备方法)(一)

流式细胞术的样品制备流式细胞术的实验检测对象是单细胞悬液,因此需把样品制备成细胞悬液,细胞浓度为105~107个/ml。制备成的单细胞悬液经荧光或免疫荧光标记即可上机检测。样本制备的基本原则:1.使各种液体和悬浮细胞样本新鲜,尽快完成样本制备和检测;2.针对不同的细胞样本进行适当洗涤、酶消化或EDT

细胞RNA含量样品的制备及分析

实验材料单细胞悬液试剂、试剂盒PY 试剂醋酸缓冲液磷酸缓冲液DNA 酶消化液实验步骤一、试剂配制1. PY 试剂的配制:PY 1.0 g 以 100 ml 蒸馏水溶解,配成母液,置 4℃ 冰箱保存。PY 工作液:取 1 ml PY 母液,加入 1 mol/L pH 4.7 的醋酸缓冲液 100 ml

细胞RNA含量样品的制备及分析

            实验材料 单细胞悬液 试剂、试剂盒 PY 试剂 醋酸缓冲液 磷酸缓冲液 DNA

细胞RNA含量样品的制备及分析

细胞RNA含量样品的制备及分析             实验材料 单细胞悬液 试剂、试剂

细胞RNA-含量样品的制备及分析

实验材料 单细胞悬液试剂、试剂盒 PY 试剂醋酸缓冲液磷酸缓冲液DNA 酶消化液实验步骤 一、试剂配制1. PY 试剂的配制:PY 1.0 g 以 100 ml 蒸馏水溶解,配成母液,置 4℃ 冰箱保存。PY 工作液:取 1 ml PY 母液,加入 1 mol/L pH 4.7 的醋酸缓冲液 100

电镜酶细胞化学实验——样品制备

目前电镜能定位的酶主要有三类,它们是水解酶、氧化酶、转移酶。通过电镜酶细胞化学技术间接证明酶的存在,可定性研究细胞的标志酶,以及在正常和病理状态下酶的改变与疾病之关系。实验方法原理电镜酶细胞化学反应分两步:①细胞内酶在一定条件下与底物进行初级酶反应(形成初级产物);②应用捕捉剂与初级产物反应形成电子

流式细胞术细胞凋亡检测样品的制备实验

实验步骤根据实验方案诱导细胞凋亡,制备单细胞悬液,使用 Annexin V-FITC 细胞凋亡检测试剂盒,通过Annexin V抗体与磷脂丝氨酸(PS)的特异性结合来检测细胞凋亡的情况。1. 将10×的结合缓冲液用蒸馏水稀释成为1×,冰育。2. 悬浮细胞在低温环境中,用PBS洗涤细胞2次(800~1

流式细胞术细胞凋亡检测样品的制备实验

实验步骤 根据实验方案诱导细胞凋亡,制备单细胞悬液,使用 Annexin V-FITC 细胞凋亡检测试剂盒,通过Annexin V抗体与磷脂丝氨酸(PS)的特异性结合来检测细胞凋亡的情况。1. 将10×的结合缓冲液用蒸馏水稀释成为1×,冰育。2.

流式细胞术细胞凋亡检测样品的制备实验

实验步骤 根据实验方案诱导细胞凋亡,制备单细胞悬液,使用 Annexin V-FITC 细胞凋亡检测试剂盒,通过Annexin V抗体与磷脂丝氨酸(PS)的特异性结合来检测细胞凋亡的情况。1. 将10×的结合缓冲液用蒸馏水稀释成为1×,冰育。2.

流式细胞术细胞凋亡检测样品的制备实验

实验步骤 根据实验方案诱导细胞凋亡,制备单细胞悬液,使用 Annexin V-FITC 细胞凋亡检测试剂盒,通过Annexin V抗体与磷脂丝氨酸(PS)的特异性结合来检测细胞凋亡的情况。1. 将10×的结合缓冲液用蒸馏水稀释成为1×,冰育。2. 悬浮细胞在低温环境中,用PBS洗涤细胞2次(800~

红细胞保养液的制备方法

阿氏液(Alsever):即红细胞保养液枸橼酸钠(5H2O) 0.80g枸橼酸(H2O) 0.055g葡萄糖 2.05g氯化钠 0.42g双蒸水 加至 100 ml将以上试剂加热溶解于双蒸水中,调整pH至6.8,115℃灭菌10min,4℃保存备用。2. 0.5% 鸡红细胞制备方法先用灭菌注射器吸取

单细胞转录组制备仪的技术指标

  将 C1 应用于单细胞 mRNA 测序,可以从多个细胞个 体平行处理多达 96 个 cDNA 文库,在任何 Illumina 测序仪上对 mRNA表达进行相对定量。此系统的主要特征包括: 高通量  -可对 96 个单细胞进行大规模平行、连贯的制备, 引入条形码序列标记(Barcode),可将测序

网织红细胞样品的制备及分析

实验方法原理 网织红细胞是一种未完全成熟红细胞。在细胞成熟过程中,其胞质中的 RNA 含量逐渐被血红蛋白所取代,因此,检测红细胞中 RNA 的含量多少,就代表了红细胞的成熟程度。从而成为检测网织红细胞的重要方法。网织红细胞计数可以判断骨髓红细胞系统造血情况。溶血性贫血时由于大量网织红细胞进入

网织红细胞样品的制备及分析

            实验方法原理 网织红细胞是一种未完全成熟红细胞。在细胞成熟过程中,其胞质中的 RNA 含量逐渐被血红蛋白所取代,因此,检测红细胞中 RNA 的含量多少,就代表了红细胞的成熟程度。从而成为检测网织红细胞的重要方法。网织红细胞计数可以判断骨髓

流式细胞术常用样品的制备方法

实验概要流式细胞术的实验检测对象是单细胞悬液,因此,在组织化学和免疫组织化学实验中欲对待测样品细胞进行分类计数,也需把样品制备成细胞悬液,并要求被检细胞大小为0.2~80pm,每个样品中至少有20 000个细胞,细胞浓度为105~107个/ml。制备成的单细胞悬液经荧光或免疫荧光标记即可上机检测。本

网织红细胞样品的制备及分析

实验方法原理网织红细胞是一种未完全成熟红细胞。在细胞成熟过程中,其胞质中的 RNA 含量逐渐被血红蛋白所取代,因此,检测红细胞中 RNA 的含量多少,就代表了红细胞的成熟程度。从而成为检测网织红细胞的重要方法。网织红细胞计数可以判断骨髓红细胞系统造血情况。溶血性贫血时由于大量网织红细胞进入血循环,可

网织红细胞样品的制备及分析

            实验方法原理 网织红细胞是一种未完全成熟红细胞。在细胞成熟过程中,其胞质中的 RNA 含量逐渐被血红蛋白所取代,因此,检测红细胞中 RNA 的含量多少,就代表了红细胞的成熟程度。从而成为检测网织红细胞的重要方法。网织红细胞计数可以判断骨髓

研究提出植物单细胞制备新方法

高通量单细胞转录组测序技术(scRNA-seq)用于植物与农学研究时,单细胞制备存在技术挑战。近日,中国科学院分子植物科学卓越创新中心等通过底层技术创新,开发了新的植物单细胞制备方法FX-Cell。该方法提升了单细胞制备效率,实现了难以酶解植物组织、农田及冻存样品的scRNA-seq,为加速植物细胞

酶的细胞化学反应的样品制备过程

酶细胞化学的一个重要问题是既要保存好细胞内酶的活性,又要保存好细胞的结构,因此选择适当的固定剂种类、浓度、固定的方式和时间是细胞化学技术的一个关键问题。光镜样品固定多选用中性福尔马林或多聚甲醛,4℃、24小时,常规的石蜡包埋切片可以满足相当一部分酶的细胞化学要求;电镜样品固定通常用0.5~2%戊二醛

一定浓度菌悬液的制备

园友Gloria1983,lphare推荐麦氏比浊法。园友loveswh2006 提供的微生物实验指导(黄文芳,张松编著,华南师范大学生命科学学院)在实验15微生物数量的测定中有详细的操作介绍。微生物数量的测定细菌群体生长表现为细胞数目的增加或细胞物质的增加。测定细胞数目的方法有显微镜直接计数法(d

实质肝细胞悬浮液的制备

 灌流液1)        无钙灌流液:每1000ml含NaCl 8.3g、KCl 0.5g、Hepes 2.4g、NaOH(1mol/L)6ml,在37℃时,PH=7.5,渗透压为315mOsm;2)        胶元酶灌流液:每100ml含NaCl 0.4g、KCl 0.05g、Hepes 2

TIL细胞的制备

实验概要本实验从肿瘤组织中分离制备了TIL细胞。主要试剂1. RPMI-16402.Ⅰ、Ⅳ型胶原酶、DNA酶3. 0.001%的透明质酸酶和DNA酶4. IL-2主要设备80目和200目不锈钢网实验材料肿瘤组织实验步骤1. 无菌切取肿瘤组织或肿瘤浸润的局部淋巴结,置于含抗生素的RPMI-1640培养

痰液脱落细胞的检查

(一)痰液脱落细胞检查标本采集方法 1.采集痰液的基本要求:采集痰液的质量和方法直接影响痰检查阳性率。采集痰液的基本要求是:①痰液必须新鲜。②痰液必须是肺部咳出。 2.细胞学检查方法 (1)痰液细胞学检查:方法简便易行,患者无痛苦,适用于肺癌高危人群的普查。 (2)支气管液细胞学检查:为在纤维支气

流式细胞术常规检测时的样品制备

一、流式细胞术常规检测时的样品制备  (一)直接免疫荧光标记法  取一定量细胞(约1X106细胞/ml),在每一管中分别加入50μl的HAB,并充分混匀,于室温中静置1分钟以上(),再直接加入连接有荧光素的抗体进行免疫标记反应(如做双标或多标染色,可把几种标记有不同荧光素的抗体同时加入),。孵育20

细胞蛋白质总量样品的制备及分析

实验步骤取 20 mg 异硫氰酸荧光素,加 20 ml 无水乙醇,使 FITC 充分溶解,即为染色液的原液,保存于 4℃ 冰箱待用。具体荧光染色步骤如下:1. FITC 贮存液的稀释:用 pH 7.4 的 PBS 液稀释成 50 ug/ml 浓度的工作液,备用。2. 被染色细胞首先用 70% 酒精破

使用扫描电镜观察细胞样品的制备方法

电子显微镜下的神奇世界 一、原理 超薄切片实际上是样品的二维切片,不能表达细胞的三维结构,而且在观察切片后所拍摄的显微照片时,容易造成错误的印象,用扫描电子显微镜  ( SEM )能直接观察标本表面的三维空间结构,真实地反映各种细胞表面和断裂面的形态特征,其照明源与透射电镜基本相同,由

细胞蛋白质总量样品的制备及分析

实验步骤 取 20 mg 异硫氰酸荧光素,加 20 ml 无水乙醇,使 FITC 充分溶解,即为染色液的原液,保存于 4℃ 冰箱待用。具体荧光染色步骤如下:1. FITC 贮存液的稀释:用 pH 7.4 的 PBS 液稀释成 50 ug/ml 浓

细胞蛋白质总量样品的制备及分析

实验步骤 取 20 mg 异硫氰酸荧光素,加 20 ml 无水乙醇,使 FITC 充分溶解,即为染色液的原液,保存于 4℃ 冰箱待用。具体荧光染色步骤如下:1. FITC 贮存液的稀释:用 pH 7.4 的 PBS 液稀释成 50 μg/ml 浓度的工作液,备用。2. 被染色细胞首先用 70% 酒精

细胞蛋白质总量样品的制备及分析

实验步骤 取 20 mg 异硫氰酸荧光素,加 20 ml 无水乙醇,使 FITC 充分溶解,即为染色液的原液,保存于 4℃ 冰箱待用。具体荧光染色步骤如下:1. FITC 贮存液的稀释:用 pH 7.4 的 PBS 液稀释成 50 ug/ml 浓

使用扫描电镜观察细胞样品的制备方法

一、原理 超薄切片实际上是样品的二维切片,不能表达细胞的三维结构,而且在观察切片后所拍摄的显微照片时,容易造成错误的印象,用扫描电子显微镜( SEM )能直接观察标本表面的三维空间结构,真实地反映各种细胞表面和断裂面的形态特征,其照明源与透射电镜基本相同,由电子枪经聚光镜汇聚成极细