染色体分离实验——Percoll梯度法

实验材料染色质试剂、试剂盒精胺精咪Percoll 溶液仪器、耗材聚碳酸酯离心管实验步骤1. 在体积为 10 ml 分离得到的染色质物质中加入精胺和精咪至终浓度分別为 0.8 mmol/L 和 2 mmol/L。2. 加入 10 ml Percoll 溶液,匀浆分离得到的染色质。Percoll 溶液:89% (v/v) Percoll5 mmol/L Tris-HCl ( pH 7.4)2 mmol/L EDTA0.8 mmol/L 精胺2 mmol/L 精咪0.1 % 毛地黄皂苷3. 再加 15 ml Percoll 溶液到匀浆中,充分混匀。4. 将 35 ml 的 Percoll 混合物加入 50 ml 的聚碳酸酯离心管中,用一固定角度转头(Beckman Instruments) 在 4℃,20000 r/min 离心 30 分钟。5. 吸出染色体带上面的全部物质,将梯度中的染色体回收于大约 10 ml 的 Percoll ......阅读全文

分离核仁实验——高镁法分离核仁

实验材料细胞试剂、试剂盒Dulbecco’s 盐溶液蔗糖核仁保存液仪器、耗材Teflon-玻璃匀浆器实验步骤1. 准备溶液Dulbecco’s 盐溶液:0.136 mol/L NaCl2.6 mmol/L KCl8 mmol/L Na2HPO41.4 mmol/L KH2PO4,pH 7.0蔗糖 A

细胞分离纯化技术

Percoll不连续密度梯度沉淀法分离纯化淋巴细胞和淋巴母细胞实验方法原理Percoll是一种包有乙烯吡咯烷酮的硅胶颗粒。渗透压很低(

单个核细胞的分离纯化

外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)主要指淋巴细胞和单核细胞,是免疫学实验最常用的细胞,也是进行T细胞和B细胞分离纯化的重要环节。1.原理PBMC的密度与血液中的其他成分不同。红细胞和粒细胞的密度较大,为1.092左右;淋巴细胞和单核细胞的

PH梯度萃取分离及柱色谱分离原理

pH梯度萃取法是分离酸性、碱性、两性成分常用的手段.其原理是由于溶剂系统 pH变化改变了它们的存在状态(游离型或解离型),从而改变了它们在溶剂系统中的分配系数.如混合黄酮苷元,由于结构中酚羟基的数目和位置不同,...

外周血中嗜碱性粒细胞(BASO)分离方法

Percoll密度梯度离心分离法:1、Pcrcoll混悬液的配制:Percoll 90ml,HBSS 9ml, HEPES(0.25mol/l)1ml(PH 7.3),HCL(1mol/l)0.4ml 调节至PH7.42、制备Percoll密度梯度管密度 Percoll/HBSS(ml/ml)1.0

培养细胞染色体显示法实验

实验方法原理 培养细胞有来源易得、细胞分裂率高和制出标本清晰度高等优点,是制备染色体极好的对象。实验材料 细胞试剂、试剂盒 HanksNaHCO3培养基血清秋水仙素仪器、耗材 酒精灯镊子培养瓶吸管离心管实验步骤 1.  培养细胞取处于指数生长期、用较大瓶皿培养的、80 %~90 %汇合单层培养细胞;

小鼠单个核细胞分离一步梯度法去除死细胞

PriCells-小鼠单个核细胞分离一步梯度法去除死细胞 基本原理活细胞(密度较小)和死细胞(密度较大)密度不同,从而有助于将活的淋巴细胞和红细胞分离。 附加材料高密度溶液:Ficoll-Paque(Ficoll和泛影酸钠;Pharmacia LKB)或Lympholyte-M(Cedarlane)

什么叫PH梯度萃取分离

PH梯度萃取分离就是根据不同物质在不同PH下析出沉淀的原理来提纯所需物质pH梯度萃取法是分离酸性、碱性、两性成分常用的手段。其原理是由于溶剂系统 pH变化改变了它们的存在状态(游离型或解离型),从而改变了它们在溶剂系统中的分配系数。如混合黄酮苷元,由于结构中酚羟基的数目和位置不同,各自所呈酸性强弱不

核细胞分离的原理及分层液法的分离步骤

  单个核细胞PBMC的密度与血液中的其他成分不同。红细胞和粒细胞的密度较大,为1.092左右;淋巴细胞和单核细胞的密度为1.076~1.090;血小板为1.030~1.035。因此,利用一种密度介于1.076~1.090之间、近于等渗的溶液(分层液)进行密度梯度离心,可使不同类别的血细胞按其相应密

组织的分离实验_离心分离法

实验方法原理如培养物为血液、羊水、腹水和胸水等细胞悬液时,可采用离心法分离。一般用低速500~1000 转/分速度,离心5~10 分钟即可。如悬液量大,离心时间可适当延长,但如离心速度过大和时间太长,易压挤细胞使之受损或死亡。微量全血法淋巴细胞培养时,可不必进行淋巴细胞分离,可采用全血培养法。在需用

组织的分离实验_EDTA-消化分离法

实验方法原理EDTA是一种非酶性消化物,常用不含Ca2+和Mg2+的BSS 配成0.02%的工作液。关于EDTA的作用机制一般认为是:一些组织,尤其是上皮组织,在生存中需要Ca2+和Mg2+才能维持组织的完整性。EDTA能从这些组织生存环境中吸收这些离子,形成螯合物,能促进细胞相互分离。EDTA 作

染色体相邻分离

中文名称相邻分离英文名称adjacent segregation定  义染色体平衡易位携带者相互易位杂合子,在粗线期由于同源染色体紧密配对形成特异的“十字形”图像,并在相继的分裂过程中十字形图像逐渐开放形成环形,相邻的两条染色体分离至同一极,即称相邻分离。应用学科遗传学(一级学科),细胞遗传学(二级

培养细胞染色体显示法实验——传代培养细胞染色体显示法

实验方法原理培养细胞有来源易得、细胞分裂率高和制出标本清晰度高等优点,是制备染色体极好的对象。实验材料细胞试剂、试剂盒HanksNaHCO3培养基血清秋水仙素仪器、耗材酒精灯镊子培养瓶吸管离心管实验步骤1.  培养细胞取处于指数生长期、用较大瓶皿培养的、80 %~90 %汇合单层培养细胞;2.  加

分离肝脏质膜的-Neville-法实验

分离肝脏质膜的 Neville 法实验             实验材料 切碎的大鼠肝脏 试剂、试

细菌平板划线分离培养法实验

(1)曲线划线分离法:此法多用于含菌量不多的标本或培养咽拭、棉拭所取的培养物,将标本或咽拭、棉拭培养物直接涂布于培养基的 1/5 处,然后用接种环或直接用咽拭(棉拭)作曲线连续划线接种。(2)分区划线分离法:此法多用于含菌量较多的粪便等标本的细菌分离培养。先用接种环取粪便标本,将其涂布在培养基的

实验中常用分离法介绍

蒸馏、升华、结晶、沉淀、溶剂萃取、离子交换、色谱分离、离心分离、电渗析、电化学分离方法、盐析。

分离肝脏质膜的-Neville-法实验

实验材料切碎的大鼠肝脏试剂、试剂盒溶液 A蔗糖溶液 B仪器、耗材Doimce 氏玻璃匀浆器离心管折射仪SW-28 转头及薄壁 polyallomer(同质异晶聚合物)SW-28 离心管实验步骤材料与设备切碎的大鼠肝脏(约 25 g; 冷冻保存至用前)注:人的胎盘是极好的制取胰岛素受体的原料。遗憾的是

细菌平板划线分离培养法实验

实验步骤(1)曲线划线分离法:此法多用于含菌量不多的标本或培养咽拭、棉拭所取的培养物,将标本或咽拭、棉拭培养物直接涂布于培养基的 1/5 处,然后用接种环或直接用咽拭(棉拭)作曲线连续划线接种。(2)分区划线分离法:此法多用于含菌量较多的粪便等标本的细菌分离培养。先用接种环取粪便标本,将其涂布在培养

组织的分离实验_机械分散法

试剂、试剂盒Hanks仪器、耗材镊子网筛碟皿吸管注射器培养瓶实验步骤一、切割分离法在进行组织块培养时,可采用剪切法,一般多剪切成1 mm3大小的块。具体操作如下:1.  无菌切取1 cm3组织一块,置入青霉素瓶或小烧杯中,左手斜持容器,右手持眼科尖剪或弯剪(剪柄较长为好)伸入容器中,反复剪切组织至1

分离肝脏质膜的-Neville-法实验

实验材料 切碎的大鼠肝脏试剂、试剂盒 溶液 A 蔗糖溶液 B仪器、耗材 Doimce 氏玻璃匀浆器离心管 折射仪SW-28 转头及薄壁 polyallomer(同质异晶聚合物)SW-28 离心管实验步骤 材料与设备切碎的大鼠肝脏(约 25 g; 冷冻保存至用前)注:人的胎盘是极好的制取胰岛素受体的原

微生物分离纯化实验——平板划线分离法

实验方法原理该方法操作简便,普通用于微生物的分离与纯化。其基本原理包括两方面:1. 选择适合于待分离微生物的生长条件,如营养、酸碱度、湿度和氧等要求或加入某种抑制剂造成只利于该微生物生长,而抑制其他微生物生长的环境,从面淘汰一些不需要的微生物。2. 微生物在固体培养基上生长形成的单个菌落可以是由一个

小鼠精原细胞的分离和纯化

实验概要精原细胞的生理生化特性及其分裂增殖、分化、运动、衰老、死亡等项生命活动的调节机制的深入研究,精子发生机理的进一步阐明以及精原细胞异体、异种移植技术的实际应用,都迫切需要找到一种可行的方法将其分离纯化,以期得到较高产量和纯度的有活力的精原细胞,用于体外培养。资料表明,从成年啮齿类的睾丸分离粗线

血细胞的分离方法1

血细胞由红细胞,白细胞,血小板等组成.实验中常用白细胞来做研究,如炎症渗出,细胞迁移,识别等都涉及到白细胞.白细胞又分为:粒细胞,淋巴细胞,单核细胞等.它们具有不同的功能.实验中常需要分离血细胞方能进行。这里主要论述人外周白细胞的分离,主要是中性粒细胞(Neutrophil),淋巴细胞(Lympho

染色体分离的概念

中文名称染色体分离英文名称segregation of chromosome定  义减数分裂中,成对的同源染色体彼此分开的过程。导致每个配子只获得各对同源染色体中的一条。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞周期与细胞分裂(二级学科)

染色体相邻分离1

中文名称相邻分离-1英文名称adjacent-1 segregation定  义相互易位杂合子组成的“十字形”的四条染色体,在后期I分离时,左侧的上(正常)、下(易位)两条相邻染色体和右侧的上(易位)、下(正常)两条相邻染色体分别移至两极的分离过程。这样所形成的配子一般是致死的。应用学科遗传学(一级

染色体相邻分离2

中文名称相邻分离-2英文名称adjacent-2 segregation定  义相互易位杂合子组成的“十字形”的四条染色体,在后期I分离时,上半部的左(正常)、右(易位)两条相邻染色体和下半部左(易位)、右(正常)两条相邻染色体分别移至两极的分离过程。所形成的配子一般是致死的。应用学科遗传学(一级学

染色体的相间分离

中文名称相间分离英文名称alternate segregation定  义相互易位杂合子减数分裂过程中形成了具双环“8”形染色体的结构,两条非邻近染色体走向一极,另两条非邻近染色体走向另一极,也就是两条正常染色体走向一极,两条易位的染色体走向另一极的分离过程。这样所形成的配子都具有完整的染色体组,是

染色体组型分析实验_观察法

实验方法原理染色体组型分析是对染色体组中处于有丝分裂中期时染色体的数目、大小、形态、着丝点的位置以及次缢痕、随体的有无等形态特征作一描述。将一个细胞内的染色体按照一定的顺序排列起来所构成的图像就称为该细胞的核型。 染色体的排列原则:①染色体的大小(即长度),②着丝粒的位置,③特殊标记。实验材料小鼠仪