支原体培养实验——支原体半固体培养基接种法

实验方法原理一、标本采集 支原体常侵及人和动物的粘膜表面,一般可用棉花拭子涂抹取样后放入2~3 ml支原体液体培养基的小管中,或取其分泌液,若标本是组织块,可在灭菌乳钵或玻璃匀浆后接种,取样后应尽快接种培养。 二、分离培养 混种法:在制备半固体培养基时,培养基加热溶化,温度降至50℃时,添加动物血清、酵母浸液及青霉素后混匀,待冷却至37~40℃时,用无菌滴管吸取标本0.5~1 ml加入培养基中,充分混匀,凝固后置37℃孵育。 三、结果观察 绝大多数支原体为兼性厌氧,少数在含10% CO2和相对湿度80~90%的大气环境中生长良好。支原体生长缓慢,多数于3~4 d长出菌落,少数于1~2 w方长出典型菌落,在平皿固体培养基上生长的菌落呈"油煎蛋"状,边缘不整齐。实验材料肺炎支原体试剂、试剂盒糖酵解培养基基础培养基牛血清酵母浸液酚红醋酸铊青霉素仪器、耗材培养皿烧杯玻......阅读全文

支原体培养实验——支原体半固体培养基接种法

实验方法原理一、标本采集 支原体常侵及人和动物的粘膜表面,一般可用棉花拭子涂抹取样后放入2~3 ml支原体液体培养基的小管中,或取其分泌液,若标本是组织块,可在灭菌乳钵或玻璃匀浆后接种,取样后应尽快接种培养。 二、分离培养 混种法:在制备半固体培养基时,培养基加热溶化,温度降至50℃时,添加动物血清

支原体培养实验——支原体固体培养基接种法

支原体(mycoplasma):又称霉形体,为目前发现的最小的最简单的原核生物。支原体细胞中唯一可见的细胞器是核糖体(支原体是原核细胞,原核细胞的细胞器只有核糖体)。实验材料肺炎支原体试剂、试剂盒糖酵解培养基基础培养基牛血清酵母浸液酚红醋酸铊青霉素仪器、耗材培养皿烧杯玻璃棒天平移液管离心机棉花拭子实

支原体培养实验

实验材料 肺炎支原体试剂、试剂盒 糖酵解培养基基础培养基牛血清酵母浸液酚红醋酸铊 青霉素仪器、耗材 培养皿烧杯玻璃棒天平移液管离心机棉花拭子实验步骤 一、标本采集 支原体常侵及人和动物的粘膜表面,一般可用棉花拭子涂抹取样后放入2~3 ml支原体液体培养基的小管中,或取其分泌液,若标本是组织块,可在灭

培养法检测支原体

培养法最为可靠且成本低廉,但培养周期较长。常用于细胞以及I临床治疗细胞的支原体检查。1、所需仪器设备及培养基(1)仪器设备:培养箱,显微镜。(2)培养基①支原体肉汤培养基。②精氨酸肉汤培养基。③支原体琼脂培养基。2、检查方法(1)样品的贮存:样品如在24h以内进行支原体检测,则可贮存在2—8℃;如果

半固体双糖含铁培养基配置实验_斜面法

实验方法原理该培养基用酚红作指示剂,碱性时呈红色,酸性时呈黄色,上层培养基中的乳糖用于鉴别肠道杆菌,致病菌不分解乳糖而大肠杆菌则能分解乳糖产酸使上层斜面变为黄色。还可检查细菌能否分解含硫氨基酸产生硫化氢,若产生硫化氢则与硫酸亚铁作用形成黑色硫化亚铁。硫代硫酸钠起还原作用,以防止硫化氢被氧化而影响结果

支原体的检测实验_培养检测法

实验方法原理这是用支原体培养基方法进行检测,培养法稍显繁锁,但比较精确。实验材料肉汤血清试剂、试剂盒细胞悬液仪器、耗材培养基实验步骤1.  肉汤制备用支原体肉汤(Sigma 产)和北京生物制品所制两种均可;用前加10%马血清;2.  培养每45 ml肉汤培养基加2.5×106 /ml细胞悬液5 ml

液体培养基与半固体培养基

液体培养基与半固体培养基除了在液体培养基中加入凝固剂制备的固体培养基外,一些上、由于天然团体基质制成的培养基同样属于固体培养基。在实验室是固体培养基一般是加入平器皿或是试管中,制成培养微生物的平板斜面,固体培养基为微生物提供一个营养表面,单个微生物细胞在营养表面进行繁殖形成单个菌落。半固体培养中凝固

半固体双糖含铁培养基配置实验

实验方法原理该培养基用酚红作指示剂,碱性时呈红色,酸性时呈黄色,上层培养基中的乳糖用于鉴别肠道杆菌,致病菌不分解乳糖而大肠杆菌则能分解乳糖产酸使上层斜面变为黄色。还可检查细菌能否分解含硫氨基酸产生硫化氢,若产生硫化氢则与硫酸亚铁作用形成黑色硫化亚铁。硫代硫酸钠起还原作用,以防止硫化氢被氧化而影响结果

支原体培养

支原体常用培养基为PPLO,很多公司都有出售.但血清(常用马血清或猪血清)和抗生素(醋酸跎)你要自己加.你可以查查.还有改良的Frey's培养基,常用的微生物实验技术书上都可以查到的。可以自己配制的。在液体培养基中通常要加入酚红做指示剂的,当培养基由红色变为黄色时,即可判定支原体的生长程度。

细菌在固体培养基、液体培养基和半固体培养基上的生...

细菌在固体培养基、液体培养基和半固体培养基上的生长特性 1.固体培养基 标本或液体培养物划线接种到固体培养基表面后,单个细菌经分裂繁殖可形成一个肉眼可见的细菌集团,称为菌落(colony)。 (1)菌落的形态特征: 大小、形状(露滴状、圆形、菜花样、不规则等)、突起或扁平、凹陷、边缘

分离培养技术的材料与方法

1、材料(1)培养基:培养支原体用培养基。(2)器材及试剂:L玻棒、马血清、抑菌剂。2、方法(1)标本的采集;支原体常侵及人和动物的黏膜表面,可用灭菌棉拭子取分泌物接种于2—3ml支原体液体培养基的小管中。若标本是组织块,可在灭菌乳钵或玻璃匀浆器中研成乳浆后接种。取样后应尽快接种培养。分离培养:接种

关于半固体培养基的介绍

  半固体培养基,如果把少量的凝固剂加入到液体培养基中,就制成了半固体培养基。以琼脂为例,它的用量在0.2~0.7%之间。这种培养基有时可用来观察微生物的动力,有时用来保藏菌种。  固体培养基是在培养液中加了琼脂(琼脂,一种凝固剂,在44度以下都呈凝固状)。这种培养基常用于鉴定菌种和计数。  半固体

半固体培养基的基本介绍

  半固体培养基,如果把少量的凝固剂加入到液体培养基中,就制成了半固体培养基。以琼脂为例,它的用量在0.2~0.7%之间。这种培养基有时可用来观察微生物的动力,有时用来保藏菌种。  固体培养基是在培养液中加了琼脂(琼脂,一种凝固剂,在44度以下都呈凝固状)。这种培养基常用于鉴定菌种和计数。  半固体

固体培养基上细菌培养实验_辅助法

实验方法原理大肠杆菌的许多菌株在穿刺瓶中可以保存数年,在-70 °C则可以无限期保存。试剂、试剂盒琼脂DMSO仪器、耗材试管平板实验步骤一、穿刺保存1.  在一个耐高压的带有橡皮塞或Teflon盖的气密性小瓶中加人2/3体积穿刺培养基。2.  挑取一个单菌落,反复将接种环深刺人琼脂中。3.  拧松盖

固体培养基上细菌培养实验_影印法

实验方法原理为了更好地分析单菌落,菌落可以从一个平板转移到另一个平板,而菌落原有的分布形式保持不变。仪器、耗材金属圈绒布平板实验步骤1.  用金属圈将一块无菌的绒布套在影印模具上。无菌的滤纸块或一次性的影印平板均可使用。2.  标记主平板的方向,然后将该平板向下轻轻地压在绒布上。3.  按主平板的方

肺炎支原体分离用双相培养基

[用途]用于喉拭标本直接分离肺炎支原体。[配法]⑴ 底层琼脂斜面:其成分与上述支原体半固体琼脂相同,不加两性霉素B。无菌分装于经灭菌的链霉素空瓶中,每瓶3m1,置成斜面,此为底层。⑵ 液体培养基:其成分与上述支原体传代用液体培养基相同。但在未高压灭菌前,再加入葡萄糖1g,美蓝0.001g(即10

肺炎支原体及其快速培养法

支原体是一类缺乏细胞壁的原核细胞型,它既不同于,也不同于病毒,是介于细菌和病毒之间,能在无活细胞的人工培养基上生长繁殖的最小微生物。它广泛分布于自然界,与人类、 动植物的疾病有密切的关系。支原体的种类繁多,造成的危害非常广泛。目前证明对人体有致病作用的支原体有肺炎支原体、 解脲支原体、 人型支原

固体培养基上细菌培养实验_铺平板法

实验方法原理通过铺平板分离单个菌落实验材料培养物仪器、耗材平板涂布棒培养箱实验步骤1.  吸取0.05~1 ml培养物至一只干的平板上。2.  用涂布棒作圆周运动将培养液涂布均匀,或用涂布棒的边缘在平板的表面画光栅图案(一系列平行线),然后转动平板并与已涂布的平行线成直角重复涂布。3.  于37 °

固体培养基上细菌培养实验_连续稀释法

实验方法原理通过连续稀释法滴定和分离细菌菌落。实验材料噬菌体试剂、试剂盒LB仪器、耗材试管平板实验步骤1.  在3个16~18 mm的无菌培养试管中各加人5 ml LB培养液。2.  吸取5 μl细菌培养液加人1号试管中振荡5 S。 3.  接着从1号试管吸5 μl稀释液加入2号试管振荡摇匀,再从2

固体培养基上细菌培养实验_平板划线法

实验方法原理通过平板划线法分离单菌落试剂、试剂盒培养液仪器、耗材平板接种环牙签实验步骤1.  用接种环或无菌牙签将接种菌体从琼脂平板的一侧开始划线。2.  重新消毒接种环或用新的无菌牙签,从第一划线处将样品划线至平板的其余部分,重复划线至少一次。3.  于37 °C培养直至长出单菌落。如果要从很多的

美国药典中的支原体检测

支原体是一类没有细胞壁,能够自我复制的,可以通过过滤器并能够通过人工培养增殖的原核微生物,其不能进行革兰氏染色,但染色时会留下菌落的印记。支原体是寄生虫和共生体,有些可能对多种动植物宿主致病。在人类中,支原体通常是表面寄生虫定植于呼吸道和泌尿道的上皮内壁,感染可能会持续很长时间,而不会引起明显的细胞

急性非淋菌性尿道炎的检查

  NGU的实验室检查主要是指沙眼衣原体和解脉支原体的病原学和血清学检查。  直接免疫荧光法  直接免疫荧光法是将特异的衣原体单克隆抗体用荧光素标记后来检查标本中衣原体,如标本中有衣原体抗原(包涵体或原体),则和抗体结合,在荧光显微镜下可见苹果绿色的荧光。一张涂片中衣原体原体数在10个以上时,结果判

半固体培养基培养的细菌在代谢类型

半固体培养基是按培养基的物理形态划分的,主要用来观察微生物的运动,比如用穿刺接种法接种带鞭毛的细菌,由于鞭毛细菌的运动可在穿刺线的周围形成横向生长。而支持不同代谢类型的培养基,通常是按培养基按营养成分和用途不同划分,可分为基础培养基、合成培养基、营养培养基、鉴别培养基、选择培养基和厌氧培养基。两者是

非淋球菌性尿道炎的检查介绍

  NGU的实验室检查主要是指沙眼衣原体和解脉支原体的病原学和血清学检查。  直接免疫荧光法  1.直接免疫荧光法是将特异的衣原体单克隆抗体用荧光素标记后来检查标本中衣原体,如标本中有衣原体抗原(包涵体或原体),则和抗体结合,在荧光显微镜下可见苹果绿色的荧光。一张涂片中衣原体原体数在10个以上时,结

非淋球菌性尿道炎的检查

  GU的实验室检查主要是指沙眼衣原体和解脉支原体的病原学和血清学检查。  直接免疫荧光法  1.直接免疫荧光法是将特异的衣原体单克隆抗体用荧光素标记后来检查标本中衣原体,如标本中有衣原体抗原(包涵体或原体),则和抗体结合,在荧光显微镜下可见苹果绿色的荧光。一张涂片中衣原体原体数在10个以上时,结果

解脉支原体的分离检测非淋球菌尿道炎的介绍

  解脉支原体的分离培养解脉支原体可以在含有尿素的人工培养基中生长,分解尿素产生氨,使培养基变为碱性,培养基中的指示剂由黄变红。因此,如将标本接种于液体培养基中,液体培养基由黄变红,液体仍澄清时,则可能有支原体生长。此时吸出培养物少许,经稀释后接种于固体或半固体培养基中,经3-5天培养。检查时,先用

细菌分离之斜面培养基接种法实验

实验方法原理此法适用于纯培养和保存菌种,也可用于尿素和克氏双糖培养基的鉴别试验。由于目的不同接种的方法略有差异。用于纯培养的斜面接种法是将接种环(针)灭菌, 挑取单个菌落从培养基底向上划一道直线,然后以蛇形划线接种在琼脂斜面上即可,鉴别培养基斜面接种是用接种针,挑取待鉴定菌落的细菌,一般应取菌落

细菌分离之斜面培养基接种法实验

实验方法原理此法适用于纯培养和保存菌种,也可用于尿素和克氏双糖培养基的鉴别试验。由于目的不同接种的方法略有差异。用于纯培养的斜面接种法是将接种环(针)灭菌, 挑取单个菌落从培养基底向上划一道直线,然后以蛇形划线接种在琼脂斜面上即可,鉴别培养基斜面接种是用接种针,挑取待鉴定菌落的细菌,一般应取菌落的顶

固体培养基配制实验

固体培养基可以分为两类:(1)一类是用天然的固体状物质制成的,如用马铃薯块、麸皮、米糠、豆饼粉、花生饼粉制成的培养基,酒精厂、酿造厂等常用这种培养基;(2)另一类是在液体中添加凝固剂而制成的,如实验室中常用的琼脂固体斜面和固体平板培养基。这种培养基广泛用于微生物的分离、鉴定、保藏、计数及菌落特征的观

支原体感染的实验室诊断

 在性传播疾病中,支原体感染与非淋菌性尿道炎的发生密切相关,也可引起前列腺炎、附睾炎、不育及妇女上下生殖道的炎症等。根据国内目前实际情况,现介绍常见的3种支原体,即 解脲脲原体(解脲支原体,Uu)、人型支原体(Mh) 和生殖支原体(Mg)的实验室诊断。一、解脲支原体(Uu)感染的实验室诊断:  (一