支原体培养实验——支原体固体培养基接种法

支原体(mycoplasma):又称霉形体,为目前发现的最小的最简单的原核生物。支原体细胞中唯一可见的细胞器是核糖体(支原体是原核细胞,原核细胞的细胞器只有核糖体)。实验材料肺炎支原体试剂、试剂盒糖酵解培养基基础培养基牛血清酵母浸液酚红醋酸铊青霉素仪器、耗材培养皿烧杯玻璃棒天平移液管离心机棉花拭子实验步骤一、标本采集 支原体常侵及人和动物的粘膜表面,一般可用棉花拭子涂抹取样后放入2~3 ml支原体液体培养基的小管中,或取其分泌液,若标本是组织块,可在灭菌乳钵或玻璃匀浆后接种,取样后应尽快接种培养。 二、分离培养 转动拭子将标本液体尽量挤出,用无菌滴管吸1~2滴接种在平皿上盖好,用L棒涂抹或倾斜转动平皿使标本均匀分布,置37℃孵育。 三、结果观察 绝大多数支原体为兼性厌氧,少数在含10% CO2和相对湿度80~90%的大气环境中生长良好。支原体生长缓慢,多数于3~4 d长出菌落,少......阅读全文

支原体培养实验——支原体固体培养基接种法

支原体(mycoplasma):又称霉形体,为目前发现的最小的最简单的原核生物。支原体细胞中唯一可见的细胞器是核糖体(支原体是原核细胞,原核细胞的细胞器只有核糖体)。实验材料肺炎支原体试剂、试剂盒糖酵解培养基基础培养基牛血清酵母浸液酚红醋酸铊青霉素仪器、耗材培养皿烧杯玻璃棒天平移液管离心机棉花拭子实

支原体培养实验——支原体半固体培养基接种法

实验方法原理一、标本采集 支原体常侵及人和动物的粘膜表面,一般可用棉花拭子涂抹取样后放入2~3 ml支原体液体培养基的小管中,或取其分泌液,若标本是组织块,可在灭菌乳钵或玻璃匀浆后接种,取样后应尽快接种培养。 二、分离培养 混种法:在制备半固体培养基时,培养基加热溶化,温度降至50℃时,添加动物血清

支原体培养实验

实验材料 肺炎支原体试剂、试剂盒 糖酵解培养基基础培养基牛血清酵母浸液酚红醋酸铊 青霉素仪器、耗材 培养皿烧杯玻璃棒天平移液管离心机棉花拭子实验步骤 一、标本采集 支原体常侵及人和动物的粘膜表面,一般可用棉花拭子涂抹取样后放入2~3 ml支原体液体培养基的小管中,或取其分泌液,若标本是组织块,可在灭

培养法检测支原体

培养法最为可靠且成本低廉,但培养周期较长。常用于细胞以及I临床治疗细胞的支原体检查。1、所需仪器设备及培养基(1)仪器设备:培养箱,显微镜。(2)培养基①支原体肉汤培养基。②精氨酸肉汤培养基。③支原体琼脂培养基。2、检查方法(1)样品的贮存:样品如在24h以内进行支原体检测,则可贮存在2—8℃;如果

支原体的检测实验_培养检测法

实验方法原理这是用支原体培养基方法进行检测,培养法稍显繁锁,但比较精确。实验材料肉汤血清试剂、试剂盒细胞悬液仪器、耗材培养基实验步骤1.  肉汤制备用支原体肉汤(Sigma 产)和北京生物制品所制两种均可;用前加10%马血清;2.  培养每45 ml肉汤培养基加2.5×106 /ml细胞悬液5 ml

支原体培养

支原体常用培养基为PPLO,很多公司都有出售.但血清(常用马血清或猪血清)和抗生素(醋酸跎)你要自己加.你可以查查.还有改良的Frey's培养基,常用的微生物实验技术书上都可以查到的。可以自己配制的。在液体培养基中通常要加入酚红做指示剂的,当培养基由红色变为黄色时,即可判定支原体的生长程度。

固体培养基上细菌培养实验_辅助法

实验方法原理大肠杆菌的许多菌株在穿刺瓶中可以保存数年,在-70 °C则可以无限期保存。试剂、试剂盒琼脂DMSO仪器、耗材试管平板实验步骤一、穿刺保存1.  在一个耐高压的带有橡皮塞或Teflon盖的气密性小瓶中加人2/3体积穿刺培养基。2.  挑取一个单菌落,反复将接种环深刺人琼脂中。3.  拧松盖

固体培养基上细菌培养实验_影印法

实验方法原理为了更好地分析单菌落,菌落可以从一个平板转移到另一个平板,而菌落原有的分布形式保持不变。仪器、耗材金属圈绒布平板实验步骤1.  用金属圈将一块无菌的绒布套在影印模具上。无菌的滤纸块或一次性的影印平板均可使用。2.  标记主平板的方向,然后将该平板向下轻轻地压在绒布上。3.  按主平板的方

肺炎支原体分离用双相培养基

[用途]用于喉拭标本直接分离肺炎支原体。[配法]⑴ 底层琼脂斜面:其成分与上述支原体半固体琼脂相同,不加两性霉素B。无菌分装于经灭菌的链霉素空瓶中,每瓶3m1,置成斜面,此为底层。⑵ 液体培养基:其成分与上述支原体传代用液体培养基相同。但在未高压灭菌前,再加入葡萄糖1g,美蓝0.001g(即10

肺炎支原体及其快速培养法

支原体是一类缺乏细胞壁的原核细胞型,它既不同于,也不同于病毒,是介于细菌和病毒之间,能在无活细胞的人工培养基上生长繁殖的最小微生物。它广泛分布于自然界,与人类、 动植物的疾病有密切的关系。支原体的种类繁多,造成的危害非常广泛。目前证明对人体有致病作用的支原体有肺炎支原体、 解脲支原体、 人型支原

固体培养基上细菌培养实验_铺平板法

实验方法原理通过铺平板分离单个菌落实验材料培养物仪器、耗材平板涂布棒培养箱实验步骤1.  吸取0.05~1 ml培养物至一只干的平板上。2.  用涂布棒作圆周运动将培养液涂布均匀,或用涂布棒的边缘在平板的表面画光栅图案(一系列平行线),然后转动平板并与已涂布的平行线成直角重复涂布。3.  于37 °

固体培养基上细菌培养实验_连续稀释法

实验方法原理通过连续稀释法滴定和分离细菌菌落。实验材料噬菌体试剂、试剂盒LB仪器、耗材试管平板实验步骤1.  在3个16~18 mm的无菌培养试管中各加人5 ml LB培养液。2.  吸取5 μl细菌培养液加人1号试管中振荡5 S。 3.  接着从1号试管吸5 μl稀释液加入2号试管振荡摇匀,再从2

固体培养基上细菌培养实验_平板划线法

实验方法原理通过平板划线法分离单菌落试剂、试剂盒培养液仪器、耗材平板接种环牙签实验步骤1.  用接种环或无菌牙签将接种菌体从琼脂平板的一侧开始划线。2.  重新消毒接种环或用新的无菌牙签,从第一划线处将样品划线至平板的其余部分,重复划线至少一次。3.  于37 °C培养直至长出单菌落。如果要从很多的

美国药典中的支原体检测

支原体是一类没有细胞壁,能够自我复制的,可以通过过滤器并能够通过人工培养增殖的原核微生物,其不能进行革兰氏染色,但染色时会留下菌落的印记。支原体是寄生虫和共生体,有些可能对多种动植物宿主致病。在人类中,支原体通常是表面寄生虫定植于呼吸道和泌尿道的上皮内壁,感染可能会持续很长时间,而不会引起明显的细胞

细菌分离之斜面培养基接种法实验

实验方法原理此法适用于纯培养和保存菌种,也可用于尿素和克氏双糖培养基的鉴别试验。由于目的不同接种的方法略有差异。用于纯培养的斜面接种法是将接种环(针)灭菌, 挑取单个菌落从培养基底向上划一道直线,然后以蛇形划线接种在琼脂斜面上即可,鉴别培养基斜面接种是用接种针,挑取待鉴定菌落的细菌,一般应取菌落

细菌分离之斜面培养基接种法实验

实验方法原理此法适用于纯培养和保存菌种,也可用于尿素和克氏双糖培养基的鉴别试验。由于目的不同接种的方法略有差异。用于纯培养的斜面接种法是将接种环(针)灭菌, 挑取单个菌落从培养基底向上划一道直线,然后以蛇形划线接种在琼脂斜面上即可,鉴别培养基斜面接种是用接种针,挑取待鉴定菌落的细菌,一般应取菌落的顶

固体培养基配制实验

固体培养基可以分为两类:(1)一类是用天然的固体状物质制成的,如用马铃薯块、麸皮、米糠、豆饼粉、花生饼粉制成的培养基,酒精厂、酿造厂等常用这种培养基;(2)另一类是在液体中添加凝固剂而制成的,如实验室中常用的琼脂固体斜面和固体平板培养基。这种培养基广泛用于微生物的分离、鉴定、保藏、计数及菌落特征的观

支原体感染的实验室诊断

 在性传播疾病中,支原体感染与非淋菌性尿道炎的发生密切相关,也可引起前列腺炎、附睾炎、不育及妇女上下生殖道的炎症等。根据国内目前实际情况,现介绍常见的3种支原体,即 解脲脲原体(解脲支原体,Uu)、人型支原体(Mh) 和生殖支原体(Mg)的实验室诊断。一、解脲支原体(Uu)感染的实验室诊断:  (一

分离培养技术的材料与方法

1、材料(1)培养基:培养支原体用培养基。(2)器材及试剂:L玻棒、马血清、抑菌剂。2、方法(1)标本的采集;支原体常侵及人和动物的黏膜表面,可用灭菌棉拭子取分泌物接种于2—3ml支原体液体培养基的小管中。若标本是组织块,可在灭菌乳钵或玻璃匀浆器中研成乳浆后接种。取样后应尽快接种培养。分离培养:接种

支原体的检测实验_电镜检测法

实验方法原理在用一般方法难以确定时,可做电镜检测。实验材料细胞试剂、试剂盒胰蛋白酶仪器、耗材吸管实验步骤1.  细胞培养 48~72 小时。2.  接近汇合前,用0.05%~0.25%胰蛋白酶消化细胞5~10 分钟。3.  用吸管轻轻吹打,制备成细胞悬液。

支原体的培养技巧

  支原体(霉形体)的培养技巧支原体是介于病毒与细菌之间的一类微生物,在自然界广泛存在,使人和多种动物、植物害病。  它缺乏细胞壁而不同于细菌,能在无细胞培养基生长繁殖,并含有RNA和DNA而有别于病毒。支原体以二分裂方式繁殖,基本形态为圆形、丝状形,后者易形成分枝状菌丝,因而得名支原体。其大小介于

什么是支原体培养

就是做支原体病毒的培养,看对哪些药物过敏,一般情况下,做支原体检查的时候,都需要做这项的检查,万一是阳性,就需要进行培养,看你身上带的病毒对哪种药反应较大,就用哪种药来进行治疗。

支原体培养的问与答

一、简介:支原体的大小为 0.1~0.3μm,可通过滤菌器,常给细胞培养工作带来污染的麻烦。菌落小(直径 0.1~1.0 mm),在固体培养基表面呈特有的「油煎蛋」状。无细胞壁,不能维持固定的形态而呈现多形性,对渗透压敏感,对抑制细胞壁合成的抗生素不敏感。革兰氏染色不易着色,故常用 Giemsa 染

肺炎支原体的临床微生物学特征

对支原体的研究始于人类探索家畜传染性疾病的病原,1898年法国Nocard及Roux用含动物血清的人工培养基从患牛肺疫的病灶中首次分离,当时命名为胸膜肺炎微生物(Pleuopneumonia organism,PPO)。随后在各地区不同类型动物标本中分离出同类微生物,因形态及培养特性与PPO

固体培养基上细菌培养实验

实验方法原理 通过平板划线法分离单菌落试剂、试剂盒 培养液仪器、耗材 平板接种环牙签实验步骤 1.  用接种环或无菌牙签将接种菌体从琼脂平板的一侧开始划线。2.  重新消毒接种环或用新的无菌牙签,从第一划线处将样品划线至平板的其余部分,重复划线至少一次。3.  于37 °C培养直至长出单菌落。如果要

临床上解脲支原体(uu)的检测方法

 (一)分离培养方法Uu在含95% 氮气和5%CO2 环境中生长良好。其生长最适pH为5.5-6.5,最适温度为36℃-37℃。Uu具有尿素酶,能分解尿素产氨,使含酚红指示剂的Uu液体培养基pH值上升,颜色由黄色变为红色。再将液体培养物转种到Uu固体培养基上,能生长成具特征性油煎蛋样集落。(

临床对解脲支原体(uu)的检测方法

(一)分离培养方法Uu在含95% 氮气和5%CO2 环境中生长良好。其生长最适pH为5.5-6.5,最适温度为36℃-37℃。Uu具有尿素酶,能分解尿素产氨,使含酚红指示剂的Uu液体培养基pH值上升,颜色由黄色变为红色。再将液体培养物转种到Uu固体培养基上,能生长成具特征性油煎蛋样集落。(1 )液体

PCR法检测支原体

实验方法原理PCR法的基本原理是酶促DNA合成反应,即在DNA模板、引物和脱氧核糖核酸存在下,经DNA聚合酶的作用,使DNA链扩增延伸。实验材料细胞样品试剂、试剂盒dNTPTapDNA聚合酶琼脂糖矿物油支原体检测试剂盒仪器、耗材超净工作台PCR仪电泳仪凝胶成像分析系统台式离心机旋涡混悬器实验步骤1.

PCR法检测支原体

PCR法是20世纪80年代中期建立起来的一种体外DNA扩增技术,其基本原理是酶促DNA合成反应,即在DNA模板、引物和脱氧核糖核酸存在下,经DNA聚合酶的作用,使DNA 链扩增延伸。该方法具有灵敏度高、特异性强、快速的特点,但其对实验环境的要求严格,实验成本较高,有时还有假阳性的现象出现。1、仪器设

PCR法检测支原体

PCR法是20世纪80年代中期建立起来的一种体外DNA扩增技术,其基本原理是酶促DNA合成反应,即在DNA模板、引物和脱氧核糖核酸存在下,经DNA聚合酶的作用,使DNA 链扩增延伸。该方法具有灵敏度高、特异性强、快速的特点,但其对实验环境的要求严格,实验成本较高,有时还有假阳性的现象出现。1、仪