制备EBV转化的B细胞
实验步骤基 本 方案材 料P M I - I O 完全培养基B 95-8 细 胞(绒猴细胞株; A T C C # C R L 1612),对数生长期外 周 肝 素 抗 凝 血(附 录 3 G ) ,扁桃体、脾脏细胞或骨髓P B SFicoll-Hypaque 溶液H B S Slmg/m l 环 胞 素 A , 100% (V /V ) 乙醇配制,一 20°C 保存Beckman 4°C 离心机及 JS4. 2 转 子(或替代品)0.45um 滤器50m l 锥底离心管25c m 2 细胞培养瓶展开......阅读全文
制-备-E-B-V-转-化-的-B-细胞
实验步骤基 本 方案材 料P M I - I O 完全培养基B 95-8 细 胞(绒猴细胞株; A T C C # C R L 1612),对数生长期外 周 肝 素 抗 凝 血(附 录 3 G ) ,扁桃体、脾脏细胞或骨髓P B SFicoll-Hypaque 溶液H B S Slmg/m l 环
多-克-隆-抗-血-清-的-制-备2
使 用 其 他 佐 剂 制 备 多 克 隆 抗 体 的 免 疫 接 种 法实验步骤用 其 他 佐 剂 制 备 多 克 隆 抗 体 的 免 疫 接 种 法附 加 材 料(其他材料见基本方案)TiterMaxttR-I (CytRx; 4°C 下储存少于 24 个月)或 Ribi 佐 剂 系 统(RAS
干细胞的鉴定实验——扫-描-电-镜-样-品-制-备-方-法
实验步骤扫 描 电 镜 样 品 制 备 方 法取材取材的要求基本与透射电镜相同,但观察样品面积可大些 [(l-l.5) mm x (3〜5)mm 。清洗组织表面如覆盖有黏液、分泌物 (如 气管、肠等) 或有一些杂物 (如胃表面除有分泌物外还有未消化的食物等) 的样品,需经过充分清洗后方可固定,否则将
干细胞的鉴定实验——透-射-电-镜-样-品-制-备-技-术
实验步骤透 射 电 镜 样 品 制 备 技 术为了满足透射电镜观察的要求,超薄切片必须做到以下几点:①切片能够耐受电子 束 的照射,在热和高真空条件下有一定的稳定性。②细胞的超微结构保存良好,尽量减少人工假象。③ 切 片 厚 度 一 般 在 60〜80nm 为 宜 。切片太薄可得到较高的分辨率,但
单-克-隆-抗-体-的-制-备——细胞融合与杂交瘤分选
实验步骤 在 筛 选 检 测(辅助方案 1 ) 方案完善之前不应进行细胞融合。由于在细胞融合后可对目标单克隆抗体进行检测的次数是有限的,在细胞融合前必须检查条件培养液以排除筛选时可能出现的人为因素影响。材 料SP2/0-Agl4 骨 髓 瘤 细 胞 系(药物标记的非分泌型; ATCC)添加10 mm
单-克-隆-抗-体-的-制-备——有限稀释克隆法
实验步骤 附 加 材 料(其他材料见基本方案 2)候 选 杂 交 瘤 系(见辅助方案 2)克隆和扩增用培养基(见辅助方案 4)微 孔 板 观 察 镜(由 Flow 实验室或 Dynatech 公司提供),可选的1.重悬候选杂交瘤所在孔中的细胞(见 辅 助 方 案 2 , 步 骤 4),用血细胞计数器
细菌过滤效率测试仪菌液备制有哪些?
一、主要用途K罩细菌过滤效率检测仪主要性能指标不仅符合《医用外科K罩技术要求》YY0469-2011 中附录 B 细菌过滤效率(BFE)试验方法第 B.1.1.1 试验仪器的要求,而且也符合美国试验材料学会 ASTMF2100、ASTMF2101、欧洲 EN14683 标准规定的要求,并在此基础上进
积极应对“未备先老”的老龄化
“我们是未富先老,未备先老。” 日前,在清华大学老龄社会研究中心成立大会暨应对老龄问题学术研讨会上,清华同恒规划设计研究院院长袁昕表示,因为城镇化发展速度超出预期,政府面临环境、经济、交通等种种问题,以至于老龄化问题始终没有被放在重要位置上。 中国的老年人口绝对数量居世界之首。截至2016年
粉末电阻测试仪试样处理备制及使用要求
粉末电阻测试仪试样处理备制及使用要求了解一下 1)在实验前建议对样品进行处理,对样品的制备,试样需要放置于恒定的环境下,及分开分类管理,样品的处理过程需要非常仔细防止环境污染或者不同样品之前的混合污染;需要保证每份样品的一致性,从而获得可靠数据。 2)试样制备过程中,请使用厂家
单-克-隆-抗-体-的-制-备——杂交瘤的建系
实验步骤 在单克隆抗体的特异性得到充分验证之前,应该对所有候选的杂交瘤进行建系。但为了减少不必要的工作量,可以选择其中 2 0 个最佳的候选孔。在检测这 2 0 个孔的培养上 清(见辅助方案1 ) 为阳性后,应该将这些孔的细胞进行冻存,同时进行有限稀释。附 加 材 料(其他材 料 见 基 本 方 案
单-克-隆-抗-体-的-制-备——克隆和扩增用培养基的制备
实验步骤 附 加 材 料(其他材料见基本方案 2)小鼠(以 BALB/c 小鼠为例), 5 或 6 只 , 4〜6 周龄,无 病 原 体(有可靠来源,避免支原体感染)75 cm2 组织培养用细颈瓶0.45 过滤装置1.用颈椎脱臼法或二氧化碳窒息法处死 5 或 6 只 小 鼠(附 录 2 G; 避免使
单-克-隆-抗-体-的-制-备——杂交瘤培养上清的筛选分析
实验步骤 附 加 材 料(其他材料见基本方案 2)在 9 6 孔板中生长的杂交瘤(见基本方案 2)添 加 10 mmol/L HEPES的 DMEM-2 0 完 全 培 养 基(附 录 1)多道移液器和9 6 孔板,可选的1.在倒置显微镜下观察生长的杂交瘤的孔数。确定是对所有孔进行细胞筛选还是只筛选
转危为“氨”-还需“碳”路绿色制氨
氨是现代工业及农业化肥的重要化工原料,也是氢能的主要载体之一。据国际氨能源协会报告,目前全球每年氨产量约2亿吨,然而生产原料98%来自化石燃料,是重要的二氧化碳排放“大户”。因此,当前急需找到清洁、可持续的绿色制氨方法。 近日,国际纯粹与应用化学联合会(IUPAC)评选出“2021年度化学领
转危为“氨”-还需“碳”路绿色制氨
氨是现代工业及农业化肥的重要化工原料,也是氢能的主要载体之一。据国际氨能源协会报告,目前全球每年氨产量约2亿吨,然而生产原料98%来自化石燃料,是重要的二氧化碳排放“大户”。因此,当前急需找到清洁、可持续的绿色制氨方法。 近日,国际纯粹与应用化学联合会(IUPAC)评选出“2021年度化学领
转危为“氨”-还需“碳”路绿色制氨
氨是现代工业及农业化肥的重要化工原料,也是氢能的主要载体之一。据国际氨能源协会报告,目前全球每年氨产量约2亿吨,然而生产原料98%来自化石燃料,是重要的二氧化碳排放“大户”。因此,当前急需找到清洁、可持续的绿色制氨方法。 近日,国际纯粹与应用化学联合会(IUPAC)评选出“2021年度化学领域
质粒DNA导入细菌细胞实验——CaCl2转化法
实验材料菌落质粒DNA试剂、试剂盒CaCl2仪器、耗材培养基平板实验步骤1. 接种一个单菌落于50 ml LB培养液中,于37°C中速摇床培养过夜(250 r/min)。2. 往一个2 L的烧瓶中加人400 ml LB培养液,再加入4 ml过夜培养液,于37°C摇床(250 r/min)培养至
单-克-隆-抗-体-的-制-备——单克隆抗体制备中的免疫接种
实验步骤 材料靶抗原:表达于细胞的抗原,或蛋白质、多肽生理盐水无血清培养基:仅用于细胞接种弗 氏 完 全 佐 剂( complete Freunds adjuvant, CFA), Sigma 公司实验动物:无 病 原 体 大 鼠 、小 鼠(推 荐 使 用 BALB/c小 鼠)或 仓 鼠(推荐使用C
细胞转瓶机简介
细胞转瓶机的结构细胞培养转瓶机是用于细胞培养的一种仪器,它的结构比较简单。主要由电动机,支架,滚轴,和细胞培养滚瓶所构成。电动机是一个电源控制系统,控制滚轴转动的速度。支架起到支撑的作用,是转瓶机的支架系统。滚轴是带动转瓶机进行转动的结构。细胞培养滚瓶用来盛装培养液,用于培养细胞。 细胞转瓶机的分类
如何健康“备孕”?
最近的一则新闻刷爆了人们的眼球:“一名36岁的男子平时工作太忙没有时间锻炼。但最近为了备孕每夜坚持跑三公里。然而,一周之后身体出现异常,小便居然变成了酱油色。经医生诊断。该名男子被确诊换上了横纹肌溶解症,而且是‘老病复发’的情况。对此,医生建议运动还是要循序渐进,量力而行”。 对于这则新闻,网
细胞转瓶机的分类和类型
细胞转瓶机有多种分类方式和类型,一般可以按照培养方式,转速,转瓶体积,瓶位数进行分类。用户需要根据自己的需求进行合理的选择。(1)培养方式按照培养方式进行分类,细胞转瓶机可以分为悬浮培养,贴壁培养,贴壁/悬浮培养二合一。(2)转瓶转速不同类型的细胞转瓶机的转速不同。通常情况下,贴壁培养的细胞转瓶机,
细胞转瓶机的分类和类型
细胞转瓶机有多种分类方式和类型,一般可以按照培养方式,转速,转瓶体积,瓶位数进行分类。用户需要根据自己的需求进行合理的选择。(1)培养方式按照培养方式进行分类,细胞转瓶机可以分为悬浮培养,贴壁培养,贴壁/悬浮培养二合一。(2)转瓶转速不同类型的细胞转瓶机的转速不同。通常情况下,贴壁培养的细胞转瓶机,
细胞转瓶机的分类和类型
细胞转瓶机有多种分类方式和类型,一般可以按照培养方式,转速,转瓶体积,瓶位数进行分类。用户需要根据自己的需求进行合理的选择。 (1)培养方式 按照培养方式进行分类,细胞转瓶机可以分为悬浮培养,贴壁培养,贴壁/悬浮培养二合一。 (2)转瓶转速 不同类型的细胞转瓶机的转速不同。通常情况下,贴
上海“表单制”推进危化品治理
上海市召开危险化学品安全监管联席会议全体会议暨危险化学品安全综合治理工作推进会。会议发布《上海市危险化学品安全综合治理工作措施分解表》,明确危化品治理目标、进度和工作安排,以“表单制”细化分解和推进危化品安全综合治理工作。 上海市安委办印发的《分解表》,梳理出全市危化品生产、储存、使用、经营、
10000转离心能使细胞破裂吗
10000转离心非常有可能使细胞破裂的一般收集细胞只需要1000转,不超过3000转就肯定可以把细胞都离心下来了10000转离心非常快了,一般都是用在细胞破碎之后收集上清液才需要这样高的转速,如果是收集细胞时候这么高的转速很容易让部分细胞破裂掉的
稳转细胞株构建原理
稳转株即稳定表达细胞株,指的是基于某一细胞系构建的持续过表达或干扰某特定基因的细胞系。稳定细胞系建立的原理将外源DNA/shRNA克隆到带有某种抗性基因的载体上,重组载体被转染至宿主细胞并整合到其染色体中,并能随细胞分裂稳定传递下去,用载体中所含抗性基因进行筛选。常用的真核表达载体抗性筛选标志物有新
毕赤酵母PEG1000转化方法
实验概要本文介绍了毕赤酵母PEG1000转化方法。据称PEG比LiCl 方法好,但不如去壁细胞及电转化法,但对没有电转装置的人来说,更方便,效率为102-103/ugDNA。主要试剂Buffer A:1M山梨醇,10mM bicine(N-二(羟乙基)甘氨酸)pH8.35,3%(v/v)乙二醇Buf
企业为何“不想转”“不敢转”“不会转”?
企业“不想转”“不敢转”“不会转”,资源要素支撑相对不足,高端化、智能化、绿色化、融合化水平参差不齐,转型升级环境尚待优化……7月4日,在“粤商·省长面对面协商座谈会”上,关于传统产业转型升级的讨论热火朝天。 习近平总书记在二十届中央财经委员会第一次会议上强调,“坚持推动传统产业转型升级,不能
煤制气规模化发展值得关注
2013年12月24日,大唐煤制气项目所产煤制天然气送达北京北石槽天然气门站进入城市供气管网。据报道,中国拟在建的煤制天然气项目约有39个,设计总产能达1765亿立方米/年。 2013年我国天然气产量约1200亿立方米,天然气消费约1700亿立方米,天然气进口依赖系数进一步提高到29.41
氨基酸代谢标记实验_备择方案-3-长期细胞标记
实验方法原理长期标记意味着对细胞进行 6~32 h 持续的代谢标记。该方法特别适用于研究合成速度相对较慢的蛋白质或研究成熟的标记蛋白而不是生物合成的前体。稳定状态的标记是长期标记的一种形式,在此过程细胞和放射性标记的氨基酸一起孵育直至放射性标记蛋白的合成和降解速率相当。如果蛋白质复合体中的亚基的初级