PCR检测人T细胞受体基因的表达
实验步骤 基 本 方 案 PCR检 测 人 T 细胞受体基因的表达展......阅读全文
P－C－R－检－测－人－T－细－胞－受－体－基－因－的－表－达
实验步骤 基 本 方 案 PCR检 测 人 T 细胞受体基因的表达展
P－C－R－检－测－小－鼠－T－细－胞－受－体－表－达
实验步骤 基本方案 I P C R 分析小鼠 T C R 基因表达材 料正常小鼠的组织匀浆或者是 H B S S 制备的单个细胞悬液（IO4〜IO7) (附 录 1)无菌水展开
ELISPOT方－法－检－测－分－泌－细－胞－因－子－的－细－胞
实验步骤基本方案材 料包被缓冲液洗液：含 0.25% (v/v) Tween 20 的 PBS 溶液阻断缓冲液：含 5 % (m/V) BSA 或 FCS 的 PBS 溶液VRPMMO 完全培养基（或其他适宜培养基）分泌细胞因子的细胞（小鼠或人的）丝裂原，抗原或其他促细胞因子分泌的刺激物带有标记物的
小－鼠－巨－噬－细－胞－的－表－型－检－测
实验步骤基 本 方 案 直 标 法 检 测 小 鼠 巨 噬 细 胞 的 表 型材料Sorvall RT 6000B 离心机I . 准 备 4 只 12m m X 75m m 试管，将试管编号为 1〜4。每 管 中 加 入 2 X IO7个细胞/ml细胞悬液 50ul。2.每管加入 3 mg/ml 阻
B－细－胞－分－泌－抗－体－的－检－测
实验步骤基 本 方案材 料外周 血 单 个 核 细 胞（P B M C ; 单 元 8.1)RPMI- 5 和 RPMI-IO 完全培养基P W M 溶液9 6 孔 平 底 培 养 板（Costar)1 . 计 数 PBMC (附录 3A ) ， 用 RPMI-5 完全培养基调整浓度至 4 X 10
流－式－细－胞－仪－检－测－全－血－的－人－淋－巴－细－胞
实验步骤基本方案材 料（打 V 项 目 见 附 录 1)全血，通 常 用 E D T A 抗凝P B S ，有 或 无 0.1% (m /V ) 叠氮钠，过滤除菌单 克 隆 抗 体（标记的，未标记的或生物素化的），通过滴定确定最佳工作浓度间 标 二 抗（仅用于未标记的一抗）F T T C 标记的链霉
PCR－检－测－细－胞－因－子－m－R－N－A－的表达
实验步骤基 本 方 案 定 量 IL -2 mRNA表达水平材 料内参照：转 录 质 粒 载 体（含有临床生物检测标本相关的c D N A )胍盐溶液50 U/ul RNasin5 X 反转录酶缓冲液0.5m g / m l olig (d T )16l m g /m l 乙酰化的B S A4d N
细－胞－毒－性－T－淋－巴－细－胞－的－诱－导－及－检－测
实验步骤基 本 方 案 1 从 C TL 前体中诱导细胞毒性注意：反应细胞应根据抗原的种类选择是否需要进行体内致敏。材 料反应细胞来源：未致敏的或者体内致敏的小鼠脾脏细胞（见辅助方案 1 和 2致敏培养基刺激细胞来源：未修饰或半抗原修饰的小鼠脾脏细胞（见辅助方案 3)R P M I -1 0 完全培
BrdU－检－测－丁－细－胞－和－B－细胞增殖
实验步骤基本方案材 料实验动物0.8m g / m l B r d U (Sigma) 水 溶 液（口 服用）或 4m g / m l B r d U P B S 溶 液（注射用)P B S ， p H 7. 40.15mo l / L 冰冷的 NaCl冰 冷 的 9 5 % 乙醇多聚甲醛固定液D
巨－噬－细－胞－一－氧－化－氮－的－检－测
实验步骤基本方案材料展开
B－细－胞－功－能－的－增－殖－检－测－方－法
实验步骤基 本 方 案 抗 I g M 与 L P S 刺激的 B 细胞增殖材 料（带 V 项 目 见 附 录 1)纯化的静息 B 细 胞（单 元 2. 5)，采 用 Percoll 梯度离心制备V D M E M -10 完全培养基山羊抗 IgM (JacksonImmunoresearch) 或
NK/L－A－K－细－胞－杀－伤－活－性－的－检－测
实验步骤基 本 方案 51C r 释 放 法检 测 NK/LA K 细胞杀伤活性材 料展
巨－噬－细－胞－抗－肿－瘤－活－性－的－检－测
实验步骤基本方案 [111In] 释放法检测巨噬细胞对肿瘤细胞的杀伤作用材 料辅助方案 [111In ] 标记肿瘤靶细胞材 料展开
巨－噬－细－胞－吞－噬－功－能－和－杀－伤－功－能－的－检－测
实验步骤基本方案1 巨噬细胞吞噬功能的检测材 料单核/巨噬细胞：如巨噬细胞株、小鼠腹腔巨噬细胞[单元6.1，需 用 1 0 %豚蛋白胨或4 % (m /V ) 硫基乙酸盐肉汤]，或 人 P B M C (单 元 8.1)平衡盐溶液（balanced salt solution， BSS)细菌（如单核
干细胞的鉴定实验——流－式－细－胞－仪－检－测－分－析－技－术
实验步骤流 式 细 胞 仪 检 测 分 析 技 术实 验 材 料(1) 不同来源的干细胞，细胞数不少于 5xl0 5 个/管。(2) 荧光标记的抗体或抗体及荧光二抗。(3)PBS。实 验 步 骤(1) 将 细 胞 用 PBS 充分洗涤后重悬于 5000 PBS 中，如果细胞收集和鉴定不能同天完成，可
人－NK－T－细－胞－的－分－离－和－扩－增
实验步骤基本方案 1 NK T 细胞的鉴定材 料外周肝素抗凝血P B SR P M I -1640 培养基，含 1 0 % (V /V ) 人血清或 F C S 以 及 10U /m l I L -2 (可选）流 式 细 胞 缓 冲 液（flow cytometry buffer， FCbuffer
抗－体－的－体－内－诱－导－和－检－测
实验步骤基 本 方案 1 蛋白质或多糖抗原体内法诱导抗体的产生材 料人外周血类毒素混合物： 25Lf U/ml 白 喉 类 毒 素（Connaught Laboratories 或 State Laboratoriy Institute of Massachusetts) 与 IOLf U/ml 破
人胚胎干细胞系:衍生与培养实验——细－胞－培－养－基－成－分
实验步骤2.2.5 BRL-条件培养基B R L 细胞在大鼠肝细胞培养基（BRL-CM) 中生长至汇合，用新鲜培养基更换一次 ， 3 天后收集这些培养基。所有培养基用无菌的、孔 径 0.2um 的 P E S 滤膜过滤，特别是来自其他细胞类型的条件培养基。应该注意的是：在细胞分化研究中可能被用到的生
ELISA检－测－抗－体－的－含－量
实验步骤基 本 方案材 料展开
Fcγ－受－体－介－导－的－黏－附－作－用－和－吞－噬－作－用－的－检－测
实验步骤基本方案 FcY 受体介导的吞噬作用材 料原代巨噬细胞或巨噬细胞株（单 元 6.1 和 8. 5)R P M I -5 完 全 培 养 基（或其他培养基）绵 羊 红 细 胞（S R B C ) ，用 Alsever 溶 液 I : I (V /V ) 稀 释（附 录 1)生理盐水： 0. 9
河北：2793人因损害发展环境受处理
去年1月至今年3月，全省纪检监察机关共受理损害发展环境投诉举报3746件，对2793名责任人员进行了处理。这是5月23日记者从省政府新闻办召开的新闻发布会上获得的消息。 为服务、保障和促进改善发展环境，发挥纪检监察职能作用，我省印发了《关于纪检监察机关建立发展环境和生态环境问题投诉举报快速
IL－2－和－IL－4－的检测实验
实验步骤基 本 方 案 采 用 CTLL- 2 细 胞 检 测 小 鼠 IL - 2 和 IL -4材 料较 总 T C G F 和 抗 IL-4 存在时的 T C G F 单位数获得。通过比较抗 IL-4 抗体存在下的T C G F 活性和两种抗体都存在下的 T C G F 活性的不同来计算 IL
T－细－胞－克－隆－的－建－立
实验步骤基本方案 1 产生和维持同种反应性 T h 和 CTL 克隆尽管同种反应性 T 细胞可以从未刺激的脾细胞或淋巴结细胞中产生，但如果细胞在初次混合淋巴细胞（M L C ) 中第一次被同种抗原刺激，反应细胞的得率会更高。见以下介绍。材 料同种反应性小鼠脾脏 T 细胞V H B S S (可选使用
小－鼠－巨－噬－细－胞－的－分－离
实验步骤基 本 方 案 1 小鼠腹腔巨噬细胞的分离材料小鼠，洁 净 环 境 中 饲 养（最好置层流柜中饲养）7 3 % (m /V ) 豚 蛋 白 胨 或 者 3 % (W V r) Brewer 硫 基 乙 酸 盐 肉 汤（Brewerthioglycollate medium，分离炎性腹腔巨嗤细
合胞体的定义
含有由一层细胞膜包绕的多个核的一团细胞质，这通常是由于发生了细胞融合或一系列不完全细胞分裂周期所致。
T细胞克隆的建立
基本方案 1 产生和维持同种反应性 T h 和 CTL 克隆尽管同种反应性 T 细胞可以从未刺激的脾细胞或淋巴结细胞中产生，但如果细胞在初次混合淋巴细胞（M L C ) 中第一次被同种抗原刺激，反应细胞的得率会更高。见以下介绍。材 料同种反应性小鼠脾脏 T 细胞V H B S S (可选使用）V D
翻译后修饰蛋白质的定性和定量实验（三）
2.2 糖基化糖 基 化 是 一 种 常 见 的 P T M , 并 且 已 经 证 明 能 够 影 响 酶 的 活 性 、蛋 白 质 定 位 、稳 定 性 、信 号 转 导 、细 胞 黏 附 和 蛋 白 质 相 互 作 用 (Spiro, 2002k 目 前 已 经 发 现 在 肿 瘤 恶
细螺旋体病的介绍
细螺旋体病是一种人畜共患病，由于致病菌极易在污水中繁殖，洪水发生后很容易引发细螺旋体病的传播。该病的早期症状包括高烧、流口水、眼睛红肿及“茶色”尿液，如病菌入侵肾脏、肺和心脏可危及生命。是由钩端螺旋体感染产生的感染症，是热带、亚热带地区常见的人畜共通感染病。钩端螺旋体为细杆状螺旋型，两端呈现钩状
翻译后修饰蛋白质的定性和定量实验
蛋白质翻译后修饰 (PTM) 在细胞生物调节中发挥着基本作用。PTM 是 mRNA 翻译后蛋白质的酶促共价化学修饰。蛋白质化学修饰非常重要，因为它们会潜在地改变蛋白质的物理或化学性质、组成、活性、细胞定位或稳定性。实际上，在氨基酸或蛋白质的 N 端或 C 端加入或移除化学基团会导致大部分蛋白质发生变
翻译后修饰蛋白质的定性和定量实验（一）
一、引言蛋 白 质 翻 译 后 修 饰 (P T M ) 在 细 胞 生 物 调 节 中 发 挥 着 基 本 作 用 。 P T M 是 m R N A 翻译 后 蛋 白 质 的 酶 促 共 价 化 学 修 饰 。蛋 白 质 化 学 修 饰 非 常 重 要 ，因 为 它 们 会 潜 在 地