293T细胞包装和扩增反转录病毒
实验步骤基 本 方 案 1 磷酸钥/DNA 沉 淀瞬时转染 Phoenix 反转录包裝细胞展......阅读全文
293T-细-胞-包-装-和-扩-增-反-转-录-病-毒
实验步骤基 本 方 案 1 磷酸钥/DNA 沉 淀瞬时转染 Phoenix 反转录包裝细胞展
人-NK-T-细-胞-的-分-离-和-扩-增
实验步骤基本方案 1 NK T 细胞的鉴定材 料外周肝素抗凝血P B SR P M I -1640 培养基,含 1 0 % (V /V ) 人血清或 F C S 以 及 10U /m l I L -2 (可选)流 式 细 胞 缓 冲 液(flow cytometry buffer, FCbuffer
B-细-胞-功-能-的-增-殖-检-测-方-法
实验步骤基 本 方 案 抗 I g M 与 L P S 刺激的 B 细胞增殖材 料(带 V 项 目 见 附 录 1)纯化的静息 B 细 胞(单 元 2. 5),采 用 Percoll 梯度离心制备V D M E M -10 完全培养基山羊抗 IgM (JacksonImmunoresearch) 或
血细包分裂
一是有丝分裂(间接分裂) 在细胞分裂时,有特殊的丝体出现,故称为有丝分裂。有丝分裂是血细胞增殖的主要形式。正常人循环血中不出现有丝分裂细胞。有丝分裂细胞在造血组织中的数量,反映其增殖的程度和状态。分裂过程可分为4期,主要表现在核的变化上。 (1)前期(又称单丝球期):细胞开始分裂时,胞体变成
ELISPOT方-法-检-测-分-泌-细-胞-因-子-的-细-胞
实验步骤基本方案材 料包被缓冲液洗液:含 0.25% (v/v) Tween 20 的 PBS 溶液阻断缓冲液:含 5 % (m/V) BSA 或 FCS 的 PBS 溶液VRPMMO 完全培养基(或其他适宜培养基)分泌细胞因子的细胞(小鼠或人的)丝裂原,抗原或其他促细胞因子分泌的刺激物带有标记物的
流-式-细-胞-仪-检-测-全-血-的-人-淋-巴-细-胞
实验步骤基本方案材 料(打 V 项 目 见 附 录 1)全血,通 常 用 E D T A 抗凝P B S ,有 或 无 0.1% (m /V ) 叠氮钠,过滤除菌单 克 隆 抗 体(标记的,未标记的或生物素化的),通过滴定确定最佳工作浓度间 标 二 抗(仅用于未标记的一抗)F T T C 标记的链霉
细-胞-毒-性-T-淋-巴-细-胞-的-诱-导-及-检-测
实验步骤基 本 方 案 1 从 C TL 前体中诱导细胞毒性注意:反应细胞应根据抗原的种类选择是否需要进行体内致敏。材 料反应细胞来源:未致敏的或者体内致敏的小鼠脾脏细胞(见辅助方案 1 和 2致敏培养基刺激细胞来源:未修饰或半抗原修饰的小鼠脾脏细胞(见辅助方案 3)R P M I -1 0 完全培
BrdU-检-测-丁-细-胞-和-B-细胞增殖
实验步骤基本方案材 料实验动物0.8m g / m l B r d U (Sigma) 水 溶 液(口 服用)或 4m g / m l B r d U P B S 溶 液(注射用)P B S , p H 7. 40.15mo l / L 冰冷的 NaCl冰 冷 的 9 5 % 乙醇多聚甲醛固定液D
基于脾坏死病毒的载体
实验步骤 基 于 S N V 载体体系的反转录病毒的生成以及它们在各种细胞类型转导中的应用 材料 试剂 氯 化 钙(CaCl2) (2mol/L) 溶 解 14. 7 g C
基于脾坏死病毒的载体
实验步骤 基 于 S N V 载体体系的反转录病毒的生成以及它们在各种细胞类型转导中的应用材料试剂氯 化 钙(CaCl2) (2mol/L)溶 解 14. 7 g CaCl2 于 IOOml H2O 中。过滤除菌或高压灭菌。转染的细胞系: 293T 和 D17 (ATCC)甘 油(1 0 % 〜2
单-链-抗-体-的-噬-菌-体-展-示-技-术
实验步骤 基 本 方 案 1 全套单链抗体噬菌体载体的构建材 料新鲜分离的小鼠脾脏或者 IO7 杂 交 瘤 细 胞(单 元 1*3)R N A 提取试剂R T -P C R 试剂D E P C 水寡 核 苷 酸 引 物(表 14. 3.1)DNA marker琼脂糖胶回收试剂盒(Qiaquick G
磁-珠-法-分-离T-细-胞-和-B-细胞
实验步骤基 本 方 案 1 用 AUTOMACS 系 统 进行 总 T 细胞、 CD4 +细 胞 或 CD8+T细胞的自动分离材 料小鼠HBSS 洗涤缓冲液基 本 方 案 2 使 用 AUTOMACS 系 统 进 行 B 细胞的自动分选材 料小鼠HBSS 洗涤缓冲液MACS 缓冲液CD45R (B2
基于脾坏死病毒的载体
这一章描述的实验方法是基于我们关于来自S N V 及其紧密相连的R E V -A 载体的实 验 (P a r v ee n e t a L 2000)。我们曾用这两种病毒载体对各种细胞进行基因转移,包括初期的造血细胞、人脑及有丝分裂后的神经元细胞(Parveen etal.2000)。与其他反转录病
淋-巴-细-胞-活-化-过-程-中-肌-醇-磷-脂-周-转-的-分-析
实验步骤 基 本 方 案 1 通 过 道 威 克 斯(DOWEX) 离 子 交 换 层 析 分 析 [3H] 肌醇磷酸 材料 备 选 方 案 通 过 HPLC 方 法 分 析 [3H] 肌醇磷酸 附加材料 [3 H ] InsP 样 本(见基本方案,步 骤 6) 和标准
英国增扩国家复合材料中心
近日,英国商业大臣凯布尔在布里斯托出席“打造复合材料的未来”活动时为英国国家复合材料中心增扩设施揭幕。 成立于2011年的英国国家复合材料中心是英国高值弹射中心的七项研究与技术设施之一,旨在为英国航空和汽车等产业开发复合高级材料。历经三年发展,英国商业、创新与技能部通过英国创新署和高值弹射
厄尔尼诺“空降”-早稻产量不减反增
“受厄尔尼诺现象影响,从大面积来看,气候对湖南的早稻种植造成了一定的产量影响。但是我们合作社种植早稻的产量,应该比去年还每亩高出30—50公斤。尽管去年是个丰收年。”日前,在湖南益阳市赫山区召开的现代粮油生产示范工程建设推进会上的现场考察中,赫山区惠民农机专业合作社技术人员刘创业向科技日报记者
T-细-胞-克-隆-的-建-立
实验步骤基本方案 1 产生和维持同种反应性 T h 和 CTL 克隆尽管同种反应性 T 细胞可以从未刺激的脾细胞或淋巴结细胞中产生,但如果细胞在初次混合淋巴细胞(M L C ) 中第一次被同种抗原刺激,反应细胞的得率会更高。见以下介绍。材 料同种反应性小鼠脾脏 T 细胞V H B S S (可选使用
小-鼠-巨-噬-细-胞-的-分-离
实验步骤基 本 方 案 1 小鼠腹腔巨噬细胞的分离材料小鼠,洁 净 环 境 中 饲 养(最好置层流柜中饲养)7 3 % (m /V ) 豚 蛋 白 胨 或 者 3 % (W V r) Brewer 硫 基 乙 酸 盐 肉 汤(Brewerthioglycollate medium,分离炎性腹腔巨嗤细
液相色谱保护柱装反有什么后果
有两种情况:一种是保护柱是新柱,那即便装反,也没太多影响。另一种是保护柱是用过一般时间后,再装反了的,这个情况估计会将分析柱柱头堵塞,看看系统的压力是否有明显比以往增大,如果系统压力与以往差不多,那应该没啥大问题另外,很多时候,就算是分析柱,有时候柱子给堵塞了,一般的改决方法是反接分析柱进行适当的冲
B-细-胞-分-泌-抗-体-的-检-测
实验步骤基 本 方案材 料外周 血 单 个 核 细 胞(P B M C ; 单 元 8.1)RPMI- 5 和 RPMI-IO 完全培养基P W M 溶液9 6 孔 平 底 培 养 板(Costar)1 . 计 数 PBMC (附录 3A ) , 用 RPMI-5 完全培养基调整浓度至 4 X 10
SWOP2017包装世界(上海)博览会
时间:2017年11月7-10日 地点:中国 上海新国际博览中心 大会组织机构 主办单位:中国食品药品国际交流中心 杜塞尔多夫展览(上海)有限公司 雅式展览服务有限公司 海外支持:德国机械设备制造业联合会(VDMA) 食品加工与包装机械协会 塑料与橡胶机械协会 印刷和造纸技术协
农产品质量安全监测扩范围增频次
我国农产品质量安全监测合格率持续上升,并保持在一个较高的水平。今年上半年,全国259个大中城市蔬菜水果、畜产品和水产品的例行监测合格率分别达到96.2%、99.6%和96.0%,生鲜乳三聚氰胺抽检继续保持100%的合格率。农业部相关负责人日前接受记者采访时表示,总体上看,我国农产品的质量是安全的
巨-噬-细-胞-吞-噬-功-能-和-杀-伤-功-能-的-检-测
实验步骤基本方案1 巨噬细胞吞噬功能的检测材 料单核/巨噬细胞:如巨噬细胞株、小鼠腹腔巨噬细胞[单元6.1,需 用 1 0 %豚蛋白胨或4 % (m /V ) 硫基乙酸盐肉汤],或 人 P B M C (单 元 8.1)平衡盐溶液(balanced salt solution, BSS)细菌(如单核
巨-噬-细-胞-一-氧-化-氮-的-检-测
实验步骤基本方案材料展开
小-鼠-巨-噬-细-胞-的-表-型-检-测
实验步骤基 本 方 案 直 标 法 检 测 小 鼠 巨 噬 细 胞 的 表 型材料Sorvall RT 6000B 离心机I . 准 备 4 只 12m m X 75m m 试管,将试管编号为 1〜4。每 管 中 加 入 2 X IO7个细胞/ml细胞悬液 50ul。2.每管加入 3 mg/ml 阻
山东太阳能强装令扩权-12层以上建筑需安装
在经历“下乡”之后,太阳能热水器再次迎来“进城”的政策良机。日前,省住房和城乡建设厅通 报中明确提出“12层以上建筑推广和应用太阳能光热系统”。业内人士认为,一旦太阳能热水 器“强装令”扩权到12层以上建筑,无疑为太阳能热水器扫清了“进城”的最大障碍。
新品列装-再战江湖:珀金埃尔默公司访谈录
在如今的中国分析仪器市场,一提到气相色谱仪,许多人脑海中首先冒出的进口品牌很可能是“安捷伦科技”,或者是“日本岛津”。但稍微上一点年纪的人也许会记得,1955年全球第一台商品化154型气相色谱仪是由PerkinElmer公司推出的,这同样是一家在全球分析仪器及生命科学领域叱咤风云的老牌仪器制造公司。
检测凋亡和其他形式的细胞死亡
实验步骤 基本方案1 用活细胞或荧光染料定量细胞活性 显微镜观察是一种简单且准确的检测凋亡的方法。凋亡的标志性特征包括细胞核浓 缩 、细胞膜完整但出现发泡现象,以及清晰的胞质。 材 料 (带7 项 目 见 附 录 1) V 染料混合剂 P B S 的 细 胞 悬 液 (附 录 1
巨-噬-细-胞-抗-肿-瘤-活-性-的-检-测
实验步骤基本方案 [111In] 释放法检测巨噬细胞对肿瘤细胞的杀伤作用材 料辅助方案 [111In ] 标记肿瘤靶细胞材 料展开
外-源-性-抗-原-向-T-细-胞-的-呈-递
实验步骤基本方案 一 种 抗 原 加 工 处 理 和 呈 递 的 检 测 体 系材 料具有增殖能力的(如转化的 B 细胞)或非增殖的且与 T 杂交瘤细胞 M H C 匹配的抗原呈递细胞(单 元 7.1)D M E M -1 0 完全培养基, 37°C对数生长期的 T 杂交瘤细胞抗原:溶解于水的蛋白质