鸡球虫抗药株遗传学变异和蛋白质差异表达研究进展
摘 要: 目前,预防和治疗鸡球虫病的主要方法还是化学疗法,但抗药性虫株的出现给预防和治疗鸡球虫病带来了新的挑战。本文综述了鸡艾美耳球虫抗药株遗传和蛋白质表达变异方面的研究进展。点击这里进入下载页面:进入下载页面......阅读全文
蛋白的的原核表达及其对同源性感染的免疫保护性研究
实验概要用鸡艾美尔球虫的SO7基因与重组质粒pMG36t 结合,再把pMG36t-SO7导入到 E. coli χ13 体内,选择阳性的E. coli χ13( pMG36t-SO7 )即: E. coli χ2,然后用它去免疫,分析免疫效果。实验原理通过原核表达系统大肠杆菌来表达柔嫩艾美耳球虫的一
重组柔嫩艾美耳球虫SO7-蛋白的的原核...
实验概要用鸡艾美尔球虫的SO7基因与重组质粒pMG36t 结合,再把pMG36t-SO7导入到 E. coli χ13 体内,选择阳性的E. coli χ13( pMG36t-SO7 )即: E. coli χ2,然后用它去免疫,分析免疫效果。实验原理通过原核表达系统大肠杆菌来表达柔嫩艾美耳球虫的一
差异表达
· What's Differential Display (GenHunter)Introduction to differential display technique· Differential Display (Chun-Ming Liu)The f
抗药性突变株的分离实验
实验方法原理 生物的抗药性突变是 DNA 分子的某一特定位置的结构改变所致,与药物的存在无关,某种药物的存在只是作为分离某种抗药性菌株的一种手段,而不是作为引发突变的诱导物,因而在含有一定抑制生长药物浓度的平板上涂布大量的细胞群体,极个别抗性突变的细胞会在平板上长成菌落。将这些菌落挑取纯化,进一
基因差异表达技术
真核生物中,从个体的生长、发育、衰老、死亡,到组织的得化、调亡以及细胞对各种生物、理化因子的应答,本质上都涉及基因的选择性表达。高等生物大约有30000个不同的基因,但在生物体内任意8细胞中只有10%的基因的以表达,而这些基因的表达按特定的时间和空间顺序有序地进行着,这种表达的方式即为基因的差异表达
遗传变异如何影响蛋白表达变化
蛋白质是生命活动的主要承担者,其表达调控对于正常发育和疾病的发生发展至关重要。根据中心法则,我们知道信息的传递过程:DNA→RNA→蛋白。然而研究表明mRNA水平和蛋白水平并不完全一致,表明其中存在某种未知机制,介导mRNA水平的遗传变异对蛋白水平的影响。来自哈佛医学院和Jackson实验室的研究人
多药抗药基因的表达实验
实验方法原理 大多MDR细胞膜上出现MDR-1基因及其基因产物P-糖蛋白过度表达。实验材料 RNA试剂、试剂盒 PBS氯仿异丙醇萘酸异硫氰酸肽十二烷基肌酸钠构橼酸钠乙酸钠二疏基乙醇乙醇Taq酶仪器、耗材 离心机紫外分光光度计琼脂糖凝胶电泳PCR仪实验步骤 一、细胞总RNA提取1. 收集约5×107
多药抗药基因的表达实验
PCR扩增法 实验方法原理 大多MDR细胞膜上出现MDR-1基因及其基因产物P-糖蛋白过度表达。 多药抗药基因的表达实验是通过反转录和PCR的方法来检测这些特
多药抗药基因的表达实验
多药抗药基因的表达实验是通过反转录和PCR的方法来检测特定基因的过度表达。一、细胞总RNA提取1. 收集约5×107个细胞,冷PBS洗涤。2. 加入400 ul RNA提取液(含6 mol/l 的异硫氰酸肽,0.5%十二烷基肌酸钠,0.025 mol/l 构橼酸钠pH7.0,0.25 mol/
基因差异表达的概念
差异表达不仅有助于阐明生命的奥秘,而且还能为基因诊断与治疗提供重要的理论依据。近几年来,差异表达基因克隆技术不断完善与发展,已成为研究肿瘤和疾病等相关基因的重要手段。
Nature:遗传变异如何影响蛋白表达变化
蛋白质是生命活动的主要承担者,其表达调控对于正常发育和疾病的发生发展至关重要。根据中心法则,我们知道信息的传递过程:DNA→RNA→蛋白。然而研究表明mRNA水平和蛋白水平并不完全一致,表明其中存在某种未知机制,介导mRNA水平的遗传变异对蛋白水平的影响。来自哈佛医学院和Jackson实验室的研
Nature:遗传变异如何影响蛋白表达变化
蛋白质是生命活动的主要承担者,其表达调控对于正常发育和疾病的发生发展至关重要。根据中心法则,我们知道信息的传递过程:DNA→RNA→蛋白。然而研究表明mRNA水平和蛋白水平并不完全一致,表明其中存在某种未知机制,介导mRNA水平的遗传变异对蛋白水平的影响。来自哈佛医学院和Jackson实验室的研
稳定表达细胞株的建立
1、将转染后的细胞按照一定的比例接种到6孔板中(一般选用1:10和1:100两个梯度),分别采用1200mg/ml,1000mg/ml和800mg/ml的G418进行筛选;以转染携带EGFP质粒载体的细胞作为阳性对照,以未转染质粒载体的细胞作为阴性对照;2、每3~4天换液一次;3、筛选20~30天,
GST融合蛋白纯化——筛选表达株
Purification of GST fusion proteins in E.coli GSTSugden lab,McArdle Laboratory for Cancer Research ,University of Wisconsin-Madison Medical SchoolScre
基因表达差异分析方法进展
高等真核生物的基因组一般具有80 000~100 000个基因,而每一个细胞大约只表达其中的15%[1]。基因在不同细胞间及不同生长阶段的选择性表达决定了生命活动的多样性,如发育与分化、衰老与死亡、内环境稳定、细胞周期调控等。比较细胞间基因表达的差异为我们揭示生命活动的规律提供了依据。
差异基因表达的定义
中文名称差异基因表达英文名称differential gene express定 义在细胞分化过程中某些奢侈基因表达的结果生成一种类型的分化细胞,另一组奢侈基因表达的结果导致出现另一类型的分化细胞的现象。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞分化与发育(二级学科)
什么是基因的差异表达?
差异表达不仅有助于阐明生命的奥秘,而且还能为基因诊断与治疗提供重要的理论依据。近几年来,差异表达基因克隆技术不断完善与发展,已成为研究肿瘤和疾病等相关基因的重要手段。
抗药性突变株的分离实验——梯度平板法
实验方法原理生物的抗药性突变是 DNA 分子的某一特定位置的结构改变所致,与药物的存在无关,某种药物的存在只是作为分离某种抗药性菌株的一种手段,而不是作为引发突变的诱导物,因而在含有一定抑制生长药物浓度的平板上涂布大量的细胞群体,极个别抗性突变的细胞会在平板上长成菌落。将这些菌落挑取纯化,进一步进行
多药抗药基因的表达实验——PCR扩增法
多药抗药基因的表达实验主要用于肿瘤治疗研究。实验方法原理大多MDR细胞膜上出现MDR-1基因及其基因产物P-糖蛋白过度表达。 多药抗药基因的表达实验是通过反转录和PCR的方法来检测这些特定基因的过度表达。实验材料RNA试剂、试剂盒PBS氯仿异丙醇萘酸异硫氰酸肽十二烷基肌酸钠构橼酸钠乙酸钠二疏基乙醇乙
充满差异的单细胞蛋白表达
哈佛大学谢晓亮小组的最新研究结构显示,蛋白的数量(绿色)与mRNA的数量(红色)在各个细胞中有很大差异。 科学家们近日首次实现了对物种在整个表达谱范围内的蛋白表达噪声测量。该项成果是单分子技术与系统生物学交互融合的典范,预示了单细胞基因表达分析时代的来临。 在基因表达研究领域,传
寻找差异表达基因方法——简化SSH法
无论是从一个胚胎细胞分化为不同的组织器官,或者是从正常的组织突变为肿瘤组织,都可能涉及在同一基因组背景下不同基因的差异性表达。寻找差异表达的基因就有可能揭示细胞分化的机制或者肿瘤的成因,因而也就成为一项热门的技术。 寻找差异表达的基因有不少方法,抑制消减杂交(SSH)是比较有效的一种方法
Ettan-DIGE荧光差异蛋白表达分析系统
原理和应用: Ettan DIGE荧光差异蛋白表达分析系统在传统双向电泳技术的基础上,结合了多重荧光分析的方法,在同一块胶上共同分离多个分别由不同荧光标记的样品,并第一次引入了内标的概念,极大地提高了结果的准确性,可靠性和重复性。在DIGE技术中,每个蛋白点都有它自己的内标,并且软件全自动根据
农业农村部:鸡新城疫等兽药的公告,涉HPLCMS等检测法
分析测试百科网讯 7月4日,农业农村部批准中国农业科学院哈尔滨兽医研究所等41家单位申报的鸡新城疫、传染性支气管炎二联活疫苗(La Sota株+LDT3-A株)等11种兽药产品为新兽药,核发《新兽药注册证书》,发布产品试行规程、质量标准、说明书和标签,批准南昌勃林格殷格翰动物保健有限公司等3家单位申
前纤维蛋白与新型QuilA-佐剂组成的...
实验概要本实验把传统的四种佐剂组成了一种复合物,形成了一种新型佐剂,然后再用这种新型佐剂与前纤维蛋白结合形成疫苗,从体重增加量和粪便卵囊排出量,肠道病变积分,以及重组前纤维蛋白抗体反应情况,淋巴细胞增殖,细胞因子mRNA的量化水平等方面来评价该疫苗的保护效力。实验原理通过原核表达系统对堆型艾美耳球虫
数字PCR在基因表达差异研究的应用
数字PCR由于检测时完全不依赖传统的Ct值即可实现真正意义上的绝对定量,因而可以提供比实时荧光定量PCR更精确的基因差异表达研究,尤其对于那些靶基因表达差异微小的情况,如:mRNA、microRNA、lncRNAs等的表达分析;等位基因的不平衡表达;单细胞基因表达分析;外泌体核酸分子定量分析等。
PNAS:小鼠模型需慎用,基因表达差异大
PNAS:小鼠模型需慎用,基因表达差异大 小鼠被广泛用于模拟人类代谢、疾病和药物应答,是医学研究中的一个基本工具。然而斯坦福大学的研究团队指出,人类和小鼠的基因表达存在着惊人的差异,不论是蛋白编码基因还是非编码基因。这项研究发表在十一月十七日的美国国家科学院院刊PNAS杂志上。 Mic
转膜时间过长会不会使有差异的蛋白表达变得没有差异
不会,只要你的每个样本的处理时间相同,WB结果就可以反应出表达量。
筛选稳定表达细胞株转染后多久药物筛选
稳定细胞株筛选是一个长期的过程,稳定细胞株筛选优化,有许多条件需要摸索,而且是从源头开始①在构建载体时,目的基因直接整合到细胞染色体组上,最好不要通过先瞬转在筛选稳定细胞株的这种方法,因为转染效率没有保证②高表达载体的构建,哺乳动物表达量一直是它自身的缺点,最好根据高表达载体定向的驯化细胞,提高蛋白
简化抑制消减杂交(SSH)法寻找差异表达基因
无论是从一个胚胎细胞分化为不同的组织器官,或者是从正常的组织突变为肿瘤组织,都可能涉及在同一基因组背景下不同基因的差异性表达。寻找差异表达的基因就有可能揭示细胞分化的机制或者肿瘤的成因,因而也就成为一项热门的技术。 寻找差异表达的基因有不少方法,抑制消减杂交(SSH)是比较有效的一种方法。
差异表达-cDNA-的重新扩增、克隆与测序实验
试剂、试剂盒 琼脂糖凝胶蒸馏水 DNA 点样染料甘油蒸馏水 溴酚蓝 二甲苯腈 FF溴化乙锭溶液任意引物(H-AP)cDNAdNTP 混合液未标记的锚定引物载体特异性引物PCR 缓冲液Tris-HClKClMgCl2明胶 TaqDNA 聚合酶仪器、耗材 电泳装置离心管热循环仪薄壁 PCR 管UV 透射