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酵母准备

Yeast DNA PreparationYeast Genomic Preparation (Gottschling Lab)Rapid method for yeast genomic DNA isolation Yeast DNA Preparation (rapid glass bead prep) (Hahn Lab) Yeast Genomic DNA Preparation (high quality DNA) (Hahn Lab) Yeast quick plasmid DNA Prep (Hahn Lab)Yeast "smash-&-grab" DNA Preparation (Fangman/Brewer lab) Yeast G......阅读全文

酵母DNA的快速分离

            实验方法原理 根据该方案制备的酵母 DNA 可以用作 PCR 反应的模板。在 E. coli 和 Saccharomyces cerevisiae 中均能复制的穿梭质粒也可以从酵母中

毕赤酵母表达(pichia pastoris expression )实验手册(4)

三.主要试验环节的操作3.1 酵母菌株的分离纯化接种GS115于5ml YPD液体培养基,30℃,200rpm振荡过夜,涂布 YPD平板,30℃培养48 小时,用 YNB基本培养基和含His的补充培养基作点种分离纯化,挑选在补充培养基生上生长而在基本培养基上不生长的单菌落划YPD平板,4℃保存。3.

酵母DNA的快速分离

实验方法原理 根据该方案制备的酵母 DNA 可以用作 PCR 反应的模板。在 E. coli 和 Saccharomyces cerevisiae 中均能复制的穿梭质粒也可以从酵母中提取,并且可以用于转化 E. coli。实验材料 酵母细胞试剂、试剂盒 乙醇酚氯仿醋酸钠STES 缓冲液TE仪器、耗材

酵母DNA的快速分离

根据该方案制备的酵母 DNA 可以用作 PCR 反应的模板。在 E. coli 和 Saccharomyces cerevisiae 中均能复制的穿梭质粒也可以从酵母中提取,并且可以用于转化 E. coli。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理根据该方案制备的酵母 DNA 可

酵母β-葡聚糖含量化学比色法定量检测试剂盒产品使用...

酵母β-葡聚糖含量化学比色法定量检测试剂盒产品使用说明主要用途YIJI 酵母β-葡聚糖含量化学比色法定量检测试剂是一种旨在通过染料刚果红与β-D-葡聚糖结合沉淀,产生吸光峰值的变化,来测定样品中β-葡聚糖浓度的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种培养酵母菌种β-葡聚

色谱法分离酿酒过程中被修饰的麦芽蛋白

酿造几乎是一个尽人皆知的简单过程,看过张艺谋《红高粱》的观众一定会对影片中所描绘的家庭式酿酒作坊中几十号人汗流浃背、忙碌穿梭的镜头记忆忧新。但家庭酿造与商业酿造有明显不同,前者中使用了麦精(malt extract)。工业生产中,酿酒师常常自己提取粮谷,以便能够对发芽(malting)过程进行控制。

大麦演主角 而且想单飞

  在给啤酒增加风味上,大麦一直扮演着仅次于啤酒花和酵母的角色。现在这种谷物却准备要单飞了。  近日,由美国俄勒冈州立大学科研人员主导的两项研究发表在美国酿造化学家协会杂志上。他们发现,来自不同大麦品种的啤酒麦芽,对啤酒风味、品质影响显著且各异。  俄勒冈州立大学大麦育种专家Pat Hayes介绍,

酵母蛋白的提取方法

1 准备SD/-Leu或是YPD 培养基20ml,酵母过夜培养,30℃,230rpm。2 测OD600 约1.0。3 100ml过夜培养物,1000g,离心,5min,4℃。4 弃上清,重悬于80ul抽提buffer:0.1M Tris-Cl(PH7.5),0.2M NaCl,0.01Mβ-ME,2

真菌/酵母样品细胞细胞周期碘化丙啶红色荧光流式细胞

  真菌/酵母细胞样品细胞周期碘化丙啶(PROPIDIUM IODIDE)红色荧光   流式细胞分析试剂盒产品说明书(中文版)   主要用途   YIJI真菌/酵母细胞样品细胞周期碘化丙啶(PROPIDIUM IODIDE)红色荧光流式细胞分析试剂是一种旨在通过细胞流式仪测定真菌/酵母细胞中D

分子生物学实验基础知识

分子生物学是在生物化学基础上发展起来的,以研究核酸和蛋白质结构、功能等生命本质的学科,在核酸、蛋白质分子水平研究发病、诊断、治疗和预后的机制。其中基因工程(基因技术,基因重组)是目前分子生物学研究热点,这些技术可以改造或扩增基因和基因产物,使微量的研究对象达到分析水平,是研究基因调控和表达的方法,也

细菌培养及CaCl2法制备感受态细胞-1

实验目的:明确培养基的配制原理;通过对LB培养基的配制,掌握配制培养基的一般方法和步骤;掌握细菌的接种、培养的无菌操作方法和步骤。实验原理:重组DNA分子(质粒、噬菌体、粘性质粒)必须导入宿主菌中,通过细菌培养来扩增所需的重组DNA。大肠杆菌与其它微生物一样,都具有稳定遗传性和变异性、遗传性,保证微

正交试验法在微生物培养条件优化选择中的应用

一.目的要求对于一个生物作用过程,其结果或产物的得到受到多种因素的影响。如发酵中,菌种的生物活性、酶的浓度、底物浓度、温度、pH 值、菌种生长环境中的氧气、二氧化碳浓度、各种营养成分的比例等。对于这种多因素的实验,如何合理地设计实验,提高效率,以达到所预期的目的是需要进行认真考虑和周密准备的。本

快速了解土壤冻干法

  冻干保藏法,是指冷冻干燥保藏法的简称。液体样品在冻结状态下因水分升华,最后达到干燥的保藏方法,是菌种保藏中最有效的方法之一,适用于各类微生物的保藏。其优点是保存时间长,一般可达10年以上;存活率高,变异小,安瓿管体积小,便于大量保藏。缺点是操作复杂,设备昂贵,推广应用尚有一定困难。  冻干保藏法

酵母双杂交实验

实验概要本实验构建了Bait载体和prey载体,酵母双杂交后,应用CPRG法定量测试了蛋白质相互作用。实验步骤1. Bait载体的构建将高保真PCR扩增的OsCCTlb(引物为OsCCT1bEcoRI5'和OsCCTlbXhoI3')和OsCNTlb(引物为OsCNTlb  

酵母三杂交系统检测和分析RNA-蛋白相互作用

一、引入 RNA 质粒和 cDNA 文库通常首先将 RNA 质粒转化到宿主菌株-L40coat 内,得到包含 RNA 质粒的细胞,再转化一个融合了转录激活区的 cDNA 文库(杂交 RNA 对宿主细胞几乎没有毒性,与用于双杂交筛选的一些杂交蛋白

植物原位接种介导的小麦高效农杆菌转化方法实验

试剂、试剂盒:缓释肥                                        

真菌/酵母样品细胞细胞周期碘化丙啶红色荧光流式细...

真菌/酵母样品细胞细胞周期碘化丙啶红色荧光流式细胞分析试剂盒使用说明真菌/酵母细胞样品细胞周期碘化丙啶(PROPIDIUM IODIDE)红色荧光流式细胞分析试剂盒产品说明书(中文版)主要用途YIJI真菌/酵母细胞样品细胞周期碘化丙啶(PROPIDIUM IODIDE)红色荧光流式细胞分析试剂是

毕赤酵母LiCl 转化方法

实验概要本文介绍了毕赤酵母LiCl 转化方法。该程序是电转化的替代方法。转化效率为102-103cfu/ug线性化DNA。主要试剂溶液准备:不能用醋酸锂,一定要用氯化锂1. 用无菌去离子蒸馏水配制1M LiCl,过滤除菌,用无菌水稀释2. 用无菌去离子蒸馏水配制50%PEG(3350),过滤除菌,存

目的基因的亚克隆-1

所谓亚克隆就是对已经获得的目的DNA片段进行重新克隆,其目的在于对目的DNA进行进一步分析,或者进行重组改造等。亚克隆的基本过程包括:(1)目的DNA片段和载体的制备;(2)目的DNA片段和载体的连接;(3)连接产物的转化;(4)重组子筛选。 一、试剂准备 1.LB液体培养基:胰化蛋白胨(细

培养嗜酸乳杆菌的器材和详细的方法步骤

仪器及器皿THZ-C恒温震荡器,LRH-250生化培养箱,LDZX-50FB立式电热压力蒸汽灭菌器,SW-CJ-1F洁净工作台,百分之一电子天平,生物显微镜, 18×150试管,90mm培养皿,500ml三角瓶,10ml刻度吸管,1ml移液枪,吸耳球,玻璃珠(直径4-6mm),pH试纸(5.5-9.

酵母前体mRNA剪接提取物实验

            实验方法原理 剪接反应的典型做法是使用核提取物,即 S100 提取物补充 SR 蛋白或粗提取物的部分纯化组分,最常使用的是 HeLa 细胞的提取物。前体 mRNA 底物通常采用噬菌体

大肠杆菌感受态细胞的制备

实验原理感受态就是细菌吸收转化因子的生理状态,只有发展为感受态的细胞才能稳定摄取外来的DNA分子。受体细胞经过一些特殊方法(如:电击法,CaCl2等化学试剂法)的处理后,细胞膜的通透性发生变化,成为能容许带有外源DNA的载体分子进入的感受态细胞。 目前常用的感受态细胞制备方法有CaCl2

细胞培养箱内的支原体怎么检测

可用直接培养法检测细胞培养箱内的支原体污染。培养基准备: 基本配方为Difco PPLO broth(60%),马血清(20%),15%酵母膏溶液(10%),10x储存液(10%)。由于培养时间长,可加50u/ml青霉素至10x储存液 或加入乙酸铊(1:2000)至培养基中以防止其他细菌的污染。 1

创新参选:从酵母中提取gDNA的方法改进

  2012实验室创新技术大奖”评选活动开展以来,生物通已经陆陆续续收到不少项目,这些项目中有的能减少实验步骤,有的能降低实验成本,还有一些改进了实验设备,让我们的实验过程更加轻松。   生物通将会陆续公布一些项目,以便大家分享这些创新技术。同时为了感谢这些分享实验技巧的参选者,生物通也准备了一些

酵母三杂交系统检测和分析RNA-蛋白相互作用实验

实验方法原理 酵母三杂交系统(yeast three-hybrid system)可用于分析蛋白质与 RNA 间的相互作用。在酵母三杂交系统中,RNA 蛋白质相互作用导致报道基因的转录,可以通过细胞生长、克隆颜色或特异的酶活性检测蛋白质与 RNA 的相互作用。试剂、试剂盒 YPD 和 SD 培养基鲑

λ噬菌体DNA提取试剂制备、操作步骤和注意事项

λ噬菌体是最早使用的克隆载体,λ噬菌体的基因组是一长度约为50kb的双链DNA分子,它在宿主细胞有两种生活途径:其一是裂解生长,环状DNA 分子在细胞内多次复制,合成大量噬菌体基因产物,装配成噬菌体颗粒,裂解宿主菌再进行下一次感染;其二是溶源性生长,即感染细胞内λ噬菌体DNA整合到宿主菌染色体D

目的基因的亚克隆(subcloning)-1

所谓亚克隆就是对已经获得的目的片段进行重新,其目的在于对目的进行进一步分析,或者进行重组改造等。亚的基本过程包括:(1)目的片段和载体的制备; (2)目的片段和载体的连接;(3)连接产物的转化;(4)重组子筛选。一、试剂准备1.LB液体培养基:胰化蛋白胨(细菌培养用)10g,酵母提取物(细菌培养用)

碱裂解法提取质粒DNA

实验目的      1、掌握最常用的提取质粒DNA的方法和检测方法;       2、了解制备原理及各种试剂的作用。      实验原理 碱裂解法是基于DNA的变性与复性差异而达到分离目的的。碱性使质粒DNA

植物原位接种介导的小麦高效农杆菌转化方法实验(一)

试剂、试剂盒 缓释肥乙酰丁香酮仪器、耗材 盆钵植物支撑器LB 培养基通用型试管YEP 固体培养基TSIM 培养基实验步骤 一、材料1. 母体植株的生长( 1 ) 将母体植株种植于 12 , 7F ( 直径为 13 cm) 的盆钵中,每盆 4 株。( 2 ) 用 Levingtons  M2

毕赤酵母电转化

实验概要本实验介绍了毕赤酵母电转化方法。该方法无需产生去壁细胞,是产生毕赤酵母重组子的简便方法。与去壁细胞效率相似。实验步骤1. 细胞准备:   1) 在含5mlYPD 的50ml 离心管中,培养毕赤酵母,30 度过夜。   2) 取0.1-0.5ml 过夜培