电泳迁移实验EMSA
1、核蛋白的提取①用 细 胞 刮子刮取RAW264.7细胞与VSMC，移入2.5mlEP 管中。②将细胞用冰冷PBS洗两遍，于4℃, 5000g离心3min，沉淀细胞。③加5倍细胞体积的冰浴缓冲液A洗细胞一次，于4℃,5000g离心3 min沉淀细胞.④加3倍细胞体积的冰浴缓冲液A悬浮细胞，冰上放置30 min、剧烈振荡10次，4℃,5000g离心15min，去上清，沉淀为细胞核。⑤加与细胞等体积的冰浴缓冲液B，充分混匀，冰上放置30m in后，于40℃ ,15 000g离心15min,上清为核蛋白。⑥取2ul核蛋白Bradford法测定核蛋白浓度，分装后于-70℃保存。2.探针的标记与纯化A、 探 针 的标记:将以下试剂加入冰浴中的0.5m l的EP管中，总体积20时。①未标记的探针:2ul (50ng);② 10 x激酶缓冲液:2g1;③ [y-......阅读全文
通过Sapphire平台研究基于荧光的一种蛋白质RNA相互作用...
通过Sapphire平台研究基于荧光的一种蛋白质-RNA相互作用的小分子调节剂Azure Biosystems国立首尔大学化学系CRI化学蛋白组学Wan Gi Byun团队在《Chembiochem》发表了他们最新的研究成果，基于荧光的紧密结合分析发现了一种蛋白质-RNA相互作用的小分子调节剂。那为
NEJM：常见变异性免疫缺陷病的IKAROS突变
常见变异性免疫缺陷病(CVID)是指无明显诱因的低丙球蛋白血症。在大多数病例中的遗传原因尚不明确，只有少于10%的患者有家庭疾病史。大多数病人有正常数量的B细胞，但是缺乏浆细胞。 我们使用全外显子基因测序和基于阵列的比较基因组杂交技术评估CVID病人和低B细胞数病人的分型。使用凝胶电泳迁移实验
大肠杆菌中重组蛋白抽提的具体步骤
一步法细菌活性蛋白提取试剂盒产品编号：BSP023产品简介:一步法细菌活性蛋白提取试剂采用一种温和的可以通过透析去除的,破裂细菌细胞，溶解蛋白，而不会产生变性的非离子型去污试剂从大肠杆菌中提取可溶性蛋白，不需要超声等机械细胞破碎方法，该试剂可以从细菌裂解液中提取可溶性蛋白和回收包涵体蛋白，而且提取效
电泳迁移率变动分析的定义
电泳迁移率变动分析，又称凝胶阻滞实验，英文名electrophoretic mobility shift assay，简称EMSA。是体外利用电泳迁移率的变化来分析DNA与蛋白质相互作用的一种特殊的凝胶电泳技术。
ArrayStar转录因子活性ELISA检测法
ArrayStarTM转录因子活性ELISA试剂盒可以快速、灵敏地检测细胞核提取物中转录因子的DNA结合活性。试剂盒采用96微孔板，标记探针是生物素标记的双链寡核甘酸片段，含有转录因子的特异性DNA结合序列。当标记探针与细胞核抽提物一起孵育时，核抽提物中活性形式的转录因子与探针特异性结合，形成转录因
分子间相互作用分析：荧光标记VS无标记
同无标记技术相比，利用荧光技术检测分子间相互作用的实验成本较低，例如荧光共振能量转移和凝胶迁移实验，无需昂贵的仪器便可完成结合分析。然而，基于荧光标记的检测技术也存在自己的局限性，像凝胶迁移实验就只能用来检测蛋白和核酸间的相互作用。那么在具体的实验中，研究人员该如何选择合适的检测技术呢？不要着急，下
凝胶迁移或电泳迁移率实验
凝胶迁移或电泳迁移率实验（EMSA）可以：（1）研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用；（2）可用于DNA定性和定量分析；（3）用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。凝胶迁移或电泳迁移率实验凝胶迁移或电泳迁移率实验（EMSA-electrophoretic mobili
如何通过chip确定与基因结合的蛋白质
染色质免疫沉淀,所以对ChIP实验过程的每一步都应设计相应的对照.当检测如转录调控因子一类的DNA结合蛋白,在生理状态下把细胞内的DNA与蛋白质交联在一起.如果你是只知道你的蛋白.染色质免疫沉淀技术一般包括细胞固定,可是双链或者是单链,将与目的蛋白相结合的DNA片段沉淀下来,在非变性的聚丙烯凝胶电泳
电泳迁移率变动分析的简介
用放射性同位素标记待检测的片段（即探针DNA），然后与细胞提取物共温育，形成DNA-蛋白复合物，将该复合物加到非变性聚丙烯酰胺凝胶中进行电泳。 电泳迁移率变动分析，又称凝胶阻滞实验，英文名electrophoretic mobility shift assay，简称EMSA。是体外利用电泳迁移
高通量的转录因子活性检测
转录因子(transcription factor，TF)在真核生物的基因表达过程中发挥着重要作用，或调节基因表达的强度，或控制目的基因的时空特异性表达，或应答外界刺激和环境胁迫。近年来，随着干细胞研究的不断升温，人们对转录因子的兴趣也日益浓厚。同一个基因组，为何最终分化成不
通过串联删除吸水链霉菌5008的γ丁内脂受体基因...（二）
通过串联删除吸水链霉菌5008的γ丁内脂受体基因提高井冈霉素产量2. afsA及arpA同系物参与井冈霉素生物合成分别删除afsA以及arpA同系物。shbA1失活导致井冈霉素产量下降超过90%；ShbA2和shbA3失活分别导致产量下降77%和61%（Fig 3A）。ΔshbR1和Δshb
Sapphire双模式多光谱成像系统扫描仪八个功能的应用
最近电视剧《三十而已》热播，里面顾佳的角色很受大家喜欢，她上得厅堂，下得厨房，能屈能伸，不卑不亢，有学识，有魄力，面对威胁很从容，打完架依然可以妆容精致、不慌不忙地戴上手表穿上高跟鞋，有条不紊，这女人太酷，小编也忍不住安利一下。但是这么完美的一个人，背后付出的努力可想而知，三十而已，她对待人生、对待
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规范恶性血液病骨髓和外周血涂片血细胞形态学检查
1887年，Ehrlich（德国）建立血细胞染色法，开包了血细胞分析的新纪元。20世纪20年代，经May，G1emsa及Wright等对Ehrlich的血细胞染色法进行改良后，成功建立May-Grunwald和Wright血细胞染色法后，血细胞染色法才在临床得到广泛应用。20世纪30年代前后，逐渐形
CITF1和SPL7协同调控植物铜稳态
该研究中发现CITF1的过表达促进了铜摄取基因COPT2、FRO4和FRO5的表达，增强了植物对缺铜环境的耐受性。EMSA和瞬时表达实验表明，SPL7直接结合并激活CITF1的启动子。CITF1过表达能部分挽救spl7-1对缺铜的敏感性。转录组数据分析表明，SPL7和CITF1共同调控铜稳态信号
规范恶性血液病骨髓和外周血涂片血细胞形态学检查
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western－blot激光近红外荧光检测的特点
Western blot方法是生物实验室常用的蛋白检测方法之一，自从1979提出至今已有数十年的历史。常用的检测方法有化学发光法和荧光方法。NIR近红外荧光检测方法，印迹膜自发荧光较低，信噪比高。NIR荧光检测能获得高信噪比和高质量图片主要依赖于激发强度大，精密的激光光源和专业的光学元件。我
转录因子活性ELISA
转录因子活性ELISA是建立在ELISA基础上的高灵敏度的检测方法，比EMSA的灵敏度高l0倍，在5h内就能完成。不涉及放射性和凝胶电泳，安全简便，而且这种微孔板的形式能同时检测1—96个样品。ArrayStarTM转录因子活性ELISA试剂盒可以快速、灵敏地检测细胞核提取物中转录因子的DNA结合活
最新进展！芒果内类胡罗卜素的和合成与积累机制
近日，中国热科院品资所在芒果果实中类胡萝卜素合成与积累机制方面取得新进展，为芒果色泽性状育种、提高果实品质的定向育种提供理论基础。 类胡萝卜素与果实颜色密切相关。为探明芒果果实颜色与类胡萝卜素的关系，本研究以绿色‘秋芒(Neelum)’和红色‘爱文(Irwin)’芒果为对象，转录组分析发现转录
什么是凝胶迁移或电泳迁移率实验？
凝胶迁移或电泳迁移率实验（EMSA）是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术，可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白，目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。通常将纯化的蛋白和细胞粗提液和32P同位素标记的DNA或RNA探针一同保温，在非变性
DNA－Immunoprecipitation－for－the－Determination－of－DNABinding－Specificity
Andrea J. Gossett and Jason D. Lieb1Department of Biology, University of North Carolina at Chapel Hill, Chapel Hill, NC 27599, USA1Corresponding autho
迷你垂直电泳仪－独有特点
迷你垂直电泳仪独有特点：1.可作两种长度凝胶尺寸：83×97mm加长型、83×73mm迷你型。加长型凝胶适宜做SSCP、EMSA分离核酸小分子量片段，有极高的检测灵敏度；2.原位灌胶的优点：配有获斜凸轮制胶器，可以实现在电泳芯上完成灌胶；凝胶制成后，无需移动玻璃板，避免了移动时可能造成的失误；3.电
那些只属于迷你垂直转印电泳槽的设备特点你都知道多少
迷你垂直转印电泳槽*特点： 1.可作两种长度凝胶尺寸：83×97mm加长型、83×73mm迷你型。加长型凝胶适宜做SSCP、EMSA分离核酸小分子量片段，有极高的检测灵敏度； 2.原位灌胶的优点：配有获斜凸轮制胶器，可以实现在电泳芯上完成灌胶；凝胶制成后，无需移动玻璃板，避免了移动时
南海海洋所构建马氏珠母贝遗传图谱并发现转录调控因子
马氏珠母贝是一种具有较大经济价值的海水养殖贝类和生产珍珠的主要母贝，也是国际上研究生物矿化机制的良好实验材料。对马氏珠母贝性状分子遗传基础和重要基因功能进行解析，将有助于推动其遗传改良技术的发展和品种创制。 近日获悉，中国科学院南海海洋研究所何毛贤研究团队利用RAD高通量SNP分型技术，构建了
专家成功解析MYB基因调控蓝莓花青素合成的分子机理
中国农业科学院果树研究所浆果类果树栽培与生理创新团队在植物科学JCR一区期刊《Frontiers in Plant Science》（即时IF：5.75）在线发表了题为“Single-Molecule Real-Time and Illumina Sequencing to Analyze Tr
东北地理所阐明大豆GmFT2a和GmFT5a调控开花的分子机理
FT（FLOWERING LOCUS T）是植物开花调控途径中非常关键的整合因子。中国科学院东北地理与农业生态研究所刘宝辉研究组和孔凡江研究组首先通过大豆遗传转化的方法，在大豆品种Williams 82中证明GmFT2a和GmFT5a能够促进大豆开花，并发现GmFT2a和GmFT5a促进大豆成花
关于双色扫描红外激光成像分析系统的简介
双色扫描红外激光成像分析系统是一种用于林学领域的分析仪器，于2014年10月18日启用。 一、双色扫描红外激光成像分析系统的技术指标： 1、高准确性的定量：宽广的线性范围，定量能力比化学发光法高2到3个数量级； 2、高灵敏度：效果等于或者好与ECL，最低检测限低于pg级； 3、双色检测：
茶树香气从何而来？探究香叶醇合成调控的秘密
近日，西北农林科技大学园艺学院茶叶创新团队揭示了茶树CsbHLH133可变剪切调控香叶醇的生物合成的分子机制，该研究成果在线发表于The Plant Journal上。香气是决定茶叶品质优劣的重要指标之一，也是吸引消费者和提高市场竞争力的重要因子。因此，发掘香气合成的关键基因，探析其功能及调控机制，
蛋白凝胶大分子成像仪
蛋白凝胶大分子成像仪是一种用于畜牧、兽医科学领域的分析仪器，于2017年5月8日启用。 技术指标 1系统模式 *双通道同时扫描，同时输出。 2硬件构成 *2.1光 源: 2根独立的波长特异性的激光器，激发波长分别为685nm和785nm，使用寿命为40000小时，激发强度可调。 *2.2检测
Primary－cardiac－fibroblast－and－cardiomyocyte－isolation
1. Ventricles were removed under sterile conditions. 2. Ventricles were placed in cold sterile primary cell culture medium, minced into approximat