肽中磷酸化氨基酸位置测定实验
基本方案 手工EDMAN降解法 实验方法原理 磷酸丝氨酸或磷酸苏氨酸降解后释放出丝氨酸或苏氨酸和自由磷酸盐，而磷酸酪氨酸降解后释放出磷酸酪氨酸的衍生物——苯胺基噻唑啉酮。 实验材料 洗脱的磷酸肽（见辅助方案 1） 试剂、试剂盒 5%(V／V)异硫氰酸苯酯(PLTC)溶于吡啶中 10:1(V／V)庚烷／乙酸乙酯-10 份庚烷与 1 份乙酸乙酯混合 2:1(V／V)庚烷／乙酸乙酯-2 份庚烷与 1 份乙酸乙酯混合 ......阅读全文
【分享】质谱分析蛋白的原理与方法
质谱技术具有较好的灵敏度、准确度，能准确测定蛋白质。目前质谱主要测定蛋自质一级结构包括分子量、肽链氨基酸排序及多肽或二硫键数目和位置，在对蛋白质结构分析的研究中占据了重要的地位。[1,2]质谱有进样器、离子源、质量分析器、离子检测器、控制电脑及数据分析系统等组成。传统的质谱仅用于小分子挥发物质
氨基酸序列测定实验——辅助方案
实验材料蛋白质样品试剂、试剂盒1 mol／L NaHCO3 （可选）100％ 冰冷乙醇(不含变性剂 USP 级)样品缓冲液 0.1％ （V／V）焦宁 Y 染料仪器、耗材超滤浓缩器／Speedvac蒸发器拉细的巴斯德吸管／凝胶加样吸头1.5 ml 微量离心管离心机实验步骤1. 必要时，用1 mol/L
什么氨基酸残基能被磷酸化
苏氨酸，丝氨酸、酪氨酸等氨基酸残基能被磷酸化，因为他们有羟基基团，可以和磷酸基团脱水生成磷酸酯。磷酸化（英语：Phosphorylation）或称磷酸化作用，指在蛋白质或其他类型分子上，加入一个磷酸（PO32-）基团，也可定义成“将一个磷酸基团导入一个有机分子”。此作用在生物化学中占有重要地位。蛋白
运用肽库筛选磷酸化激酶motif方法
Screening Kinase Phosphorylation Motifs Using Peptide LibrariesIsaac A. Manke and Michael B. YaffeCenter for Cancer Research, Massachusetts Institute
PK120－的纯化及肽段氨基酸序列分析实验
实验材料PK-120试剂、试剂盒Q-Sepharose 树脂S-Sepharose 树脂Hudroxyapatite 羟基磷灰石Sephacryl S－200 凝胶赖氨酸内切酶乙腈三氯醋酸仪器、耗材Applied Biosystems model 477A 气相蛋白质测定仪Applied Biosy
PK120－的纯化及肽段氨基酸序列分析实验
实验方法原理 实验材料 PK-120试剂、试剂盒 Q-Sepharose 树脂S-Sepharose 树脂Hudroxyapatite 羟基磷灰石Sephacryl S－200 凝胶赖氨酸内切酶乙腈三氯醋酸仪器、耗材 Applied Biosystems model 477A 气相蛋白质测定仪A
PK120－的纯化及肽段氨基酸序列分析实验
基本方案 实验方法原理 实验材料 PK-120
蛋白质磷酸化的测定实验—代谢标记
实验材料细胞仪器、耗材培养瓶实验步骤1. 用 60 mm 或 100 mm 培养瓶，在完全培养基中培养细胞至所希望的密度。2. 用预热的低磷酸培养基（无放射性磷酸盐）冲洗两次，然后加入含 0.5~1 mCi32P/ml 的低磷酸培养基（50~100 μmol/L 无机磷酸）。3. 培养结束后，回收
氨基酸序列测定实验——基本方案
测定通过 SDS-PAGE 转移到 PVDF 膜上样品的氨基酸序列实验材料分离胶和积层胶溶液还原型谷胱甘肽干粉试剂、试剂盒4 × 凝胶缓冲液10 × 下槽缓冲液10 × 上槽缓冲液甲醇转移缓冲液0.1%（V／V）考马斯亮蓝的 50％甲醇溶液10％（V／V）乙酸的 50％甲醇溶液仪器、耗材微量注射器或
复方氨基酸（15）双肽（2）注射液的含量测定方法
氨基酸、甘氨酰酪氨酸和甘氨酰谷氨酰胺取本品,用适宜的氨基酸分析仪或高效液相色谱仪进行测定;另取各相应的氨基酸、甘氨酰酪氨酸与甘氨酰谷氨酰胺对照品各适量,制成相应浓度的对照品溶液,同法测定,按外标法以峰面积计算各氨基酸、甘氨酰酪氨酸和甘氨酰谷氨酰胺的含量。
磷酸化位点分析实验——高分辨凝胶电泳分离磷酸肽
实验材料蛋白样品仪器、耗材质谱仪实验步骤在聚丙烯酰胺凝胶上用 2-DE 纯化磷酸肽是最近发表的制备技术，其结果与 2D-PP 结果相似。非变性凝胶等电聚焦结合碱性 40%PAGE 胶用于磷酸肽分离及比较分析。 32p 标记样品用放射自显影或磷储屏检测。用 Edman 测序方法鉴定蛋白质并确定磷酸化位
32个氨基酸的短肽检测
问：我最近用红系裂解物翻译系统表达一种32个氨基酸的短肽，因为实验条件有限，不能用35S标记的蛋氨酸进行合成，所以不能用放射自显影进行检测，我想问问能否用蛋白电泳的方法检测，我查文献看到有一种tricine gradient gel，不知道可不可以检测这种短肽？有没有人知道这种胶的配方？参考这个
磷酸化位点分析实验用酶和化学方法去磷酸化
实验材料蛋白样品实验步骤这种方法得到特别关注、但它能提供磷酸肽中磷酸化氨基酸的定位，可以在非磷酸肽占主导地位的混合物中鉴别磷酸肽，此方法使用的是磷酸酶 。用简单的 MALDI-TOF仪器就可以得到磷酸化蛋白水解后产生肽段的质量，同样的样品用磷酸酶处理后，除去了丝氨酸，苏氨酸和酪氨酸上的磷酸，再分析其
磷酸化蛋白鉴定实验
实验材料测序级膜蛋白酶 试剂、试剂盒二硫苏糖醇 碘代乙酰
磷酸化蛋白鉴定实验
实验材料测序级膜蛋白酶试剂、试剂盒二硫苏糖醇碘代乙酰胺乙酸溶液甲酸乙酰氯仪器、耗材螯合琼脂糖凝胶层析介质实验步骤这里所述的方法概括为下列几个步骤：胰蛋白酶水解消化膜和可溶性组分中的蛋白质（见 24. 3.1 )；固相金属螯合亲和层析（IMAC) 富集磷酸肽（见 24. 3. 2 )；用串联质谱对磷酸
磷酸化蛋白鉴定实验
实验材料 测序级膜蛋白酶试剂、试剂盒 二硫苏糖醇碘代乙酰胺乙酸溶液甲酸乙酰氯仪器、耗材 螯合琼脂糖凝胶层析介质实验步骤 这里所述的方法概括为下列几个步骤：胰蛋白酶水解消化膜和可溶性组分中的蛋白质（见 24. 3.1 )；固相金属螯合亲和层析（IMAC) 富集磷酸肽（见 24. 3. 2 )；用串
关于矿物元素结合肽的相关介绍
多数矿物元素结合肽中心位置含有磷酸化的丝氨酸基团和谷氨酰残基，与矿物元素结合的位点存在于这些氨基酸带负电荷的侧链一侧，其最明显的特征是含有磷酸基团。与钙结合需要含丝氨酸的磷酸基团以及谷氨酸的自由羧基基团，这种结合可增强矿物质-肽复合物的可溶性。酪蛋白磷酸肽（简称CPP）是目前研究最多的矿物元素结
L氨基酸氧化酶的测定实验
实验方法原理L-氨基酸：氧氧化还原酶（脱氨基）。用过氧化物酶（POD）偶联的实验鉴定：实验材料酶溶液试剂、试剂盒三乙醇胺溶液过氧化氢酶仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」0.97 ml 三乙醇胺溶液0.01 ml LDH 过氧化物酶以 0.02 ml 酶溶液（或者以 H2O 作
L氨基酸氧化酶的测定实验
实验方法原理 L-氨基酸：氧氧化还原酶（脱氨基）。用过氧化物酶（POD）偶联的实验鉴定：实验材料 酶溶液试剂、试剂盒 三乙醇胺溶液过氧化氢酶仪器、耗材 分光光度计实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」0.97 ml 三乙醇胺溶液0.01 ml LDH 过氧化物酶以 0.02 ml 酶溶液（或者以
L氨基酸氧化酶的测定实验
基本方案 实验方法原理 L-氨基酸：氧氧化还原酶（脱氨基）。用过氧化物酶（POD）偶联的实验鉴定： 实验
关于C肽测定方法的C肽检查和测定介绍
１、C肽测定检查： 当病友在接受外来胰岛素治疗时，如果仍检查血中的胰岛素水平来评价机体产生胰岛素的能力，显然要受到注射胰岛素的影响，结果不准确。此时通过 C 肽检查能准确的反映机体自己产生胰岛素的量，而不受外来胰岛素的影响。测定方法与胰岛素相同，也是抽空腹及餐后血，正常情况下也是餐后比空腹高
酸水解—全自动氨基酸分析仪测定蜂蜜中17种氨基酸
蜂蜜是蜜蜂采集花蜜酿制的，而花是植物的生殖器官，植物的精华大部分聚集于此，蜜蜂采集植物的“精华”，含有多种分解酶的唾液与其融合酿造而成的，是大自然奉献给人类的天然保健食品，味道甜蜜且营养丰富。蜂蜜主要成分除葡萄糖和果糖外，还富含人体必需的多种氨基酸营养成分[1]。不同产地、不同花种蜂蜜主要成分基
肽质量检索实验
实验方法原理 实验材料 蛋白样品仪器、耗材 质谱仪实验步骤 鉴定数据库中已有序列的蛋白质的算法基于以下一些理念：(1) 肽段是由切点专一的试剂水解蛋白质产生的，通常用已知切点专一的蛋白酶。(2) 这些肽段的质量由 MALDI-MS 或 ESI-MS 精确测定。(3) 计符蛋白序列数据库中的每一序列被
肽质量检索实验
基本方案 其他方案 实验方法原理 实验材料 蛋白样品
测定茶叶中氨基酸组分含量的方法及原理
一,纸层析法二,气相色谱法三,氨基酸自动分析仪测定法另外还有一层其他层析分析法.现在用气相色谱法和氨基酸自动分析仪测定法比较多一点.基本原理就是利用电荷极性来做分析.
氨基酸总量测定
蛋白质经水解或酶解可由大分子变成小的pro成分，如水解后的产物经胨，肽等最后成为氨基酸，氨基酸是构成pro最基本的物质。水解后的pro和水解前的pro在物理特性，化学结构以及被吸收消化的程度上是很不相同的，其差别与水解的程度有密切关系，分析氨基酸的含量就可以知道水解的程度，也就可以评价食品的营养价值
氨基酸总量测定
蛋白质经水解或酶解可由大分子变成小的pro成分，如水解后的产物经胨，肽等最后成为氨基酸，氨基酸是构成pro最基本的物质。 水解后的pro和水解前的pro在物理特性，化学结构以及被吸收消化的程度上是很不相同的，其差别与水解的程度有密切关系，分析氨基酸的含量就可以知道水解的程度，也就可以评价食
氨基酸测定问题
问：请教我现在测定氨基酸（只是打算测定其中的天门冬氨酸和谷氨酸以及丙氨酸三种氨基酸）：现用岛津液相，LC-10AT的泵和SPD-10A的检测器，色谱柱ods C18柱(250 X 4．6mm)，检测波长254nm，柱温40cc，流速lmL·min～，流动相A：0．1mol·L- ，醋酸钠溶液
氨基酸通过以下哪个键相连成为肽
氨基酸通过羧基和氨基的反应形成多肽！羧基脱去羟基，氨基脱去氢原子，下去小分子水
钢筋位置测定仪性能特点
性能特点：■仪器插接件使用寿命长。采用瑞士进口的雷默（lemo）牌插接件，仪器插座、信号线插头的使用寿命长；■信号线质量好。信号线采用日本太阳诱电信号线，线柔软、结实，使用寿命长；■仪器测量快速、准确。我公司钢筋仪测试速度快，能够对钢筋进行准确的定位，并且保护层厚度测试的重复性好，这是我公司钢筋仪的