淀粉酶的诱导、提取和活性测定实验

实验方法原理大麦(或小麦)种子萌发时,种胚产生GA3扩散到胚乳的糊粉层细胞(被称为GA3反应的“靶细胞”),刺激其合成或激活α-淀粉酶,然后进入胚乳,使贮藏的淀粉被水解为还原酶,因此,无胚种子不能释放GA3,也不能形成与激活α-淀粉酶。外加的GA3也可代替胚的释放作用,从而诱导α-淀粉酶的合成。在一定范围内,由去胚的吸胀大麦产生的还原糖量,与外加GA3浓度的对数成正比,由此可说明GA3对α-淀粉酶的诱导形成。实验步骤一、 材料与用品1. 材料:大麦(或小麦)种子;2. 仪器:721分光光度计;超净工作台(或灭菌箱);温箱;摇床;恒温水浴;高压灭菌锅;棉塞;牛皮纸;刀片;镊子;烧杯;培养皿;试管;移液管;玻璃棒。3. 药品:10-3mol/L乙酸缓冲液(pH 4.8)[每ml含链霉素硫酸盐1mg(或氯霉素40μg)]. 10 mg/L GA310 mg,加少量95%乙醇溶解,用蒸馏水定容至1000ml. 淀粉溶液(称取可溶......阅读全文

叶绿体色素的提取、分离、性质和定量测定实验

实验方法原理 1. 溶解性:叶绿素和类胡萝卜素均不溶于水而溶于有机溶剂,常用乙醇或丙酮提取。2. 分离色素的方法有多种,如纸层析. 柱层析等。纸层析是其中较简单的一种。当溶剂不断地从层析滤纸上流过时由于混合色素中各种成分在两相中(即流动相和固定相)间有不同的分配系数,它们的移动速度不同,使样品中的各

赤霉素对α-淀粉酶的诱导形成

  原理   大麦(小麦)种子吸水开始萌动之后,胚乳中的淀粉在酶的作用下水解成糖,α-淀粉酶就是参与此水解过程的一种酶。该酶是由胚中释放出来,在赤霉作用下,在糊粉层细胞合成或激活。因此,没有胚的活动或者赤霉素的参与,α-淀粉酶就不能形成或激活。本试验即证明赤霉素对α-淀粉酶的作用

赤霉素对α淀粉酶的诱导形成

一、原理淀粉性种子在萌动过程中,胚释放出来的赤霉素能诱导糊粉层细胞中α-淀粉酶基因的表达,引起α-淀粉酶生物合成,并分泌到胚乳中催化淀粉水解为糖。通过碘试法比色测定淀粉在酶催化反应过程中的消耗量,可以定量分析α-淀粉酶的活力。二、材料、仪器设备及试剂 (一)材料:大麦、小麦种子(二)仪器设备:1.

赤霉素对α淀粉酶的诱导形成

实验概要赤霉素(gibberellin),是一类属于双萜类化合物的植物激素。赤霉素最突出的生理效应是促进茎的伸长和诱导长日植物在短日条件下抽薹开花。关于赤霉素的作用机理,研究得较深入的是它对去胚大麦种子中淀粉水解的诱发。种子萌发过程中贮藏物质的动员,需要在一系列酶的催化作用下才能进行。这些酶有的已经

NK细胞活性测定实验

实验方法原理 用放射性核素标记靶细胞,当靶细胞受到破坏时,放射性核素被释放出来,通过测定释放或残留在未被破坏细胞内的放射性核素放射活性,即可计算和推测杀伤细胞的细胞毒活性。常用的放射性核素有51Cr、3H-Dr、125I-UdR等。本实验采用51Cr释放法检测人NK细胞活性。实验材料 靶细胞试剂、试

天麻提取物的活性成分及含量测定

  活性成分  化学成分含天麻甙(天麻素,gastrodin)、天麻甙元、天麻醚甙(gastrodioside)、 派立辛(parishin)、香草醇、β2甾醇、对羟基苯甲醛、柠檬酸、琥珀酸等。  含量测定  照高效液相色谱法测定。  色谱条件与系统适应性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;甲醇-

动物所获得高基因编辑活性和低背景活性的药物诱导系统

  在生物学研究中,如何对正常或病理状态下的动态生物系统进行有规律的操控,主要取决于是否可对靶细胞基因组进行有效而精准的调控。CRISPR/Cas9技术的出现,使针对特定位点的基因编辑以一种更为简便、自如的方式进行,而将药物调控元件与CRISPR/Cas9技术的融合则进一步拓展了其应用范围和模式,赋

NK细胞活性测定:LDH法原理和实验步骤

一、原理 活细胞的胞浆内含有LDH。正常情况下,LDH不能透过细胞膜,当细胞受到NK细胞的杀伤后,LDH释放到细胞外。LDH 可使乳酸锂脱氢,进而使NAD还原成NADH,后者再经递氢体吩嗪二甲酯硫酸盐(PMS)还原碘硝基氯化四氮唑(INT),INT 接受H+被还原成紫红色甲月赞类化合物。在酶

降落数值测定仪对小麦淀粉酶活性研究分析

  谷物中淀粉酶活性的不同会导致物质在糊化状态下降速度的不同,通过降落数值测定仪对活性酶的测量,我们还可以判断谷物的发芽损伤程度,作为粮食质量检验标准的仪器,在面粉领域中,该仪器的使用时非常普遍的。  降落数值测定仪是测定谷物中淀粉酶活性的仪器,小麦粉的悬浮液在沸水浴中迅速糊化,并因其中淀粉酶活性的

α、β和γ干扰素诱导的抗病毒活性的检测

基 本 方 案 小 鼠 干 扰 素 诱 导 的 抗 病 毒 活 性 的 检 测材 料干扰素敏感的 L 929 成纤维细胞E M E M 培 养 基(Eagle 氏最低要求培养基)胰酶消化液检 测 样 品(具干扰素活性的血清或培养上清)小鼠干扰素的参照标准品 α -干扰素、β-干扰素、 γ-干 扰 素

谷丙转氨酶的活性测定实验

显色法             实验方法原理 血清谷丙转氨酶(SGPT)能催化丙氨酸与酮戊二酸生成谷氨酸和丙酮酸,丙酮酸在酸性条件下与2,4-二硝基苯肼可缩合成丙酮酸二硝基苯腙,该腙

总黄酮的提取和测定

实验原理黄酮类化合物是植物的重要次生代谢产物,也是一些保健品和中药材的有效成分之一。黄酮类化合物的定量方法常用的有 HPLC法和分光光度法,在实际生产和科研过程中,对于黄酮单体的定量常采用HPLC法,而对总黄酮的测定,考虑到方法的简便、快捷以及可行性,多采用在碱性介质中加铝盐显色的分光光度法。在

活性肽的提取方法

  肽类的提取方法主要有两种,一种是化学法提取,一种是物理法提取。二者各有利弊,“化学提取法”主要是“化学酶反应提取法”。其反应快,生产量大,但缺点是提取出来的肽类活性较低,该法是市面上肽类产品的主要来源;“物理提取法”主要指“介质电容法活性肽提取技术”,其特点是反应慢,生产量小,但是生产出来的肽类

活性肽的提取方法

  肽类的提取方法主要有两种,一种是化学法提取,一种是物理法提取。二者各有利弊,“化学提取法”主要是“化学酶反应提取法”。其反应快,生产量大,但缺点是提取出来的肽类活性较低,该法是市面上肽类产品的主要来源;“物理提取法”主要指“介质电容法活性肽提取技术”,其特点是反应慢,生产量小,但是生产出来的肽类

α淀粉酶的测定

实验方法原理 将淀粉切割成小片段和麦芽糖。不同来源的 α-淀粉酶的最适 pH 不同。从 Bacillus subtilis 中提取的细菌酶在 pH 5.5 时有其最高活性,并且必须采用适合的缓冲溶液。实验材料 4-α-D-葡聚糖葡聚糖水解酶试剂、试剂盒 磷酸钾麦芽糖溶液淀粉溶液二硝基水杨酸试剂仪器

唾液淀粉酶活性的观察(1)

(一)原理酶是指化学本质为蛋白质的生物催化剂。在一定条件下,酶促化学反应进行的能力即称为酶活性(酶活力)。影响酶活性的因素是多方面的,如温度、PH及某些化学物质等都会影响酶的催化活性。在一定条件下,能使酶活性达到最高时的温度即酶的最适温度,而能使酶活性达到最高时的PH即酶的最适PH。例如,唾液淀粉酶

唾液淀粉酶活性的观察(2)

(三)操作   1.唾液淀粉酶应用液的制备 (1)每人取一个干净的饮水杯,装上蒸馏水。 (2)先用蒸馏水漱口,将口腔内的食物残渣清除干净。 (3)口含约20ml蒸馏水,做咀嚼动作1~2min,以分泌较多的唾液。然后将口腔中的唾液吐入一个干净的小

RNA-的提取和纯化实验

虽然 FDD 利用了真核 mRNA 的多聚腺苷酸 [poly(A)+] 位点,但并不推荐使用 poly(A)+RNA,因为在反转录反应中可能污染寡核苷酸,并因此增加假阳性的概率。所以建议使用总 RNA 做 FDD 分析。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。试剂、试剂盒氯仿焦

RNA-的提取和纯化实验

            试剂、试剂盒 氯仿 焦碳酸二乙酯 乙醇 异丙醇 苯酚-胍盐单相溶液 磷酸盐缓冲液

RNA-的提取和纯化实验

试剂、试剂盒 氯仿焦碳酸二乙酯乙醇异丙醇苯酚-胍盐单相溶液磷酸盐缓冲液仪器、耗材 离心机和转头移液器离心管锥形管平板匀浆器实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂氯仿焦碳酸二乙酯(DEPC) 处理过的 H20(GenHimterR105)乙醇70% 乙醇洗液(用 DEPC 处理过的 H20 配制)

淀粉酶活力测定实验中有哪些影响因素

  1.反应速度  大多数酶促反应是可逆反应,其速度既受底物浓度的影响,也受产物生成量的影响。当底物浓度较高时,在反应的初期,其浓度变化甚微,产物生成量也很少,此时反应速度可看作是恒定的。酶反应动力学中所指速度就是反应的初速度。  2.底物浓度  米氏方程ν=νmax[S]/Km+[S]是反映酶促反

硝酸还原酶活性的测定实验

实验方法原理 硝酸还原酶是植物氮素代谢作用中的关键酶,与作物吸收和利用硝态氮的能力相关。它催化NO3-还原为NO2-的反应:NO3-+NADH+H+→NO2-+NAD++H2O反应产生的NO2-可从组织内渗透到外界溶液中,定时测定一定的反应溶液中NO2-含量的变化情况则可了解此酶的活性大小。NO2-

硝酸还原酶活性的测定实验

实验方法原理:硝酸还原酶是植物氮素代谢作用中的关键酶,与作物吸收和利用硝态氮的能力相关。它催化NO3-还原为NO2-的反应:NO3-+NADH+H+→NO2-+NAD++H2O反应产生的NO2-可从组织内渗透到外界溶液中,定时测定一定的反应溶液中NO2-含量的变化情况则可了解此酶的活性大小。NO2-

硝酸还原酶活性的测定实验

实验方法原理硝酸还原酶是植物氮素代谢作用中的关键酶,与作物吸收和利用硝态氮的能力相关。它催化NO3-还原为NO2-的反应:NO3-+NADH+H+→NO2-+NAD++H2O反应产生的NO2-可从组织内渗透到外界溶液中,定时测定一定的反应溶液中NO2-含量的变化情况则可了解此酶的活性大小。NO2-的

透化细胞和退化细胞器中测定比活性实验

1.从标记细胞提取ATP1)  备下列材料:本实验用到的所有溶液必须用Mlli - Q纯化的水或它的等价物配制。冰冷的4%高氣酺(v/v)三-n-辛胺1,1,2-三氮三m乙烷32p标记的细胞带螺帽的聚丙烯离心管测量范围PH4~8的PH试纸小心:高氣酸■ 三-n -辛胺; U  1,2-三氯三氟乙烧;

透化细胞和退化细胞器中测定比活性实验

从标记的细胞或者细胞裂解物中提取ATP用发光分析定量测定ATP用高效液相层析定量测定ATP测定[γ-32P]ATP的比活性实验步骤1.从标记细胞提取ATP1)  备下列材料:本实验用到的所有溶液必须用Mlli - Q纯化的水或它的等价物配制。冰冷的4%高氣酺(v/v)三-n-辛胺1,1,2-三氮三m

透化细胞和退化细胞器中测定比活性实验

从标记的细胞或者细胞裂解物中提取ATP 用发光分析定量测定ATP 用高效液相层析定量测定ATP 测定[γ-32P]ATP的比活性             实验步骤

NK细胞活性测定:同位素法原理和实验步骤

一、原理 将用同位素3H-TdR标记的靶细胞与淋巴细胞共同培养时,靶细胞可被NK细胞杀伤。同位素便从被杀伤的靶细胞中释放出来,其释放的量与NK细胞活性成正比。通过测定靶细胞3H-TdR的释放率即可反应NK细胞的活性。 二、仪器和材料 液体闪烁仪、多头细胞取集器、二氧化碳培养箱、3H-TdR、RPMI

活性肽的提取方法介绍

  肽类的提取方法主要有两种,一种是化学法提取,一种是物理法提取。二者各有利弊,“化学提取法”主要是“化学酶反应提取法”。其反应快,生产量大,但缺点是提取出来的肽类活性较低,该法是市面上肽类产品的主要来源;“物理提取法”主要指“介质电容法活性肽提取技术”,其特点是反应慢,生产量小,但是生产出来的肽类

环境条件对淀粉酶活性的影响

一、目的植物组织中存在有淀粉酶(分α—、β—两种),能将贮藏淀粉水解成麦芽糖。从而影响种子的萌发或植物的生长。本实验的目的在于测定淀粉酶活性并观察环境条件(如温度、pH)及某些化学物质对淀粉酶活性的影响。二、原理淀粉酶的活性和其他酶一样,受环境条件的影响,尤其是对温度及pH的变化非常敏感,表现有最适