华东理工杨弋教授发文：这种合成方法实现活细胞RNA成像
2019年11月5日，华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室杨弋教授等在Nature Biotechnology（《自然—生物技术》）杂志上发表了封面学术论文，题为“Visualizing RNA dynamics in live cells with bright and stable fluorescent RNAs”。该论文报道他们利用系列高性能荧光RNA，实现不同种类RNA在动物细胞内活体的荧光标记与无背景成像。 迄今为止，在自然界尚未发现天然存在的荧光RNA。目前人工合成的少数几种荧光RNA荧光强度弱，性能不稳定，难以实用。针对这一亟需解决的技术挑战，杨弋教授等组建了化学生物学与合成生物学联合攻关团队，利用全新的分子设计及分子共同定向进化技术，首次获得了系列高亮、稳定、低背景的荧光RNA。这些荧光RNA分子结构紧凑，特异结合创新染料分子后产生强烈荧光，可呈现蓝、绿、黄、橙、红等不同颜色，与五颜六色的辣椒相似，因......阅读全文
荧光标记杂交信号的检测方法
使用荧光标记物的研究者最多，因而相应的探测方法也就最多、最成熟。由于荧光显微镜可以选择性地激发和探测样品中的混合荧光标记物，并具有很好的空间分辨率和热分辨率，特别是当荧光显微镜中使用了共焦激光扫描时，分辨能力在实际应用中可接近由数值孔径和光波长决定的空间分辨率，而在传统的显微镜是很难做到的，这便为D
荧光染料CFSE活细胞标记的特点
荧光染料CFSE(CFDA-SE)，是一种可对活细胞进行荧光标记的新型染料，可以标记活体细胞。其基本原理如下：CFSE能够轻易穿透细胞膜，在活细胞内与胞内蛋白共价结合，水解后释放出绿色荧光。在细胞分裂增殖过程中，它的荧光强度会随着细胞的分裂而逐级递减，标记荧光可平均分配至两个子代细胞中，因此其荧光强
荧光染料CFSE活细胞标记的特点
荧光染料CFSE(CFDA-SE)，是一种可对活细胞进行荧光标记的新型染料，可以标记活体细胞。其基本原理如下：CFSE能够轻易穿透细胞膜，在活细胞内与胞内蛋白共价结合，水解后释放出绿色荧光。在细胞分裂增殖过程中，它的荧光强度会随着细胞的分裂而逐级递减，标记荧光可平均分配至两个子代细胞中，因此其荧光强
荧光标记杂交信号的检测方法
由于荧光显微镜可以选择性地激发和探测样品中的混合荧光标记物,并具有很好的空间分辨率和热分辨率,特别是当荧光显微镜中使用了共焦激光扫描时,分辨能力在实际应用中可接近由数值孔径和光波长决定的空间分辨率,而在传统的显微镜是很难做到的,这便为DNA芯片进一步微型化提供了重要的检测方法的基础。大多数方法都是在
荧光素标记试剂与酶标试剂
(1)酶标试剂：酶标抗体仅需适当底物和普通光学显微镜即可高度敏感地检出抗原。由于信号是通过吸收光的差异，而非发射光来检测，底物的不溶性显色产物分布在酶所在位置的周围区域，因此这种检测方法尚不能达到荧光技术的分辨率。 酶反应后出现沉淀，在酶所处位置周围产生不溶性显色产物，通过底物的显色来检出
FITC荧光素标记抗体的操作步骤
当FITC在碱性溶液中与抗体蛋白反应时，主要是蛋白质上赖氨酸的r氨基与荧光素的硫碳胺键（thiocarbmide）结合，形成FITC-蛋白质结合物，即荧光抗体或荧光结合物。一个IgG分子中有86个赖氨酸残基，一般zui多能结合15～20个，一个IgG分子可结合2～8个分子的FITC，其反应式如下：F
荧光标记基团的选择及其在荧光定量PCR中的应用
PCR实验室产品选择指南 荧光 基团是吸收一定波长的光子后发射特定波长的光波，可以作为抗体等分子的标记物，实时荧光定量PCR中的Taqman探针常用荧光基团FAM标记荧光基团和TAMRA标记。 荧光基团 吸收特定波长的光子后荧光染料(通常称为“荧光基团”或简称为“荧光素”)的化
免疫荧光标记最常用的荧光染料有哪些条件呢
用于免疫荧光染色的染料需具备以下几个条件： 荧光染料应有较高的量子产额和消光系数； 荧光染料对488nm的激发光波长有较强的吸收； 发射光波长与激发光波长之间应有较大的波长差； 容易与被标记的单克隆抗体结合而不影响抗体自身的特异性。 1.异硫氰酸荧光素（FITC）：可产生亮绿色荧光。F
LSCM的无荧光封固剂封片
对于荧光标记过的样品应该用无荧光封固剂封片，并尽量选择封片后可以凝固的无荧光封固剂，如 Mowiol 4 ~ 88 ( SIGMA，Produce No.:81381)。如果临时封片，也可以封于 50% 甘油中，此时应尽量使用最少体积的液体，以减少样品移动。配制 Mowiol 封固剂时，在50mL
我所发展RNA“缓冲荧光探针”用于细胞核核仁成像和核仁应激试剂筛选
原文地址：http://www.dicp.cas.cn/xwdt/kyjz/202403/t20240320_7046923.html近日，我所生物技术研究部分子探针与荧光成像研究组（1818组）乔庆龙副研究员和徐兆超研究员团队发展了能够与RNA特异性可逆结合，在活细胞内对细胞核核仁稳定成像的“缓冲
体内荧光成像技术的进展（三）
成像新策略的出现改进探针亲和性的多种途径探针同靶点的紧密和特异性结合通常是成像成功的关键。因为许多成像靶点都位于细胞表面之外，所以多途径原则可以用来改善探针的结合亲和性。最近有两篇文献报道了用于异种移植肿瘤αvβ3 整合素（integrin）体内成像的RGD（Arg-Gly-Asp ）寡肽的
体内荧光成像技术的进展（一）
体内荧光成像技术利用一架灵敏的照相机，检测活的整体小动物荧光团的荧光发射，从而获得清晰的图像。为了克服活组织的光子衰减，通常优先选取近红外区(NIR)的长波发射荧光团，包括广泛应用的小分子靛炭菁染料。NIR探针的数目最近随着有机、无机和生物荧光纳米颗粒的采用而不断增加。在体内荧光成像领域，成像策略和
双向凝胶荧光染色与成像实验
试剂、试剂盒：提取液 洗涤液 溶解液
体内荧光成像技术的进展（二）
可激活定靶探针可激活定靶探针一般用于酶活的功能成像。它们往往含有两个以上的等同或不同的色素团，两个色素团通过酶特异性多肽接头彼此紧密相连。这类探针主要呈黑色，没有或者很少发射荧光，这主要是由于非常相近（等同色素团）或者共振能的转移(不同色素团 )所造成的淬灭效应所致。多肽接头的切除，使它们的
双向凝胶荧光染色与成像实验
试剂、试剂盒 提取液洗涤液溶解液第一向电泳缓冲液还原溶液烷基化溶液琼脂糖溶液丙烯酰胺凝胶溶液仪器、耗材 双向凝胶电泳光扫描仪或密度计实验步骤 3.1 可溶性总蛋白的提取方法（三氯乙酸/丙酮法）( 1 ) 从拟南芥细胞悬浮培养液中收集细胞。( 2 ) 液氮中研磨细胞。( 3 ) 向研磨好的细胞粉末中加
FluorCam多光谱荧光成像技术介绍
FluorCam多光谱荧光成像系统作为FluorCam叶绿素荧光成像系统的最高级型号，是目前唯一有能力实现了一台仪器上同时完成叶绿素荧光、UV-MCF多光谱荧光、NDVI归一化植被指数以及GFP、YFP、BFP、RFP、CFP、DAPI等荧光蛋白与荧光染料的成像分析功能。同时也可以加装RGB真彩成像
荧光成像技术的广泛应用
当今生物医学的发展已由传统基于症状的治疗模式，向以信息为依据的精准诊疗模式转变，医学影像技术的发展反映并引领着临床医学的进步。荧光成像技术具有检测灵敏度高、无辐射危害等优点，在生物医学领域具有广泛的应用。 近日，中国科学院苏州纳米技术与纳米仿生研究所研究员王强斌课题组接受《美国化学学会—纳
双向凝胶荧光染色与成像实验
试剂、试剂盒提取液洗涤液溶解液第一向电泳缓冲液还原溶液烷基化溶液琼脂糖溶液丙烯酰胺凝胶溶液仪器、耗材双向凝胶电泳光扫描仪或密度计实验步骤3.1 可溶性总蛋白的提取方法（三氯乙酸/丙酮法）( 1 ) 从拟南芥细胞悬浮培养液中收集细胞。( 2 ) 液氮中研磨细胞。( 3 ) 向研磨好的细胞粉末中加入提取
荧光响应型CRISPR荧光探针实现活细胞基因组高清成像
中国科学院动物研究所研究员李幸系统梳理并评述了荧光点亮响应型CRISPR成像探针在活细胞基因组DNA成像中的最新进展，为这一前沿领域提供了全面的技术概览与未来展望。相关论文在线发表于《细胞-化学生物学》。 在活细胞中原位解析基因组DNA的动态行为，对揭示染色质三维结构、DNA相互作用、基因表达
免疫荧光共标记怎么计算共标记的细胞个数
共定位的定义：共定位是对样品内两种荧光标记的信号共同分布的位置进行分析。 共定位就如字面意思上所说的，只能够表明蛋白A和B都在此细胞有表达，并且在同样的细胞内位置/细胞器。相关短语：共定位通道 PDM Channel 细胞共定位 Cellular co localization 细胞内共定位信息 c
免疫球蛋白标记技术_荧光素标记抗体技术
实验方法原理目前用于抗体标记的荧光素主要有异硫氰酸荧光素（Fluorescein isothiocynate，FITC）或罗达明（Lissamine rhodamine B200，RB200）。在碱性条件下FITC的碳酰胺键可与抗体赖氨酸的ε氨基共价结合，标记后的抗体仍保持与相应抗原结合的能力。在荧
如何选择小动物活体荧光成像系统
小动物活体荧光成像技术在国内外得到越来越的普及应用，越来越多的科研人员希望能通过该技术来长时间追踪观察活体动物体内肿瘤细胞的生长以及对药物治疗的反应，希望能观察到荧光标记的多肽、抗体、小分子药物在体内的分布和代谢情况。与传统技术相比，活体荧光成像技术不需要杀死动物，可以对同一个动物进行长时间反复跟踪
如何选择小动物活体荧光成像系统
小动物活体荧光成像技术在国内外得到越来越的普及应用，越来越多的科研人员希望能通过该技术来长时间追踪观察活体动物体内肿瘤细胞的生长以及对药物治疗的反应，希望能观察到荧光标记的多肽、抗体、小分子药物在体内的分布和代谢情况。与传统技术相比，活体荧光成像技术不需要杀死动物，可以对同一个动物进行长时间反复跟踪
如何选择小动物活体荧光成像系统
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如何选择小动物活体荧光成像系统？
小动物活体荧光成像技术在国内外得到越来越的普及应用，越来越多的科研人员希望能通过该技术来长时间追踪观察活体动物体内肿瘤细胞的生长以及对药物治疗的反应，希望能观察到荧光标记的多肽、抗体、小分子药物在体内的分布和代谢情况。 与传统技术相比，活体荧光成像技术不需要杀死动物，可以对同一个
如何选择小动物活体荧光成像系统
小动物活体荧光成像技术在国内外得到越来越的普及应用，越来越多的科研人员希望能通过该技术来长时间追踪观察活体动物体内肿瘤细胞的生长以及对药物治疗的反应，希望能观察到荧光标记的多肽、抗体、小分子药物在体内的分布和代谢情况。与传统技术相比，活体荧光成像技术不需要杀死动物，可以对同一个动物进行长时间反复跟踪
如何选择小动物活体荧光成像系统
小动物活体荧光成像技术在国内外得到越来越的普及应用，越来越多的科研人员希望能通过该技术来长时间追踪观察活体动物体内肿瘤细胞的生长以及对药物治疗的反应，希望能观察到荧光标记的多肽、抗体、小分子药物在体内的分布和代谢情况。与传统技术相比，活体荧光成像技术不需要杀死动物，可以对同一个动物进行长时间反复跟踪
如何选择小动物活体荧光成像系统
小动物活体荧光成像技术在国内外得到越来越的普及应用，越来越多的科研人员希望能通过该技术来长时间追踪观察活体动物体内肿瘤细胞的生长以及对药物治疗的反应，希望能观察到荧光标记的多肽、抗体、小分子药物在体内的分布和代谢情况。与传统技术相比，活体荧光成像技术不需要杀死动物，可以对同一个动物进行长时间反复跟踪
量子产率超过90％荧光标记的最强荧光——藻胆蛋白
藻胆蛋白是源自微藻和蓝细菌的光合作用光捕获蛋白家族。这些蛋白质具有共价连接的线性四吡咯基团，称为藻胆素，其在捕获光能中起关键作用。在微藻和蓝细菌中，由这些藻胆素吸收的能量通过荧光共振能量转移（FRET）有效地转移到叶绿素色素用于光合作用反应。与化学合成荧光染料相比，藻胆蛋白由于其相对高的荧光量子产率
单克隆抗体的标记(酶标记、荧光素标记、同位素标记和...2
单克隆抗体的标记(酶标记、荧光素标记、同位素标记和生物素标记)（3）移入透析袋中，在1000ml 0.01mol/L PH9.5碳酸盐缓冲液中，4℃透析过夜，更换三次缓冲液，注意避光。 （4）吸取上述醛化好的HRP溶液3ml，加入5mg IgG的碳酸盐缓冲液1ml，室温轻搅2-3小时，避光；加入5m